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猪瘟病毒E2蛋白单克隆抗体的制备及其生物学特性的研究

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猪瘟病毒E2蛋白单克隆抗体的制备及其生物学特性的研究
论文目录
 
摘要第1-5页
Abstract第5-10页
插图和附表清单第10-11页
本论文常用缩写词第11-13页
文献综述第13-26页
引言第26-28页
正文 猪瘟病毒 E2 蛋白单克隆抗体的制备及其生物学特性的研究第28-59页
  1 材料与方法第28-43页
    · 材料第28-32页
      · 实验动物第28页
      · 质粒和菌种第28页
      · 病毒和细胞系第28页
      · 酶类及相关试剂第28-29页
      · 主要溶液配制第29-31页
      · 主要实验仪器第31-32页
    · 方法第32-43页
      · 猪瘟病毒E2 蛋白基因片段的原核表达第32-38页
        · 猪瘟病毒 E2 基因片段的克隆第32-33页
        · 猪瘟病毒 E2 蛋白基因的原核表达质粒的构建第33-35页
        · CSFV E(A)基因融合蛋白的表达及鉴定第35-36页
        · GST-E(A)融合蛋白的大量表达提取第36-37页
        · GST-E2 融合蛋白的测定(Folin-酚法)第37页
        · 鼠抗猪瘟病毒 E2 蛋白多克隆抗体的制备第37-38页
      · 抗猪瘟病毒 E2 蛋白单克隆抗体的制备第38-40页
        · 动物免疫第38页
        · 阳性杂交瘤筛选方法(间接ELISA 法)的建立第38页
        · 饲养细胞的制备第38-39页
        · 脾淋巴细胞的制备第39页
        · 骨髓瘤细胞的准备第39页
        · 细胞融合第39页
        · 杂交瘤细胞的筛选第39-40页
        · 阳性杂交瘤细胞的克隆第40页
        · 细胞冻存和复苏第40页
        · 单克隆抗体的制备第40页
      · 单克隆抗体的鉴定第40-43页
        · 单克隆抗体效价及稳定性测定第40-41页
        · 单抗免疫球蛋白类型的鉴定第41页
        · Westen-blot 方法鉴定单抗的特异性第41页
        · IFA 检测单抗与猪瘟病毒的反应性第41页
        · 单抗识别抗原表位的初步鉴定第41-43页
  2 结果与分析第43-53页
    · 猪瘟病毒E2 蛋白基因的原核表达鉴定第43-48页
      · 获得目的基因E(A)第43页
      · 重组质粒pGEX-4T-E(A)的PCR 鉴定第43-44页
      · 原核表达重组质粒pGEX-4T-E(A)的双酶切鉴定第44-45页
      · SDS-PAGE 检测诱导表达的GST-E(A)融合蛋白第45-46页
      · GST-E(A)融合蛋白的可溶性鉴定第46页
      · GST-E(A)融合蛋白的大量表达第46-47页
      · GST-E(A)融合蛋白的浓度测定第47-48页
    · 猪瘟病毒E2 蛋白单抗生物学特性的鉴定及其抗原表位的筛选第48-53页
      · 抗原、抗体最适工作浓度的初步筛选第48页
      · 杂交瘤细胞株C3 和A1 的获得第48-49页
      · 间接ELISA 检测C3、A1 两株杂交瘤细胞分泌抗体的效价第49-50页
      · 单克隆抗体稳定性检测第50页
      · 单克隆抗体免疫球蛋白亚型的鉴定第50-51页
      · 单克隆抗体特异性鉴定第51页
      · 单克隆抗体保护性鉴定第51-52页
      · 单克隆抗体相应抗原表位的筛选第52-53页
  3 讨论第53-58页
    · 目的基因的选择第53页
    · 免疫方案的优化第53-54页
    · 骨髓瘤细胞的选择与维持第54-55页
    · 细胞融合第55页
    · 杂交瘤细胞的筛选培养第55页
    · 阳性杂交瘤细胞的克隆化第55-56页
    · 单克隆抗体的制备与纯化第56-58页
  4 结论第58-59页
参考文献第59-66页
致谢第66-67页
作者简介第67页
读硕期间所做的学术报告第67页
发表论文第67页

本篇论文共67页,点击这进入下载页面
 
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