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水稻基因AL2调控叶绿体内含子剪接的分子机理研究
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水稻基因AL2调控叶绿体内含子剪接的分子机理研究
论文目录
摘要
第1-5页
Abstract
第5-8页
英文缩略词与符号表
第8-12页
1 文献综述
第12-22页
· 叶色突变体的来源
第13页
· 叶色突变体的表型与叶绿素含量的关系
第13-14页
· 叶色突变体的表型与叶绿体的结构
第14页
· 叶色变异的遗传方式
第14-15页
· 叶色突变的分子机制
第15-17页
· 叶绿素生物合成途径受阻
第15页
· 叶绿素降解途径受阻
第15-16页
· 叶绿体的分化和发育受阻
第16页
· 质核信号传导途径受阻
第16-17页
· 叶绿体蛋白转运受阻
第17页
· 叶绿体基因组的结构与表达调控
第17-21页
· 叶绿体基因组的结构
第17-18页
· 叶绿体基因的转录
第18-19页
· 叶绿体基因的转录后加工
第19-21页
· RNA加工
第19页
· RNA编辑
第19页
· RNA剪接
第19-21页
· 本研究的目的和意义
第21-22页
2 材料与方法
第22-39页
· 供试植物材料
第22-23页
· 材料种植
第23页
· 主要试剂
第23页
· 主要仪器设备
第23-24页
· 叶绿素含量的测定
第24页
· 透射电子显微镜观察样品的制作
第24-25页
· GUS活性组织化学染色
第25页
· 引物的设计与合成
第25-30页
· AL2基因的RT-PCR引物
第26页
· AL2基因的qRT-PCR引物
第26-27页
· 叶绿体内含有I型和II型内含子基因的qRT-PCR引物
第27页
· 水稻CBGs的qRT-PCR引物
第27-28页
· 水稻PEP的qRT-PCR引物
第28-29页
· 水稻NEP的qRT-PCR引物
第29-30页
· 水稻NECGs的q RT-PCR引物
第30页
· 水稻总DNA的提取
第30-31页
· 水稻原生质体GFP蛋白的瞬时表达
第31-36页
· 引物设计
第31-32页
· PCR扩增及产物纯化
第32页
· 双酶切
第32-33页
· 连接
第33页
· 质粒DNA转化大肠杆菌
第33页
· 转化子的鉴定
第33-34页
· 质粒DNA的制备和纯化
第34页
· 水稻原生质体的游离
第34-35页
· 质粒DNA转化原生质体
第35页
· 蛋白的亚细胞定位及观察
第35-36页
· 水稻总RNA的提取
第36页
· 反转录第一链的合成
第36-37页
· 内参基因actin的检测
第37页
· 基因表达的RT-PCR分析
第37-38页
· PCR反应
第37页
· 电泳及凝胶成像系统检测
第37-38页
· 基因表达的qRT-PCR分析
第38页
· qRT-PCR反应
第38页
· 基因表达的相对定量
第38页
· 进化树的构建
第38-39页
3 结果
第39-54页
· 叶色突变体al2的表型
第39-40页
· 叶色突变体al2的叶绿体超微结构
第40-41页
· 水稻基因AL2候选基因的分析
第41-42页
· 水稻基因AL2的功能验证
第42-45页
· 水稻基因AL2的功能互补
第42-44页
· 水稻基因AL2的敲除
第44-45页
· 水稻基因AL2的表达模式
第45-49页
· 水稻基因AL2的启动子与GUS的融合表达
第45-46页
· 水稻基因AL2在不同组织器官的表达量
第46-47页
· 水稻AL2-GFP融合蛋白的亚细胞定位
第47-49页
· 水稻AL2基因参与叶绿体基因内含子的剪接
第49-52页
· 水稻AL2同源蛋白的进化关系
第49-51页
· 突变体al2中含有叶绿体I型和II型内含子基因的表达
第51-52页
· 叶绿体相关基因的表达
第52-54页
4 讨论与结论
第54-57页
· 讨论
第54-55页
· AL2可能参与叶绿体基因I型、IIA型和IIB型内含子的剪接
第54-55页
· AL2是协同部分叶绿体相关基因的表达来调控叶绿体发育的
第55页
· 结论
第55-57页
致谢
第57-58页
参考文献
第58-69页
附录A 相关载体构建所用引物
第69-70页
附录B 水稻木村B水培营养液(1000×)
第70-71页
附录C 水稻AL2蛋白序列(948AA)
第71页
本篇论文共
71
页,
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