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抗鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)天然化合物的体外筛选及其抗病毒机制研究

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抗鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)天然化合物的体外筛选及其抗病毒机制研究
论文目录
 
摘要第1-9页
文献综述第9-18页
  1 传染性法氏囊病概述第9-10页
    · IBDV的基本结构与特征第9页
    · IBDV的基因组及编码蛋白第9-10页
      · 编码区第9页
      · IBDV编码五种蛋白第9-10页
  2 中药抗病毒作用机制第10-12页
    · 直接杀灭病毒途径第10-11页
    · 阻止病毒对宿主细胞的吸附和侵入第11-12页
    · 抑制病毒的装配和释放第12页
  3 MAPK信号通路概述第12-18页
    · JNK信号通路第13-14页
      · JNK的生物学特性及功能第13页
      · JNK抑制剂SP600125第13-14页
    · JNK在临床中的研究第14-18页
      · JNK与肿瘤第14页
      · JNK与细胞凋亡第14-15页
      · JNK与抗炎反应第15-16页
      · JNK与病毒第16-18页
前言第18-19页
1 试验材料第19-24页
  · 试验主要试剂及材料第19页
  · 试验试剂的配制第19-21页
  · 主要仪器第21-22页
  · 试验药物第22-24页
· 试验方法第24-34页
  · 鸡胚成纤维细胞(Chick Embryo Fibroblasts,CEFs)的制备第24-25页
  · IBDV的制备第25页
    · IBDV病毒的扩增第25页
    · IBDV病毒的收集第25页
    · 病毒毒力测定第25页
    · 药物的溶解第25页
  · 药物的细胞毒性测定第25-26页
  · 药物对IBDV病毒感染细胞抑制作用的测定第26页
  · 药物对病毒复制的测定第26页
  · 重组质粒的制备第26-30页
    · IBDV VP1基因和VP2基因引物的设计第26-27页
    · 细胞培养物总RNA的提取第27页
    · RT-PCR(ReverseTranscription-Polymerase Chain Reaction)试验第27-28页
    · PCR体系构建第28页
    · 目的基因片段的回收第28-29页
    · 目的片段的克隆第29-30页
    · 重组质粒的提取及浓度的测定第30页
  · 荧光定量PCR检测药物对病毒的拷贝数的影响第30-31页
    · 标准曲线的制作第30页
    · 荧光定量PCR检测病毒拷贝数第30-31页
  · Western blot 分析第31-34页
    · BD对病毒复制抑制试验总蛋白样品的提取第31页
    · 药物对JNK通路抑制试验总蛋白的提取第31-32页
    · BCA法测定蛋白浓度第32页
    · 十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第32-34页
  · 数据统计分析第34页
3 结果第34-44页
  · 病毒毒力测定结果第34页
  · 药物的细胞毒性试验结果第34-37页
  · BD抗病毒感染的抑制试验结果第37-38页
  · BD对病毒复制阻断作用的测定结果第38-39页
  · 重组质粒的制备结果第39-40页
    · 细胞培养物总RNA提取与检测第39页
    · 普通PCR电泳验证VP1和VP2基因的目的片段第39-40页
  · 荧光定量PCR检测药物对病毒拷贝数的影响第40-42页
    · VP1和VP2标准曲线的建立第40页
    · VP1和VP2标准品扩增曲线和溶解曲线第40-41页
    · 不同时间点BD对IBDV VP1、VP2基因拷贝数的影响第41-42页
  · BCA蛋白浓度测定结果第42-43页
  · Western blot分析结果第43-44页
    · Western blot检测VP1复制结果第43页
    · Western blot检测JNK信号通路的结果第43-44页
4 分析与讨论第44-47页
  · 体外筛选出1种化合物具有抗IBDV作用第44-45页
  · 药物对IBDV VP1和VP2基因的合成和VP1蛋白的表达的影响第45-46页
  · 药物对IBDV激活的JNK信号通路的影响第46-47页
5 全文总结第47-48页
参考文献第48-55页
Abstract第55-57页
致谢第57页

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