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蜡梅病程相关蛋白基因CpPR-4的克隆及功能初步分析

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蜡梅病程相关蛋白基因CpPR-4的克隆及功能初步分析
论文目录
 
摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
第1章 文献综述第11-21页
  · 蜡梅的研究与利用第11页
  · 病程相关蛋白的发现第11页
  · 病程相关蛋白(PRs)的分类及特征第11-14页
  · 病程相关蛋白的生物化学和分子结构特性第14-15页
  · 病程相关蛋白的分布及诱导第15-16页
    · 病程相关蛋白的分布第15页
    · 病程相关蛋白的诱导及诱导因子第15-16页
  · 病程相关蛋白的抗病机制第16-17页
  · 病程相关蛋白的功能第17-19页
    · 抑制细菌、真菌的生长或病毒的复制第17-18页
    · 固化细胞壁第18页
    · 诱导植物抗毒素和细胞内毒素第18页
    · 调控植物的生长发育第18-19页
  · 病程相关蛋白PR-4家族第19-21页
    · PR-4家族的发现第19页
    · PR-4家族的特性第19页
    · PR-4家族的功能第19-21页
第2章 引言第21-23页
  · 研究背景第21页
  · 研究意义第21页
  · 技术路线第21-23页
第3章 蜡梅病程相关蛋白基因CpPR-4的克隆与序列分析第23-35页
  · 实验材料第23-24页
    · 植物材料,菌株及载体第23页
    · 主要仪器设备第23页
    · 主要化学试剂第23页
    · 自配的试剂及常用配方第23-24页
  · 实验方法第24-27页
    · EST序列特征分析第24页
    · 引物设计第24页
    · 蜡梅总DNA的提取第24-25页
    · PCR扩增第25页
    3.2.5 BioSpin Gel Extraction kit回收目的DNA片段第25页
    · 回收纯化产物与pMD19-T载体连接第25-26页
    · 大肠杆菌感受态细胞的制备第26页
    · 将连接产物转化到大肠杆菌感受态细胞中第26页
    · 转化子的鉴定第26页
    · 测序分析第26-27页
  · 生物信息学分析第27页
  · 结果与分析第27-33页
    · 蜡梅CpPR-4克隆子的获得第27-28页
    · 蜡梅CpPR-4基因cDNA的序列特征第28页
    · CpPR-4基因编码蛋白的同源比对第28-30页
    · CpPR-4基因编码蛋白的信号肽分析第30页
    · CpPR-4基因编码蛋白的疏水性区域分析第30-31页
    · CpPR-4基因编码蛋白的二级结构预测第31页
    · CpPR-4基因编码蛋白的三级结构预测第31-32页
    · CpPR-4基因编码蛋白的磷酸化位点分析第32页
    · CpPR-4基因编码蛋白的卷曲螺旋分析第32-33页
  · 小结第33-35页
第4章 植物表达载体的构建与转化烟草研究第35-49页
  · 实验材料第35-36页
    · 植物材料第35页
    · 菌株与载体第35页
    · 主要试剂第35页
    · 自配的试剂第35-36页
    · 常用培养基配方第36页
  · 实验方法第36-41页
    · 构建植物表达载体pCAMBIA2301g/CpPR-4第36-39页
    · CpPR-4基因导入烟草及转化植株的获得第39页
    · 转基因植株的检测第39-40页
    · 转基因烟草的抗病性鉴定试验第40页
    · 转基因烟草的低温胁迫性实验第40-41页
  · 结果与分析第41-46页
    · 植物表达载体的构建第41-42页
    · CpPR-4基因转化烟草以及转化植株的获得第42-43页
    · 转基因植株的检测第43-44页
    · 蜡梅CpPR-4基因转基因烟草的抗病性鉴定试验第44-45页
    · 蜡梅CpPR-4基因转基因烟草的低温胁迫性实验第45-46页
  · 小结第46-49页
第5章 原核表达载体的构建与目的蛋白的融合表达第49-63页
  · 实验材料第49-52页
    · 实验菌株第49页
    · 主要试剂第49页
    · 主要设备第49-50页
    · 自配的主要试剂第50-52页
  · 实验方法第52-56页
    · 蜡梅CpPR-4基因原核表达载体的构建第52-53页
    · 目的蛋白的诱导表达第53-54页
    · SDS-PAGE电泳检测目的蛋白的表达第54-55页
    · 表达体系的优化第55-56页
  · 结果与分析第56-61页
    · 蜡梅CpPR-4基因原核表达载体的构建第56-57页
    · pET-32a/CpPR-4在BL21(DE3)中的融合表达第57-59页
    · 表达体系的优化第59-61页
  · 小结第61-63页
第6章 讨论第63-67页
  · 蜡梅CpPR-4基因的克隆及编码蛋白的特性第63页
  · 植物表达载体的构建及烟草的遗传转化体系第63-64页
  · 转基因烟草的抗病性分析第64-65页
  · 转基因烟草的抗寒性分析第65页
  · 原核表达载体的构建及重组蛋白表达体系的优化第65-67页
第7章 总结第67-69页
  · 结论第67页
  · 后续工作第67-69页
参考文献第69-77页
缩略词表第77-79页
致谢第79-80页
发表论文与参加的研究课题第80 页

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