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禽β-防御素6(AvBD6)组织定位及抗J亚群禽白血病病毒活性研究

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禽β-防御素6(AvBD6)组织定位及抗J亚群禽白血病病毒活性研究
论文目录
 
中文摘要第1-11页
ABSTRACT第11-13页
1 前言第13-28页
  · 防御素的研究进展第13-18页
    · 防御素的定义及分类第13-15页
      · 无脊椎动物防御素第14页
      · 植物防御素第14页
      · 脊椎动物防御素第14-15页
    · 防御素的生物学作用及其机制第15-18页
      · 抗菌作用及其机制第15-16页
      · 抗病毒作用及其机制第16-17页
      · 抗肿瘤作用及其机制第17页
      · 细胞毒性其他生物学作用第17-18页
    · 防御素畜牧业中的应用第18页
  · 禽β-防御素(AvBD)的研究进展第18-24页
    · AvBD分子结构第19页
    · AvBD的组织分布第19-21页
      · 呼吸系统第20页
      · 消化系统第20页
      · 免疫系统第20-21页
      · 泌尿生殖系统第21页
    · AvBD的生物学特性第21-22页
    · AvBD的诱导表达第22-24页
      · 真核表达系统第22-23页
      · 原核表达系统第23页
      · 其他表达系统第23-24页
    · AvBD研究展望第24页
  · 禽白血病J亚群研究现状第24-27页
    · ALV-J分子病毒学特性第24-25页
    · ALV-J基因组学第25-26页
    · ALV-J的流行病学第26页
    · ALV-J的致病性及危害第26-27页
    · ALV-J的防控第27页
  · 本研究目的及意义第27-28页
2 材料与方法第28-41页
  · 材料第28-29页
    · 实验细胞和动物第28页
    · 试验用菌种、病毒和载体质粒第28页
    · 主要试剂第28-29页
    · 主要仪器第29页
    · 实验地点第29页
  · AvBD6基因的克隆与表达分析第29-34页
    · AvBD6引物设计与合成第29-30页
    · AvBD6基因的获取第30-31页
    · DH5α感受态细胞的制备第31页
    · 连接产物的转化第31页
    · 重组质粒pGEX6p1Gal-6 的鉴定第31-32页
    · 重组AvBD6在大肠杆菌中的诱导表达第32-33页
    · 包涵体的提取与纯化第33页
    · 纯化蛋白的Western Blot检测第33-34页
  · AvBD6的组织分布与定位第34-35页
    · AvBD6多克隆抗体制备第34页
    · 多克隆抗体效价的测定第34页
    · 免疫组织化学方法检测AvBD6组织分布与定位第34-35页
  · 检测AvBD6组织表达差异第35-37页
    · AvBD6实时荧光定量PCR引物设计与合成第35页
    · 检测SPF鸡AvBD6组织表达差异第35-37页
      · AvBD6阳性重组质粒标准曲线绘制第35-37页
      · SPF鸡AvBD6组织表达差异第37页
  · AvBD6动态表达规律检测第37-38页
    · 实验动物、组织样品采集、绘制标准曲线第37-38页
    · 检测AvBD6组织器官动态表达规律第38页
  · 重组AvBD6蛋白体外抗ALV-J病毒第38-41页
    · 原核表达重组AvBD6蛋白的复性第38-39页
    · ALV-J病毒实时荧光定量PCR引物设计与合成第39页
    · 复性AvBD6抗ALV-J感染第39-41页
      · 鸡胚成纤维细胞(CEF)的制备第39页
      · AvBD6抗ALV-J感染第39-41页
    · ALV-J转录水平检测第41页
      · ALV-J阳性标准品制备及标准曲线绘制第41页
      · 检测ALV-J转录水平第41页
3 实验结果与分析第41-54页
  · 鸡AvBD6基因获取与分析第41-43页
    · PCR获取鸡AvBD6基因第41页
    · 鸡AvBD6序列分析第41-42页
    · 鸡AvBD6基因的遗传进化分析第42-43页
  · 鸡AvBD6原核表达载体构建第43-44页
  · 鸡AvBD6基因在大肠杆菌中的诱导表达第44-46页
    · 鸡AvBD6的SDS-PAGE检测第44-45页
    · 鸡AvBD6的Western blot检测第45-46页
  · 鸡AvBD6多克隆抗体制备及组织分布检测第46-48页
    · 鸡AvBD6多克隆抗体效价的测定第46页
    · 鸡AvBD6组织分布及定位第46-48页
  · 鸡AvBD6组织表达差异及动态表达规律第48-51页
  · 重组AvBD6蛋白体外抗ALV-J病毒第51-54页
    · 鸡AvBD6蛋白的复性第51-52页
    · 鸡AvBD6重组蛋白体外抗病毒效果检测第52-54页
4 讨论第54-57页
5 结论第57-58页
参考文献第58-67页
致谢第67页

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