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金黄色葡萄球菌蛋白A抗原单克隆抗体的制备与初步应用

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金黄色葡萄球菌蛋白A抗原单克隆抗体的制备与初步应用
论文目录
 
目录第1-6页
缩略词表第6-8页
摘要第8-9页
Summary第9-11页
前言第11-13页
第一章 金黄色葡萄球菌快速检测方法及研究进展第13-22页
  1 培养基法第13-14页
  2 免疫学方法第14-16页
    · 乳胶凝集试验第14-15页
    · 酶联免疫吸附法(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)第15-16页
    · 放射免疫分析法(Radioimmuno Assay,RIA)第16页
  3 分子生物学方法第16-19页
    · 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)第17页
    · 实时荧光定量-聚合酶链反应(Real-Time Fluorescent Quantitative PCR, FQ-PCR)第17-18页
    · 基因芯片技术(gene chip ,DNA chip)第18-19页
  4 其他检测方法第19-20页
    · 表面等离子共振技术第19-20页
    · 免疫传感器技术第20页
  5 金黄色葡萄球菌检测发展方向及其应用展望第20-22页
第二章 金黄色葡萄球菌蛋白 A 抗原的提取及特异性鉴定第22-30页
  1 材料及试剂第22-23页
    · 菌种第22页
    · 主要生化试剂第22页
    · 仪器设备第22页
    · 试剂配制第22-23页
      · 改良肉汤培养基第22页
      · SDS-PAGE 电泳所需试剂第22-23页
      · ELISA 检测所需试剂第23页
  2 方法第23-25页
    · 金黄色葡萄球菌的培养第23-24页
    · SPA 粗提第24页
    · 纯化第24-25页
      · 分离纯化 SPA第24页
      · 选择收集 SPA第24-25页
    · 纯度及相对分子量检测第25页
  3 结果第25-27页
    · 金黄色葡萄球菌的培养第25页
    · SPA 的提取和纯化第25-27页
    · SPA 特异性检测第27页
      · 纯度及相对分子量检测第27页
  4 讨论第27-29页
  5 结论第29-30页
第三章 金黄色葡萄球菌蛋白 A 单克隆抗体的制备第30-42页
  1 材料及试剂第30-32页
    · 菌株、筛选抗原、细胞及实验动物第30页
    · 主要仪器设备第30页
    · 主要试剂第30页
    · 试剂配制第30-32页
      · 细胞培养所需试剂第30-31页
      · 染色体计数所需试剂第31-32页
  2 方法第32-35页
    · 动物免疫第32页
    · 细胞融合与杂交瘤细胞筛选第32-34页
      · 饲养细胞的制备第32页
      · 脾细胞的制备第32页
      · 细胞融合第32-33页
      · 杂交瘤细胞的筛选及亚克隆第33页
      · 杂交瘤细胞的扩大培养及冻存第33页
      · 单克隆抗体 Ig 亚类的鉴定第33页
      · 抗原位点分析第33-34页
      · 腹水的制备与单克隆抗体的纯化第34页
      · 单克隆抗体特异性鉴定第34页
    · 单克隆抗体的稳定性鉴定第34-35页
      · 细胞体外传代试验第34页
      · 连续冻存复苏试验第34-35页
      · 腹水连续传代试验第35页
    · 杂交瘤细胞染色体数目鉴定第35页
  3 结果第35-40页
    · 杂交瘤细胞株的建立与单抗 Ig 亚类鉴定第35-36页
    · 单克隆抗体抗原位点分析第36页
    · 单克隆抗体的纯化第36-38页
    · 单克隆抗体的稳定性测定第38-39页
    · 杂交瘤细胞染色体数目鉴定第39-40页
  4 讨论第40-41页
  5 结论第41-42页
第四章 金黄色葡萄球菌双抗夹心 ELISA 检测方法的建立第42-48页
  1 材料及试剂第42-43页
    · 菌株、单克隆抗体第42页
    · 主要仪器设备第42页
    · 主要试剂及配制第42-43页
  2 方法第43-44页
    · 单克隆抗体的浓缩第43页
    · 酶标抗体的制备第43页
    · ELISA 方法检测酶标抗体 3B11-HRP 活性第43-44页
    · 双抗夹心 ELISA 建立第44页
    · 捕获抗体包被浓度及酶标抗体工作浓度的确定第44页
    · 双抗体夹心 ELISA 检测方法特异性及灵敏度的测定第44页
  3 结果第44-46页
    · 酶标抗体 3B11-HRP 活性第44-45页
    · 抗体包被浓度及酶标抗体工作浓度的确定第45-46页
    · 双抗体夹心 ELISA 的特异性第46页
  4 讨论第46-47页
  5 结论第47-48页
参考文献第48-55页
致谢第55-56页
作者简介第56-57页
导师简介第57-58页

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