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FLAG-HA-Bad双标签真核表达载体的构建及Bad相互作用蛋白质筛选的串联亲和纯化技术研究

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FLAG-HA-Bad双标签真核表达载体的构建及Bad相互作用蛋白质筛选的串联亲和纯化技术研究
论文目录
 
摘要第1-5页
Abstract第5-8页
第1章 绪论第8-14页
  · 细胞凋亡及特征第8页
  · 细胞凋亡(APOPTOSIS)的生理意义第8-9页
  · BCL-2 家族第9-10页
  · Bad第10-11页
  · Bad与Bcl-2 家族第11页
  · Gelsolin第11-12页
  · 串联亲和纯化第12-14页
第2章 FLAG-HA-BAD双标签真核表达载体的构建第14-22页
  · 实验材料第14-15页
    · 主要试剂第14页
    · 主要试剂配制第14页
    · 主要实验仪器设备第14-15页
  · 实验方法第15-19页
    · 细胞培养第15页
    · Trizol提取细胞RNA第15页
    · RNA反转录cDNA第15-16页
    · PCR扩增目的基因及基因克隆第16-17页
    · PCR阳性克隆鉴定第17-18页
    · 质粒小量提取第18页
    · 去内毒素质粒大量提取第18-19页
  · 实验结果第19-21页
    · 融合质粒的构建与鉴定第19-21页
  · 实验讨论第21-22页
第3章 BAD相互作用蛋白质筛选的串联亲和纯化及质谱分析第22-29页
  · 实验材料第22页
    · 主要试剂第22页
    · 主要试剂配制第22页
    · 主要实验仪器设备第22页
  · 实验方法第22-25页
    · 质粒转染细胞第22-23页
    · Western blotting检测蛋白表达第23-25页
    · TAP亲和纯化第25页
    · 质谱检测和分析第25页
  · 实验结果第25-28页
    · 瞬时转染第25-26页
    · TAP亲和纯化及蛋白复合体的分离纯化与鉴定第26-27页
    · 质谱分析第27-28页
  · 实验讨论第28-29页
第4章 免疫共沉淀(CO-IP)验证蛋白相互作用第29-32页
  · 实验材料第29页
    · 主要试剂和抗体第29页
    · 主要试剂配制第29页
    · 主要实验仪器设备第29页
  · 实验方法第29-30页
    · 免疫共沉淀(Co-IP)验证蛋白相互作用第29-30页
  · 实验结果第30-31页
    · 免疫共沉淀验证Bad与Gelsolin相互作用第30-31页
  · 实验讨论第31-32页
第5章 讨论第32-34页
结论第34-35页
参考文献第35-38页
致谢第38-39页
作者简介第39页

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