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大菱鲆TOLL样受体3(TLR3)基因克隆与诱导表达分析
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大菱鲆TOLL样受体3(TLR3)基因克隆与诱导表达分析
论文目录
摘要
第1-7页
Abstract
第7-13页
第一章 文献综述
第13-28页
1 TOLL 样受体的研究进展
第13-26页
· TOLL 样受体的发现及研究
第13-15页
· 鱼类 TLR 的发现及研究
第14-15页
· TOLL 样受体的结构和功能
第15-16页
· TOLL 样受体的的分布
第16-18页
· TOLL 样受体的的分类
第18-19页
· TLR 家族成员简介
第19-22页
· TLR2
第19页
· TLR3
第19-20页
· TLR4
第20-21页
· TLR5
第21页
· TLR9
第21-22页
· TLR1、TLR6 和 TLR10
第22页
· TLR 的信号转导机制
第22-26页
· MyD88 依赖性信号途径
第23页
· MyD88 非依赖性信号途径
第23-24页
· 鱼类的信号转导途径
第24-26页
2 本项研究的目的与意义
第26-28页
第二章 大菱鲆 TLR3 基因的克隆和序列分析
第28-58页
1 实验材料
第28-31页
· 实验鱼、菌株及质粒载体
第28页
· 主要仪器与设备
第28-29页
· 主要试剂及溶液配制
第29-31页
· 主要试剂
第29-30页
· 溶液的配制
第30-31页
2 实验方法
第31-42页
· 大菱鲆组织的获取
第31页
· 总 RNA 的提取及质量检测
第31-32页
· cDNA 第一链的合成
第32-33页
· 大菱鲆 TLR3 全长 cDNA 克隆
第33-40页
· 核心片段的克隆及测序
第33-37页
· 简拼引物的设计
第33-34页
· 核心片段 PCR 反应
第34页
· 电泳检测
第34页
· PCR 产物的回收
第34-35页
· 胶回收的 DNA 片段与载体的连接
第35页
· 感受态细胞的制备
第35-36页
· 连接产物的转化
第36页
· 阳性克隆的鉴定
第36-37页
· 核心片段序列分析
第37页
· 3’-RACE 和 5’-RACE 片段的克隆及测序
第37-39页
· 引物设计
第37-38页
· 3’-RACE 片段的克隆及测序
第38页
· 5’-RACE 片段的克隆及测序
第38-39页
· 全长 cDNA 序列的拼接
第39-40页
· 大菱鲆 TLR3 基因组 DNA 的克隆
第40-41页
· 引物设计
第40页
· 大菱鲆基因组 DNA 的提取
第40-41页
· 基因组 DNA 的克隆以及测序
第41页
· 序列结构分析与进化树的构建
第41-42页
3 结果分析
第42-53页
· RNA 样品提取与质量检测
第42-43页
· 核心片段克隆及测序结果
第43-44页
· 3’-RACE 片段克隆及测序结果
第44-46页
· 5’-RACE 片段克隆及测序结果
第46页
· 全长 cDNA 序列拼接及分析
第46-47页
· SmTLR3 cDNA 序列的分子特征
第47-49页
· SmTLR3 基因组 DNA 克隆及基因结构特征
第49-50页
· SmTLR3 基因组的启动子结构特征
第50-52页
· SmTLR3 系统进化的分析
第52-53页
4 讨论
第53-58页
第三章 大菱鲆 TLR3 mRNAs的组织分布研究
第58-63页
1 实验材料
第58页
· 实验动物
第58页
· 主要仪器和设备
第58页
· 主要的试剂和溶液的配制
第58页
2 实验方法
第58-60页
· 大菱鲆的解剖和组织的获取
第58-59页
· 总 RNA 提取和质量检测
第59页
· cDNA 第一链的合成
第59页
· 引物设计
第59-60页
· qPCR 扩增与检测
第60页
3 结果分析
第60-61页
4 讨论
第61-63页
第四章 大菱鲆 TLR3 基因应对大菱鲆红体病病毒(TRBIV)和 PolyI:C刺激的表达分析
第63-69页
1 实验材料
第63-64页
· 实验动物和刺激物
第63页
· 主要仪器与设备
第63页
· 主要的试剂和溶液的配制
第63-64页
2 实验方法
第64-65页
· TRBIV 及 PolyI:C 对大菱鲆鱼体的感染
第64页
· 模板的制备
第64页
· qPCR 检测和分析
第64-65页
3 结果分析
第65-67页
4 讨论
第67-69页
结论
第69-70页
参考文献
第70-79页
致谢
第79-80页
个人简历
第80页
学术论文
第80-81 页
本篇论文共
81
页,
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