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象草MYB4转录因子及CCR启动子的克隆与功能分析
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象草MYB4转录因子及CCR启动子的克隆与功能分析
论文目录
 
摘要第1-5页
Abstract第5-8页
英文缩写表第8-16页
第1章 前言第16-31页
　　· 能源危机第16页
　　· 能源植物与木质素第16-17页
　　· 木质素第17-19页
　　　　· 木质素的基本结构第17页
　　　　· 木质素的利与弊第17-18页
　　　　· 木质素的生物合成途径第18-19页
　　· 木质素生物合成的调控第19-21页
　　　　· 木质素合成途径中关键酶基因的调控第19-20页
　　　　· 转录因子对木质素合成的调控第20-21页
　　· 转录因子第21-26页
　　　　· 转录因子的结构特征及分类第21-22页
　　　　· MYB转录因子的研究进展第22-23页
　　　　· MYB转录激活因子对木质素的合成调控第23页
　　　　· MYB转录抑制因子对木质素的合成调控第23-26页
　　· 环境因子对木质素合成的影响第26页
　　· 植物启动子的研究进展第26-27页
　　· 植物启动子的分类第27-29页
　　　　· 组成型启动子第28页
　　　　· 诱导型启动子第28页
　　　　· 组织特异型启动子第28-29页
　　· 象草的研究进展第29-30页
　　· 研究的目的及意义第30-31页
第2章 象草PpMYB4转录因子的克隆及其功能验证第31-74页
　　· 实验材料第31-36页
　　　　· 实验植物第31页
　　　　· 菌种和质粒第31页
　　　　· 主要仪器设备第31-32页
　　　　· 主要试剂、试剂盒及来源第32页
　　　　· 主要试剂配置第32-36页
　　· 实验方法第36-51页
　　　　· PpMYB4基因CDS序列克隆第36-40页
　　　　　　· 植物总RNA的提取第36页
　　　　　　· c DNA第一条链的合成第36-37页
　　　　　　· PpMYB4基因CDS序列的扩增第37页
　　　　　　· PCR产物检测与回收第37-38页
　　　　　　· 目的基因与T载体的连接第38页
　　　　　　· 大肠杆菌Top10感受态制备第38-39页
　　　　　　· 重组质粒的转化第39页
　　　　　　· 重组质粒的PCR鉴定第39-40页
　　　　　　· 质粒提取第40页
　　　　· PpMYB4基因生物信息学分析第40-41页
　　　　　　· 序列基本信息分析第40-41页
　　　　　　· 蛋白质基本理化性质分析第41页
　　　　　　· 系统进化树构建及序列的多重比较第41页
　　　　　　· 蛋白质结构模拟第41页
　　　　· 象草PpMYB4亚细胞定位载体构建第41-44页
　　　　　　· 目的片段的克隆第41-42页
　　　　　　· PCR产物回收第42页
　　　　　　· PCR产物的酶切与连接第42-43页
　　　　　　· 重组子的鉴定第43-44页
　　　　· 象草PpMYB4亚细胞定位研究第44-45页
　　　　　　· 质粒浓缩第44页
　　　　　　· 象草原生质体的分离第44页
　　　　　　· 酶液的配制与酶解条件第44页
　　　　　　· 原生质体的纯化第44-45页
　　　　　　· 原生质体转化第45页
　　　　· 象草PpMYB4过表达载体的构建第45-46页
　　　　　　· 目的片段的克隆第45-46页
　　　　　　· 酶切、连接和转化第46页
　　　　　　· 重组子的鉴定第46页
　　　　· 烟草的遗传转化第46-47页
　　　　　　· EHA105感受态制备第46页
　　　　　　· 农杆菌EHA105的冻融法转化第46-47页
　　　　　　· 烟草叶盘法遗传转化第47页
　　　　· 转基因烟草的鉴定第47-48页
　　　　　　· 转基因烟草DNA提取第47-48页
　　　　　　· PCR鉴定第48页
　　　　　　· 半定量RT-PCR鉴定第48页
　　　　· Real-time PCR检测第48-50页
　　　　　　· 烟草总RNA的提取和检测第48-49页
　　　　　　· c DNA第一链合成第49页
　　　　　　· Real-time PCR第49-50页
　　　　· 木质素含量测定第50-51页
　　　　　　· 木质素标准曲线的绘制第50页
　　　　　　· 木质素含量测定第50-51页
　　　　· 木质素特异性染色第51页
