论文目录 | |
摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
缩写词中英文对照表 | 第12-13页 |
引言 | 第13-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-25页 |
· 棉花抗逆育种 | 第14-16页 |
· 棉花抗逆育种的意义 | 第14页 |
· 棉花抗旱耐盐资源筛选 | 第14-15页 |
· 棉花抗旱耐盐的分子标记 | 第15-16页 |
· 多胺及其抗盐性 | 第16-19页 |
· 多胺及其功能 | 第16页 |
· 多胺代谢 | 第16-17页 |
· 多胺与抗盐性 | 第17-18页 |
· 逆境胁迫下多胺的作用 | 第18-19页 |
· S-腺苷蛋氨酸脱羧酶 | 第19-21页 |
· 植物抗盐调节机制 | 第21-23页 |
· SOS信号通路 | 第21-22页 |
· 蛋白激酶途径 | 第22页 |
· ABA及渗透胁迫信号 | 第22-23页 |
· 盐胁迫诱导的基因表达 | 第23页 |
· 研究目的和意义 | 第23-25页 |
第二章 材料和方法 | 第25-37页 |
· 实验材料 | 第25-26页 |
· 植物材料 | 第25页 |
· 菌株与质粒 | 第25页 |
· 试剂 | 第25-26页 |
· 实验方法 | 第26-29页 |
· 棉花RNA提取 | 第26页 |
· 拟南芥RNA提取 | 第26-27页 |
· RNA的质量检测 | 第27页 |
· 除去RNA中的基因组DNA | 第27-28页 |
· RNA反转录为cDNA过程 | 第28页 |
· 植物基因组DNA的提取 | 第28-29页 |
· 植物超表达载体的构建 | 第29-32页 |
· GhSAMDC2/3/4 基因克隆 | 第29-30页 |
· 连接pEASY-Blunt cloning载体 | 第30页 |
· Top10大肠杆菌感受态的制备 | 第30页 |
· 连接体系转化大肠杆菌 | 第30页 |
· 细菌质粒DNA的提取 | 第30-31页 |
· 重组质粒鉴定 | 第31页 |
· pGWB17-GhSAMDC2/3/4 载体构建 | 第31-32页 |
· 构建载体导入根癌农杆菌 | 第32-33页 |
· 根癌农杆菌LBA4404感受态细胞的制备 | 第32页 |
· 根癌农杆菌感受态的电击转化 | 第32-33页 |
· 拟南芥的遗传转化 | 第33-35页 |
· 植株种植 | 第33页 |
· 菌液的培养 | 第33页 |
· 蘸花法侵染拟南芥 | 第33页 |
· 转基因拟南芥筛选 | 第33页 |
· 转基因拟南芥验证 | 第33-34页 |
· 转pGWB17-GhSAMDC3基因拟南芥植株盐处理 | 第34页 |
· QRT-PCR分析转pGWB17-GhSAMDC3拟南芥植株抗盐性 | 第34-35页 |
· 高压液相色谱法测定盐处理下转基因拟南芥多胺含量 | 第35页 |
· 棉花的遗传转化 | 第35-37页 |
· 菌液制备 | 第35页 |
· 无菌苗培养 | 第35-36页 |
· 愈伤诱导及筛选 | 第36页 |
· 胚状体的发生及再生苗的获得 | 第36页 |
· 抗性棉花的PCR验证 | 第36-37页 |
第三章 结果与分析 | 第37-55页 |
· GhSAMDC2/3/4 基因克隆及生物信息学分析 | 第37-42页 |
· GhSAMDC2/3/4 的克隆及序列分析 | 第37-38页 |
· GhSAMDC2/3/4 氨基酸序列比对及系统进化树分析 | 第38-39页 |
· GhSAMDC2/3/4 基因在不同组织的表达分析 | 第39-40页 |
· GhSAMDC2/3/4 基因在非生物逆境胁迫下的表达分析 | 第40-42页 |
· Gateway技术构建植物表达载体 | 第42-43页 |
· BP反应后阳性克隆的鉴定 | 第42页 |
· LR反应后阳性克隆的鉴定 | 第42-43页 |
· pGWB17-GhSAMDC2/3/4 超表达载体转化农杆菌 | 第43页 |
· pGWB17-GhSAMDC2/3/4 转化拟南芥研究 | 第43-50页 |
· 转pGWB17-GhSAMDC2/3/4 拟南芥筛选 | 第43页 |
· 转pGWB17-GhSAMDC3拟南芥表型分析 | 第43-45页 |
· NaCl处理下转pGWB17-GhSAMDC3拟南芥萌发情况 | 第45-46页 |
· GhSAMDC3显著提高了拟南芥抗盐性 | 第46-48页 |
· 转pGWB17-GhSAMDC3拟南芥中抗盐相关基因的表达 | 第48-50页 |
· 棉花转化 | 第50-55页 |
· 转GhSAMDC2/3/4 基因胚性愈伤出愈情况比较 | 第50-51页 |
· 转GhSAMDC3基因棉花胚性愈伤组织PCR验证 | 第51-52页 |
· 转GhSAMDC2/3/4 基因棉花的诱导和培养 | 第52-53页 |
· GhSAMDC3促进胚性愈伤快速生长 | 第53-55页 |
第四章 讨论 | 第55-58页 |
· GhSAMDC2/3/4 基因功能 | 第55-56页 |
· GhSAMDC3基因与耐盐性 | 第56-57页 |
· 农杆菌侵染棉花 | 第57-58页 |
第五章 总结与展望 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-63页 |
附录 | 第63-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
作者简介 | 第68-69页 |
导师评阅表 | 第69页 |