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两个棉花转录因子GhABF1和GhABF4逆境应答机制的研究

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两个棉花转录因子GhABF1和GhABF4逆境应答机制的研究
论文目录
 
摘要第1-6页
SUMMARY第6-8页
缩略词表第8-9页
第一章 文献综述第9-19页
  · 引言第9-13页
    · 棉花生产种植现状及面临的问题第9-10页
    · 干旱及盐碱对棉花的危害第10页
    · 棉花抗旱、抗盐碱的相关研究进展第10-13页
  · ABA在植物生长发育及抗逆境响应中的作用第13-14页
    · ABA在植物生长发育中的作用第13页
    · ABA在植物逆境响应中的作用第13-14页
  · AREB/ABFs转录因子第14-18页
    · AREB/ABFs转录因子结构及分类第15-16页
    · AREB/ABFs转录因子的作用机理第16-17页
    · AREB/ABFs转录因子的生物学功能第17-18页
    · 棉花AREB/ABFs类转录因子的相关研究第18页
  · 研究的目的和意义第18-19页
第二章 棉花GhABF1及Gh ABF4转录因子基因克隆及其序列分析第19-32页
  · 前言第19页
  · 实验材料第19-21页
    · 材料与试剂第19-21页
    · 仪器与设备第21页
  · 实验方法第21-27页
    · Gh ABF1和GhABF4转录因子基因的扩增第21-24页
      · 棉花材料的准备第21页
      · 棉花总RNA的提取及cDNA的合成第21-23页
      · 引物与模板第23页
      · 棉花Gh ABF1、Gh ABF4基因的扩增及产物纯化第23-24页
    · Gh ABF1、GhABF4与T载体连接及阳性克隆筛选第24-26页
    · 序列测定第26页
    · 序列分析第26-27页
  · 结果与分析第27-31页
    · 棉花RNA的提取和Gh ABF1和Gh ABF4基因的扩增第27-28页
    · 棉花Gh ABF1和Gh ABF4的生物信息分析第28-31页
  · 讨论第31-32页
第三章 VIGS沉默Gh ABF1和Gh ABF4对棉花抗逆性的影响第32-47页
  · 前言第32页
  · 实验材料第32-33页
    · 材料与试剂第32页
    · 仪器与设备第32-33页
  · 实验方法第33-39页
    · Gh ABF1和Gh ABF4基因片段的扩增及酶切第33-34页
      · 引物与模板第33页
      · GhABF1和GhABF4基因片段的扩增、回收及酶切第33-34页
    · pYL-156载体的酶切及产物回收第34页
    · 目的基因片段与干涉载体pYL-156的连接及阳性克隆的筛选第34-36页
    · 农杆菌GV3010的转化第36-38页
      · 农杆菌GV3101感受态的制备第36-37页
      · 农杆菌GV3101的转化第37页
      · 农杆菌工程菌的制备及注射第37-38页
    · VIGS沉默目的基因植株抗逆性检测第38-39页
      · VIGS沉默目的基因植株复水率测定第38页
      · 离体叶片脱水速率检测第38-39页
      · 叶片导电率的测定第39页
  · 结果与分析第39-46页
    · Gh ABF1和Gh ABF4基因片段的扩增第39-40页
    · 病毒干扰载体pYL156-Gh ABF1和pYL156-Gh ABF4的构建及酶切检测第40-41页
    · VIGS沉默目的基因植株的抗逆性检测第41-45页
      · VIGS沉默目的基因植株复水率测定第41-43页
      · 离体叶片脱水速率检测第43-44页
      · 叶片导电率的测定第44-45页
    · GhABF1和GhABF4沉默效果的PCR检测第45-46页
  · 讨论第46-47页
第四章 GhABF1和Gh ABF4的亚细胞定位第47-53页
  · 前言第47页
  · 实验材料第47页
    · 材料与试剂第47页
    · 仪器与设备第47页
  · 实验方法第47-50页
    · 植物材料的准备第47-48页
    · 亚细胞定位工程菌的制备第48-50页
      · 引物设计及带酶切位点的目的基因获得第48-49页
      · 带酶切位点的基因及载体的酶切与回收第49页
      · 目的基因与亚细胞定位载体EGFP的连接第49页
      · 大肠杆菌转化第49页
      · 重组质粒的提取、酶切检测及测序第49页
      · 农杆菌GV3101的转化第49页
      · 亚细胞定位工程菌制备及在烟草叶片中的瞬时表达第49-50页
      · 亚细胞定位的观测第50页
  · 结果与分析第50-52页
    · 亚细胞定位载体pEGFP-Gh ABF和pEGFP-Gh ABF4的构建第50-51页
    · Gh ABF1和GhABF4亚细胞定位第51-52页
  · 讨论第52-53页
第五章 Gh ABF1真核表达载体构建及烟草遗传转化第53-63页
  · 前言第53页
  · 实验材料第53-54页
    · 材料与试剂第53页
    · 仪器与设备第53-54页
  · 实验方法第54-57页
    · 植物材料的准备第54页
    · LBA4404工程菌的制备第54-56页
      · 引物设计及带酶切位点的Gh ABF1扩增第54页
      · 带酶切位点的基因及载体的的酶切与回收第54页
      · 目的基因与p Bin438的连接第54页
      · 大肠杆菌转化及阳性克隆的筛选第54页
      · 重组质粒的提取、酶切检测及测序第54-55页
      · 农杆菌LBA4404的转化第55页
      · 工程菌的制备及烟草转化第55页
      · 转基因烟草的筛选第55-56页
    · 转基因烟草植株抗逆检测第56-57页
      · 离体叶片脱水速率检测第56页
      · 叶片导电率的测定第56-57页
      · 可溶蛋白的测定第57页
  · 结果与分析第57-61页
    · 重组质粒Gh ABF1-p Bin438的酶切鉴定第57-58页
    · 转基因烟草的诱导及筛选第58-59页
    · 叶片相对电导率的测定第59页
    · 离体叶片失水速率测定第59-60页
    · 可溶蛋白含量的测定第60-61页
  · 讨论第61-63页
第六章 结论第63-64页
参考文献第64-71页
致谢第71-72页
作者简介第72-73页
司怀军导师简介第73-74页
吴家和导师简介第74-75页

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