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牛传染性鼻气管炎病毒gC~-/LacZ~+基因缺失毒株的构建及gD糖蛋白的截短表达与活性检测

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牛传染性鼻气管炎病毒gC~-/LacZ~+基因缺失毒株的构建及gD糖蛋白的截短表达与活性检测
论文目录
 
摘要第1-8 页
Abstract第8-14 页
第一章 绪论第14-28 页
  引言第14 页
  · 牛传染性鼻气管炎简介第14-21 页
    · 牛传染性鼻气管炎发展简史第14-15 页
    · 牛传染性鼻气管炎病毒的形态与分子特征第15-16 页
    · 牛传染性鼻气管炎病毒编码蛋白概述第16-18 页
    · 牛传染性鼻气管炎诊断第18-21 页
  · 病毒活载体疫苗的研究进展第21-26 页
    · 痘病毒活载体第22 页
    · 腺病毒活载体第22-23 页
    · 疱疹病毒活载体第23-26 页
      · 牛疱疹病毒活载体第23 页
      · 牛疱疹病毒作为活载体的优势第23-24 页
      · 构建牛疱疹病毒活病毒载体重组病毒的策略第24-25 页
      · 牛疱疹病毒活病毒载体重组病毒的应用第25 页
      · 牛疱疹病毒活病毒载体研究中遇到的问题第25-26 页
  · 研究目的和意义第26-28 页
第二章 牛传染性鼻气管炎病毒gC~-/LacZ~+基因缺失毒株的构建与鉴定第28-40 页
  · 材料和方法第29-33 页
    · 毒株和细胞第29 页
    · 载体和试剂第29 页
    · 引物第29 页
    · MDBK细胞的培养与IBRV基因组DNA的制备第29-30 页
    · 同源重组臂的克隆及其转移载体的构建与鉴定第30 页
    · 带有LacZ基因的gC基因缺失转移载体的构建与鉴定第30-31 页
    · pdgC~-/LacZ~+转移载体质粒的大量提取与纯化第31 页
    · 牛鼻甲细胞的培养与病毒DNA的转染第31 页
    · 重组病毒的筛选和纯化第31-32 页
    · 重组病毒的PCR鉴定第32 页
    · 重组病毒的测序鉴定第32 页
    · 重组病毒TCID_(50)的测定第32-33 页
  · 结果第33-38 页
    · 同源重组臂的克隆及其转移载体的鉴定第33-34 页
    · 带有lacZ基因的gC基因缺失转移载体的鉴定第34-35 页
    · 重组病毒的筛选第35 页
    · 重组病毒的PCR鉴定第35-36 页
    · 重组病毒的测序鉴定第36-37 页
    · 重组病毒TCID_(50)的测定第37-38 页
  · 讨论第38-40 页
    · 转染方法的选择第38 页
    · 重组病毒的筛选和纯化第38-39 页
    · 重组病毒的生物学特性第39-40 页
第三章 牛传染性鼻气管炎病毒gD蛋白的截短表达与活性检测第40-48 页
  · 材料与方法第41-43 页
    · 克隆质粒、菌株及病毒、细胞与血清第41 页
    · 试剂第41 页
    · 病毒基因组DNA的提取第41 页
    · 引物设计与合成第41-42 页
    · gD基因表达载体的构建与鉴定第42 页
    · gD重组蛋白表达条件的优化第42 页
    · 表达产物的纯化第42 页
    · Western blot检测第42-43 页
    · 间接ELISA检测蛋白活性第43 页
  · 结果第43-47 页
    · PCR及表达载体的鉴定第43-44 页
    · 表达诱导条件的优化第44-45 页
    · 表达蛋白在细菌中的存在形式及纯化第45 页
    · Western blot分析结果第45-46 页
    · 间接ELISA检测结果第46-47 页
  · 讨论第47-48 页
第四章 全文结论第48-49 页
参考文献第49-56 页
致谢第56-57 页
作者简历第57页

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