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棉花T-DNA插入突变体侧翼序列分析与双T-DNA载体系统构建

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棉花T-DNA插入突变体侧翼序列分析与双T-DNA载体系统构建
论文目录
 
摘要第1-9页
Abstract第9-11页
缩略表第11-12页
第一章 文献综述第12-34页
  1 棉花功能基因组及突变体研究进展第12-21页
    · 棉花功能基因组研究第12-16页
      · 棉花基因组研究进展第12-13页
      · 棉花基因表达谱的分析第13-14页
      · 突变体在棉花中的应用进展第14-15页
      · 植物蛋白组学与植物代谢组学第15页
      · 生物信息的发展第15-16页
    · 突变体创建第16-19页
      · 理化诱变第16-17页
      · 农杆菌介导的插入突变第17-18页
      · 基因敲除技术第18-19页
    · Gene trap技术的应用第19-21页
      · Gene trap技术原理第19-20页
      · 基因的鉴定和分离第20-21页
  2 侧翼序列的分离与分析第21-25页
    · T-DNA侧翼序列分离研究进展第21-24页
      · 染色体步移概括第21-22页
      · 热不对称交错PCR(Tail-PCR技术)第22-23页
      · Fusion primer and nested integrated PCR(FPNI-PCR)第23-24页
    · T-DNA侧翼序列插入位点研究第24-25页
      · T-DNA插入位点在植物基因组中的分布特点第24页
      · T-DNA插入位点在植物基因组中个区域的分布特点第24-25页
      · T-DNA末端整合特点第25页
  3 转基因作物抗虫性及对昆虫的影响第25-28页
    · 转基因棉的抗虫性第26-27页
    · 转基因作物对昆虫的影响第27-28页
  4 复合转基因及去标记转基因植物研究进展第28-32页
    · 复合性状基因研究进展第28-29页
      · 复合性状转基因植物的定义第28页
      · 复合性状转基因植物获取的方法第28-29页
    · 转基因植物标记基因的去除第29-32页
      · 选择标记基因第29页
      · 选择标记基因的去除第29-32页
  5 研究的目的和意义第32-34页
    · 棉花T-DNA突变体创制及侧翼序列分离与分析第32-33页
    · 双T-DNA植物表达载体在棉花中的应用研究第33-34页
第二章 棉花T-DNA插入突变体的创制及侧翼序列的分离与分析第34-57页
  1 前言第34页
  2 实验材料与方法第34-42页
    · 实验材料第34-35页
      · 棉花材料第34-35页
      · 质粒载体第35页
    · 实验方法第35-42页
      · 农杆菌的活化第35-36页
      · 棉花YZ1和Jin668遗传转化体系的建立第36-37页
      · 棉花植株DNA的提取第37-38页
      · 转基因植株的PCR检测第38-39页
      · 转基因植株Southern blot分析第39-40页
      · 侧翼序列分离方法第40-41页
      · TA克隆及单克隆的挑取第41页
      · 侧翼序列分析方法第41-42页
  3 结果与分析第42-53页
    · 棉花遗传转化及转基因植株的鉴定第42-45页
      · 棉花植株再生体系及过程第42-43页
      · 棉花转基因株系的PCR鉴定第43-44页
      · 棉花转基因株系Southern杂交及拷贝数分析第44-45页
    · 棉花T-DNA侧翼序列分离第45-51页
      · T-DNA侧翼序列分离技术的建立第45-46页
      · T-DNA侧翼序列的分类及统计第46-47页
      · T-DNA侧翼序列转移整合性分析第47-49页
      · T-DNA侧翼序列的Blast分析第49-51页
    · 棉花T-DNA侧翼序列分析第51-53页
      · T-DNA侧翼序列在棉花亚基因组中的分布第51页
      · T-DNA侧翼序列在棉花基因组中各区域的分布第51-52页
      · T-DNA侧翼序列在棉花基因组中TE区的分布第52-53页
  4 讨论第53-57页
    · 农杆菌介导T-DNA插入突变体的培育第53-54页
    · 棉花T-DNA插入突变体库的大小第54页
    · T-DNA侧翼序列分离技术的建立与改良第54-56页
    · 总结与展望第56-57页
第三章 双T-DNA植物表达载体在棉花中的应用第57-70页
  1 前言第57页
  2 材料和方法第57-62页
    · 材料第57-58页
      · 植物材料第57-58页
      · 菌株、质粒第58页
    · 方法第58-62页
      · 不同目的基因特异引物的设计第58页
      · 不同目的基因的扩增及克隆第58页
      · 植物表达载体的构建第58-60页
      · 重组质粒农杆菌电击转化第60-61页
      · 大肠杆菌质粒DNA的提取第61页
      · 棉花遗传转化第61-62页
      · 棉花DNA的提取第62页
      · 转基因棉花的分子检测第62页
  3 结果分析第62-69页
    · 双T-DNA植物重组中间载体p CAMBIA2300SDT的构建第62-64页
      · Nos-LB-RB片段的扩增第62-63页
      · Nos-LB-RB片段和p CAMBIA2300S载体的连接及PCR检测第63页
      · p CAMBIA2300SDT载体的酶切验证第63-64页
    · 双T-DNA植物表达载体p CAMBIA2300SDT-m GFP5*的构建第64-66页
      · m GFP5*基因的克隆第64-65页
      · m GFP5*基因和p CAMBIA2300SDT酶切连接及PCR检测第65页
      · p CAMBIA2300SDT-m GFP5*载体酶切验证第65-66页
    · p CAMBIA2300SDT-cry1C*的构建第66-68页
      · cry1C*基因的克隆第66-67页
      · cry1C*基因和p CAMBIA2300SDT载体酶切连接及PCR检测第67页
      · p CAMBIA2300SDT-cry1C*的酶切验证第67-68页
    · 棉花转基因植株的获取第68-69页
  4 结论与小结第69-70页
参考文献第70-78页
附件第78-83页
致谢第83页

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棉花(Gossypium L.) 转化体论文 T-DNA侧翼序列论文 FPNI-PCR论文 双T-DNA论文 cry1C*基因论文
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