论文目录 | |
摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-9页 |
第一章 文献综述与立题依据 | 第9-24页 |
· 驱动蛋白的发现 | 第9页 |
· 驱动蛋白家族的分类 | 第9-10页 |
· 哺乳动物细胞的有丝分裂 | 第10-13页 |
· Kifl8A蛋白分子的概述 | 第13-17页 |
· 人驱动蛋白Kifl8A | 第13-14页 |
· Kifl8A分子的cDNA序列与编码氨基酸序列 | 第14-17页 |
· Kifl8A蛋白在有丝分裂过程中的功能 | 第17-20页 |
· Kifl8A蛋白在细胞周期内的表达与定位 | 第17-18页 |
· Kifl8A的微管蛋白亲和性和微管解聚酶功能 | 第18页 |
· Kifl8A对于纺锤体形态的调节作用 | 第18-19页 |
· Kifl8A对于有丝分裂中期染色体的排列有重要的调节作用 | 第19-20页 |
· 课题设立的背景及依据 | 第20-24页 |
· 细胞有丝分裂是保证细胞遗传物质稳定的必要条件 | 第20-21页 |
· 驱动蛋白分子Kifl8A与有丝分裂过程中姐妹染色体中板集合密切相关 | 第21页 |
· 驱动蛋白分子Kifl8A在细胞有丝分裂过程中的定位与功能发生变化 | 第21-22页 |
· 驱动蛋白分子Kifl8A在细胞有丝分裂过程中亚细胞结构定位发生改变 | 第22-23页 |
· 驱动蛋白分子Kifl8A与临床肿瘤发生有潜在关联 | 第23-24页 |
第二章 材料与方法 | 第24-44页 |
· 实验材料与实验仪器 | 第24-25页 |
· 细胞与细菌 | 第24页 |
· 主要实验仪器 | 第24-25页 |
· 实验试剂 | 第25-33页 |
· 实验药品 | 第25-26页 |
· 培养基 | 第26页 |
· 缓冲溶液 | 第26-28页 |
· 电泳缓冲液、上样缓冲液与WB(Western Blot)转膜缓冲液 | 第28-29页 |
· 细胞固定液与免疫杂交封闭液 | 第29-30页 |
· 考马斯亮蓝染色液与脱色液 | 第30页 |
· 细胞裂解液与细菌裂解液 | 第30-33页 |
· ECL发光试剂 | 第33页 |
· 实验方法 | 第33-44页 |
· HeLa细胞的培养与传代 | 第34-35页 |
· 细菌的培养与诱导蛋白表达 | 第35-36页 |
· 细菌质粒大提 | 第36-37页 |
· 分子克隆 | 第37-38页 |
· 蛋白的纯化与抗原制备 | 第38-41页 |
· 免疫共沉淀(Co-IP)实验与蛋白免疫印迹(Western Blot) | 第41-43页 |
· 免疫荧光染色 | 第43-44页 |
第三章 实验与结果 | 第44-56页 |
· 实验技术路线图 | 第44-45页 |
· 实验结果 | 第45-56页 |
· GST-Kifl8A-C297与His-Kifl8A-C297原核表达质粒的构建 | 第45-46页 |
· GST-Kifl8A-C297抗原蛋白的纯化 | 第46页 |
· His-KC297蛋白与Ni树脂凝胶的交联 | 第46-47页 |
· 抗原的免疫与抗体纯化 | 第47页 |
· 抗体血清与纯化抗体的检测 | 第47-48页 |
· 内源性Kifl8A蛋白的翻译后修饰的预测 | 第48-50页 |
· 驱动蛋白Kifl8A的翻译后蛋白修饰位点的检测 | 第50-56页 |
第四章 讨论 | 第56-75页 |
· 实验过程讨论 | 第56-74页 |
· 抗原免疫过程的讨论 | 第57-62页 |
· 抗体纯化与检测的讨论 | 第62-63页 |
· Kifl8A蛋白定位的研究 | 第63-70页 |
· 蛋白质谱分析的讨论 | 第70-74页 |
· 后期实验规划 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-84
页 |