论文目录 | |
摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
插图和附表清单 | 第10-11页 |
本论文常用缩写词 | 第11-13页 |
文献综述 | 第13-26页 |
引言 | 第26-28页 |
正文 猪瘟病毒 E2 蛋白单克隆抗体的制备及其生物学特性的研究 | 第28-59页 |
1 材料与方法 | 第28-43页 |
· 材料 | 第28-32页 |
· 实验动物 | 第28页 |
· 质粒和菌种 | 第28页 |
· 病毒和细胞系 | 第28页 |
· 酶类及相关试剂 | 第28-29页 |
· 主要溶液配制 | 第29-31页 |
· 主要实验仪器 | 第31-32页 |
· 方法 | 第32-43页 |
· 猪瘟病毒E2 蛋白基因片段的原核表达 | 第32-38页 |
· 猪瘟病毒 E2 基因片段的克隆 | 第32-33页 |
· 猪瘟病毒 E2 蛋白基因的原核表达质粒的构建 | 第33-35页 |
· CSFV E(A)基因融合蛋白的表达及鉴定 | 第35-36页 |
· GST-E(A)融合蛋白的大量表达提取 | 第36-37页 |
· GST-E2 融合蛋白的测定(Folin-酚法) | 第37页 |
· 鼠抗猪瘟病毒 E2 蛋白多克隆抗体的制备 | 第37-38页 |
· 抗猪瘟病毒 E2 蛋白单克隆抗体的制备 | 第38-40页 |
· 动物免疫 | 第38页 |
· 阳性杂交瘤筛选方法(间接ELISA 法)的建立 | 第38页 |
· 饲养细胞的制备 | 第38-39页 |
· 脾淋巴细胞的制备 | 第39页 |
· 骨髓瘤细胞的准备 | 第39页 |
· 细胞融合 | 第39页 |
· 杂交瘤细胞的筛选 | 第39-40页 |
· 阳性杂交瘤细胞的克隆 | 第40页 |
· 细胞冻存和复苏 | 第40页 |
· 单克隆抗体的制备 | 第40页 |
· 单克隆抗体的鉴定 | 第40-43页 |
· 单克隆抗体效价及稳定性测定 | 第40-41页 |
· 单抗免疫球蛋白类型的鉴定 | 第41页 |
· Westen-blot 方法鉴定单抗的特异性 | 第41页 |
· IFA 检测单抗与猪瘟病毒的反应性 | 第41页 |
· 单抗识别抗原表位的初步鉴定 | 第41-43页 |
2 结果与分析 | 第43-53页 |
· 猪瘟病毒E2 蛋白基因的原核表达鉴定 | 第43-48页 |
· 获得目的基因E(A) | 第43页 |
· 重组质粒pGEX-4T-E(A)的PCR 鉴定 | 第43-44页 |
· 原核表达重组质粒pGEX-4T-E(A)的双酶切鉴定 | 第44-45页 |
· SDS-PAGE 检测诱导表达的GST-E(A)融合蛋白 | 第45-46页 |
· GST-E(A)融合蛋白的可溶性鉴定 | 第46页 |
· GST-E(A)融合蛋白的大量表达 | 第46-47页 |
· GST-E(A)融合蛋白的浓度测定 | 第47-48页 |
· 猪瘟病毒E2 蛋白单抗生物学特性的鉴定及其抗原表位的筛选 | 第48-53页 |
· 抗原、抗体最适工作浓度的初步筛选 | 第48页 |
· 杂交瘤细胞株C3 和A1 的获得 | 第48-49页 |
· 间接ELISA 检测C3、A1 两株杂交瘤细胞分泌抗体的效价 | 第49-50页 |
· 单克隆抗体稳定性检测 | 第50页 |
· 单克隆抗体免疫球蛋白亚型的鉴定 | 第50-51页 |
· 单克隆抗体特异性鉴定 | 第51页 |
· 单克隆抗体保护性鉴定 | 第51-52页 |
· 单克隆抗体相应抗原表位的筛选 | 第52-53页 |
3 讨论 | 第53-58页 |
· 目的基因的选择 | 第53页 |
· 免疫方案的优化 | 第53-54页 |
· 骨髓瘤细胞的选择与维持 | 第54-55页 |
· 细胞融合 | 第55页 |
· 杂交瘤细胞的筛选培养 | 第55页 |
· 阳性杂交瘤细胞的克隆化 | 第55-56页 |
· 单克隆抗体的制备与纯化 | 第56-58页 |
4 结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
作者简介 | 第67页 |
读硕期间所做的学术报告 | 第67页 |
发表论文 | 第67页 |