论文目录 | |
目录 | 第1-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一部分 文献综述——猪瘟病毒研究进展 | 第10-31页 |
一、猪瘟(Swine fever) | 第10-14页 |
二、猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV) | 第14-29页 |
三、猪瘟疫苗的发展 | 第29-30页 |
四、本研究的主要任务 | 第30-31页 |
第二部分 猪瘟病毒 E2 基因抗原性分析及抗体制备 | 第31-63页 |
一、材料 | 第31-41页 |
1、载体菌株实验动物 | 第31页 |
2、主要试剂 | 第31-32页 |
3、溶液配制 | 第32-40页 |
4、主要仪器设备 | 第40-41页 |
二、方法 | 第41-55页 |
1、E2 基因和蛋白生物信息学分析 | 第41-42页 |
2、E2 基因的提取及原核表达载体的构建 | 第42-48页 |
3、E2 蛋白的表达、鉴定与纯化 | 第48-52页 |
4、抗血清的制备及鉴定 | 第52-55页 |
三、结果 | 第55-62页 |
1、E2 基因和蛋白生物信息学分析 | 第55-57页 |
2、E2 基因的提取及原核表达载体的构建 | 第57-59页 |
3、E2 蛋白的表达、鉴定与纯化 | 第59-61页 |
4、抗血清的制备及鉴定 | 第61-62页 |
四、讨论 | 第62-63页 |
第三部分 CSFV C 株反向遗传学改造及拯救 | 第63-100页 |
一、材料 | 第63-65页 |
1、载体菌种细胞系 | 第63-64页 |
2、主要试剂 | 第64页 |
3、溶液配制 | 第64页 |
4、主要仪器设备 | 第64-65页 |
二、方法 | 第65-88页 |
1、PMC-18-CSFV-rz-T7 质粒的构建 | 第65-69页 |
2、PMC-18-CSFV-rz-T7 表达质粒的分节段改造 | 第69-80页 |
· 引物的设计和合成 | 第70页 |
· PMC18 –CSFV(含 NS5B)质粒的构建 | 第70-75页 |
· pMC18 –CSFV(不含 NS5B)质粒的构建 | 第75-80页 |
3、pEGFP-N3-T7RNAP 、pGEM-T-T7-GFP 质粒扩增与鉴定 | 第80-82页 |
4、CSFV 病毒拯救 | 第82-86页 |
5、病毒的鉴定 | 第86-88页 |
三、结果 | 第88-99页 |
1、PMC-18-CSFV-rz-T7 质粒的构建 | 第88-90页 |
· PMD18-T-3’CSFV-rz-T7 质粒的构建及鉴定 | 第88-89页 |
· PMC-18-CSFV-rz-T7 质粒的构建 | 第89-90页 |
2、PMC-18-CSFV-rz-T7 表达质粒的分节段改造 | 第90-95页 |
· PMD18-T–CSFV(含 NS5B)质粒的构建 | 第90-91页 |
· PMC18–CSFV(含 NS5B)质粒的构建 | 第91-92页 |
· PMD18-T–CSFV(不含 NS5B)质粒的构建 | 第92-94页 |
· pMC18 –CSFV(不含 NS5B)质粒的构建 | 第94-95页 |
3、pEGFP-N3-T7RNAP 、pGEM-T-T7-GFP 质粒扩增与鉴定 | 第95页 |
4、CSFV 病毒拯救 | 第95-99页 |
四、讨论 | 第99-100页 |
第四部分 疫苗接种在猪瘟病毒进化中的影响 | 第100-119页 |
一、实验材料及方法 | 第100-102页 |
1、病毒序列收集及分型 | 第100页 |
2、鉴定重组病毒 | 第100页 |
3、进化速率及种群动态 | 第100-101页 |
4、选择压力分析 | 第101页 |
5、密码子偏好性分析 | 第101-102页 |
二、结果 | 第102-117页 |
1、CSFV 取样分布图 | 第102页 |
2、病毒分型 | 第102-105页 |
3、鉴定重组病毒 | 第105-109页 |
4、进化速率及种群动态 | 第109-112页 |
5、选择压力分析 | 第112-113页 |
6、密码子偏好性分析 | 第113-117页 |
三、讨论 | 第117-119页 |
第五部分 结论 | 第119-120页 |
附录 | 第120-142页 |
附录 1 E2 基因的测序结果结果 | 第120页 |
附录 2 PMD18T-3’CSFV-rz-T7 测序结果 | 第120-121页 |
附录 3 PMC18 –CSFV(含 NS5B)测序结果 | 第121-123页 |
附录 4 PMC18 –CSFV(不含 NS5B)测序结果 | 第123-126页 |
附录 5 贝叶斯因子分析表 | 第126-130页 |
附录 6 Q 模型聚类分析中使用的 CSFV 的 RSCU | 第130-133页 |
附录 7 进化研究用到的 CSFV 序列 | 第133-142页 |
参考文献 | 第142-157页 |
致谢 | 第157-158页 |
攻读硕士学位期间发表文章 | 第158
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