　　　　　　· Wiesner染色第51页
　　　　　　· M?ule染色第51页
　　· 结果与分析第51-68页
　　　　· PpMYB4基因c DNA序列的克隆与分析第51-53页
　　　　· PpMYB4基因生物信息学分析第53-60页
　　　　　　· 基本理化性质分析第53-55页
　　　　　　· PpMYB4氨基酸序列的系统进化树构建及序列的多重比较第55-58页
　　　　　　· 蛋白质结构预测第58-60页
　　　　· PpMYB4基因的亚细胞载体构建第60-61页
　　　　· 亚细胞定位第61页
　　　　· PpMYB4植物过表达载体构建第61-62页
　　　　· 转基因烟草的PCR鉴定第62-63页
　　　　· 转基因烟草的RT-PCR鉴定第63页
　　　　· 转基因植株表型及木质素含量的测定第63-65页
　　　　· 木质素特异染色第65-67页
　　　　· 木质素合成关键酶基因的表达量测定第67-68页
　　· 讨论第68-72页
　　　　· PpMYB4基因的基本特征第68页
　　　　· PpMYB4转录因子蛋白结构与系统进化分析第68-69页
　　　　· PpMYB4基因亚细胞定位第69-70页
　　　　· PpMYB4在烟草中过量表达第70-72页
　　· 本章总结第72-74页
第3章 象草PpCCR基因启动子的克隆及表达分析第74-96页
　　· 引言第74-75页
　　· 实验材料第75-77页
　　　　· 实验植物第75页
　　　　· 菌种和质粒第75页
　　　　· 主要仪器设备第75页
　　　　· 主要试剂、试剂盒及来源第75-76页
　　　　· 主要试剂配置第76-77页
　　　　　　· GUS染色所需溶液第76页
　　　　　　· GUS酶活检测所需溶液第76页
　　　　　　· 转基因烟草激素响应实验所需溶液第76-77页
　　　　　　· 其他溶液及培养基第77页
　　· 实验方法第77-83页
　　　　· 象草PpCCR基因启动子的克隆第77-79页
　　　　　　· 植物基因组DNA的提取第77页
　　　　　　· 引物的设计第77-78页
　　　　　　· PCR扩增第78-79页
　　　　　　· PCR产物的检测、回收与测序第79页
　　　　　　· 序列分析第79页
　　　　· 象草PpCCR基因启动子表达载体的构建第79-80页
　　　　　　· 目的片段的克隆第79-80页
　　　　　　· 酶切、连接与转化第80页
　　　　　　· 重组子的鉴定第80页
　　　　· 烟草的遗传转化第80页
　　　　　　· 农杆菌EHA105感受态的制备第80页
　　　　　　· 农杆菌EHA105的冻融法转化第80页
　　　　　　· 烟草的叶盘法转化第80页
　　　　· 转基因烟草的鉴定第80-81页
　　　　　　· 转基因植株DNA的提取和PCR鉴定第80页
　　　　　　· GUS组织化学染色第80-81页
　　　　· 植物激素处理第81页
　　　　· GUS酶活性测定第81-82页
　　　　　　· 植物总蛋白的提取第81页
　　　　　　· 蛋白定量第81页
　　　　　　· 提取液GUS活性的荧光测定第81-82页
　　　　· Real-time PCR检测第82-83页
　　　　　　· 烟草总RNA的提取和检测第82页
　　　　　　· c DNA第一链合成第82页
　　　　　　· Real-time PCR第82-83页
　　· 结果与分析第83-93页
　　　　· PpCCR基因启动子的克隆第83-85页
　　　　· PpCCR基启动子序列分析第85-87页
　　　　· PpCCR启动子载体构建第87-88页
　　　　· 烟草遗传转化与鉴定第88-89页
　　　　· GUS组织化学染色第89-90页
　　　　· PpCCR启动子对不同激素的响应第90-93页
　　　　　　· 激素处理不同时间对转基因植株茎部GUS酶活的影响第90-92页
　　　　　　· 激素处理不同时间转基因植株茎部GUS表达量第92-93页
　　· 讨论第93-95页
　　　　· PpCCR基因启动子的顺式作用元件第93-94页
　　　　· PpCCR启动子的表达特异性第94-95页
　　· 本章小结第95-96页
致谢第96-98页
参考文献第98-111页
附录A 引物表第111-113页
附录B 标准曲线第113-114页
附录C 硕士在读期间所发论文第114页

本篇论文共114页，点击这进入下载页面。
 
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