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谷氨酰胺合成酶的表达、纯化、酶学性质及腺苷化现象的研究

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谷氨酰胺合成酶的表达、纯化、酶学性质及腺苷化现象的研究
论文目录
 
摘要第1-4 页
Abstract第4-9 页
第1章 文献综述第9-26 页
  · 谷氨酰胺的性质和生产状况第9-11 页
    · L-谷氨酰胺的基本理化性质第9-10 页
    · 谷氨酰胺的市场状况第10-11 页
  · L-谷氨酰胺的生产方法第11-15 页
    · 化学法第11 页
    · 发酵法第11-13 页
    · 酶法第13-14 页
    · 基因工程在谷氨酰胺生产中的应用第14-15 页
  · 谷氨酰胺合成酶第15-21 页
    · 典型细菌的谷氨酰胺合成酶(GSI)结构第15-17 页
    · 细菌 GS 酶催化机理第17-18 页
    · 细菌 GS 酶活性调控第18-20 页
    · 谷氨酸棒杆菌中的谷氨酰胺合成酶第20-21 页
  · 大肠杆菌表达系统第21-22 页
    · 概述第21 页
    · 大肠杆菌表达载体的构成第21 页
    · 大肠杆菌表达系统第21-22 页
  · 代谢工程第22-24 页
  · 本论文的意义和目的第24-26 页
第2章 GS 酶与6×His 融合表达第26-40 页
  · 引言第26-27 页
  · 材料与方法第27-31 页
    · 实验材料第27-29 页
    · 实验方法第29-31 页
  · 结果与讨论第31-39 页
    · 分子生物学构建过程第31-34 页
    · 带有不同位置His-tag 的重组GS 的表达第34-36 页
    · C 端His-tag 导致重组GS 酶完全不可溶表达的机理分析第36-38 页
    · GS 包涵体复性初步研究第38-39 页
  · 本章小结第39-40 页
第3章 促进重组GS 酶可溶性表达的探索第40-55 页
  · 引言第40-41 页
  · 材料与方法第41-44 页
    · 实验材料第41-43 页
    · 实验方法第43-44 页
  · 结果与讨论第44-53 页
    · 重组质粒和菌株构建策略及构建过程第44-51 页
    · 目标蛋白的表达第51-53 页
  · 本章小结第53-55 页
第4章 重组GS 酶的纯化与酶学性质研究第55-73 页
  · 引言第55 页
  · 材料与方法第55-58 页
    · 表达菌株第55 页
    · 仪器和试剂第55-56 页
    · 培养基第56 页
    · 实验方法第56-58 页
  · 结果与讨论第58-72 页
    · 诱导重组大肠杆菌表达GS 条件的优化第58-60 页
    · 带有 His-tag 的重组GS 的纯化第60-64 页
    · 重组 GS 酶学性质研究第64-72 页
  · 本章小结第72-73 页
第5章 GS 的腺苷化现象研究第73-83 页
  · 引言第73 页
  · 材料与方法第73-75 页
    · 表达菌株第73 页
    · 仪器和试剂第73 页
    · 培养基第73-74 页
    · 实验方法第74-75 页
  · 结果与讨论第75-82 页
  · 本章小结第82-83 页
第6章 结论和展望第83-87 页
  · 结论第83-84 页
  · 本论文的创新点第84-85 页
  · 展望第85-87 页
参考文献第87-91 页
致谢第91-92 页
附录A 仪器与设备第92-93 页
附录B 常用生化试剂第93-94 页
附录C 培养基和缓冲液配制第94-95 页
附录D 聚合酶链式反应(PCR)第95-96 页
附录E 酶切与连接第96-98 页
附录F 琼脂糖凝胶电泳第98-99 页
附录G E. coli 感受态细胞的转化第99-100 页
附录H 菌株的培养及表达第100-101 页
附录I 考马斯亮蓝法(Bradford 法)测定蛋白浓度第101-102 页
附录J 谷氨酰胺合成酶活性测定方法第102-105 页
附录K SDS-PAGE 蛋白质电泳第105-108 页
附录L E. coli 感受态细胞的制备第108-109 页
附录M 凝胶层析(Gel-filtration Chromatography)操作步骤第109-110 页
附录N 固定化金属离子螯合亲和层析色谱(IMAC)第110-112 页
个人简历和在学期间发表的学术论文第112页

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