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人博卡病毒结构蛋白与非结构蛋白功能的初步研究

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人博卡病毒结构蛋白与非结构蛋白功能的初步研究
论文目录
 
摘要第1-7页
Abstract第7-11页
第一章 前言第11-18页
  · 细小病毒的简介第11-12页
  · 博卡病毒简介第12-14页
    · 人博卡病毒的发现、命名和分类第12页
    · 人博卡病毒基因组分子学特征及临床表现第12-13页
    · HBoV的流行病学与诊断第13-14页
  · PEGFP真核表达系统及PET原核表达系统第14-16页
    · pEGFP真核表达载体简介第14-15页
    · pET原核表达系统简介第15-16页
  · 本课题的目的及意义第16-18页
第二章 实验材料第18-22页
  · 主要仪器和实验材料第18-19页
    · 仪器与设备第18页
    · 实验所需的菌株、质粒和细胞第18页
    · 试剂第18页
    · 引物第18-19页
  · 常用培养基及溶液配置第19-22页
    · 细菌培养基第19页
    · 琼脂糖凝胶电泳所需溶液第19页
    · 碱裂法提质粒所需溶液第19页
    · SDS-PAGE电泳所需溶液第19-20页
    · Western blot相关溶液配制第20-21页
    · 实验所需的各种抗生素第21页
    · 培养细胞常用溶液配制第21-22页
第三章 实验方法第22-27页
  · 人博卡病毒(HBoV)结构蛋白基因VP1抗原表位区域(4160-4480 NT)的克隆、原核表达以及多克隆抗体的制备第22-24页
    · 引物设计与合成第22页
    · 重组表达质粒的构建及鉴定第22页
    · 诱导并表达融合蛋白第22-23页
    · SDS-PAGE检测和蛋白诱导表达条件的筛选第23页
    · Western-Blot鉴定融合蛋白第23页
    · 融合蛋白GST-VP1截短的切胶纯化第23-24页
    · 多克隆抗体的制备以及Western-Blot分析第24页
  · 人博卡病毒(HBoV)结构蛋白基因VP1、VP2以及非结构蛋白NS1的细胞内定位第24-25页
    · 引物设计与合成第24页
    · 重组表达质粒的构建及鉴定第24-25页
    · 重组质粒转染293T细胞以及荧光显微镜观察第25页
  · 人博卡病毒(HBoV)非结构蛋白NP1引起HELA细胞凋亡的研究第25-27页
    · 重组质粒pEGFP-NP1转染HeLa细胞以及DAPI染色观察第25页
    · 重组质粒pEGFP-NP1转染HeLa细胞以及Caspase3活性检测第25-27页
第四章 实验结果第27-37页
  · 人博卡病毒(HBoV)结构蛋白基因VP1抗原表位区域的克隆、原核表达以及多克隆抗体的制备第27-31页
    · PCR扩增目的片段VP1抗原表位区域第27页
    · 重组表达载体pET-49b-VP截短的构建及鉴定第27-28页
    · 融合蛋白GST-VP1截短的诱导表达及诱导条件的优化第28-29页
    · 融合蛋白GST-VP1截短的纯化第29-30页
    · 多克隆抗体的特异性分析第30-31页
  · 人博卡病毒(HBoV)结构蛋白基因VP1、VP2以及非结构蛋白NS1的细胞内定位第31-34页
    · PCR扩增结构蛋白基因VP1、VP2与非结构蛋白基因NS1第31-32页
    · 重组表达载体pEGFP-VP1、pEGFP-VP2、pEGFP-NS1的构建及鉴定第32-33页
    · 重组载体转染293T细胞及利用荧光显微镜的观察第33-34页
  · 人博卡病毒(HBoV)非结构蛋白NP1引起HELA细胞凋亡的研究第34-37页
    · 重组质粒pEGFP-NP1转染HeLa细胞以及DAPI染色观察第34-35页
    · 重组质粒pEGFP-NP1转染HeLa细胞以及Caspase3活性检测第35-37页
第五章 讨论第37-38页
参考文献第38-43页
硕士期间发表论文第43-44页
致谢第44页

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