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猪瘟病毒疫苗株反向遗传学改造并拯救及疫苗在病毒进化中的影响

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猪瘟病毒疫苗株反向遗传学改造并拯救及疫苗在病毒进化中的影响
论文目录
 
目录第1-6页
中文摘要第6-8页
Abstract第8-10页
第一部分 文献综述——猪瘟病毒研究进展第10-31页
  一、猪瘟(Swine fever)第10-14页
  二、猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)第14-29页
  三、猪瘟疫苗的发展第29-30页
  四、本研究的主要任务第30-31页
第二部分 猪瘟病毒 E2 基因抗原性分析及抗体制备第31-63页
  一、材料第31-41页
    1、载体菌株实验动物第31页
    2、主要试剂第31-32页
    3、溶液配制第32-40页
    4、主要仪器设备第40-41页
  二、方法第41-55页
    1、E2 基因和蛋白生物信息学分析第41-42页
    2、E2 基因的提取及原核表达载体的构建第42-48页
    3、E2 蛋白的表达、鉴定与纯化第48-52页
    4、抗血清的制备及鉴定第52-55页
  三、结果第55-62页
    1、E2 基因和蛋白生物信息学分析第55-57页
    2、E2 基因的提取及原核表达载体的构建第57-59页
    3、E2 蛋白的表达、鉴定与纯化第59-61页
    4、抗血清的制备及鉴定第61-62页
  四、讨论第62-63页
第三部分 CSFV C 株反向遗传学改造及拯救第63-100页
  一、材料第63-65页
    1、载体菌种细胞系第63-64页
    2、主要试剂第64页
    3、溶液配制第64页
    4、主要仪器设备第64-65页
  二、方法第65-88页
    1、PMC-18-CSFV-rz-T7 质粒的构建第65-69页
    2、PMC-18-CSFV-rz-T7 表达质粒的分节段改造第69-80页
      · 引物的设计和合成第70页
      · PMC18 –CSFV(含 NS5B)质粒的构建第70-75页
      · pMC18 –CSFV(不含 NS5B)质粒的构建第75-80页
    3、pEGFP-N3-T7RNAP 、pGEM-T-T7-GFP 质粒扩增与鉴定第80-82页
    4、CSFV 病毒拯救第82-86页
    5、病毒的鉴定第86-88页
  三、结果第88-99页
    1、PMC-18-CSFV-rz-T7 质粒的构建第88-90页
      · PMD18-T-3’CSFV-rz-T7 质粒的构建及鉴定第88-89页
      · PMC-18-CSFV-rz-T7 质粒的构建第89-90页
    2、PMC-18-CSFV-rz-T7 表达质粒的分节段改造第90-95页
      · PMD18-T–CSFV(含 NS5B)质粒的构建第90-91页
      · PMC18–CSFV(含 NS5B)质粒的构建第91-92页
      · PMD18-T–CSFV(不含 NS5B)质粒的构建第92-94页
      · pMC18 –CSFV(不含 NS5B)质粒的构建第94-95页
    3、pEGFP-N3-T7RNAP 、pGEM-T-T7-GFP 质粒扩增与鉴定第95页
    4、CSFV 病毒拯救第95-99页
  四、讨论第99-100页
第四部分 疫苗接种在猪瘟病毒进化中的影响第100-119页
  一、实验材料及方法第100-102页
    1、病毒序列收集及分型第100页
    2、鉴定重组病毒第100页
    3、进化速率及种群动态第100-101页
    4、选择压力分析第101页
    5、密码子偏好性分析第101-102页
  二、结果第102-117页
    1、CSFV 取样分布图第102页
    2、病毒分型第102-105页
    3、鉴定重组病毒第105-109页
    4、进化速率及种群动态第109-112页
    5、选择压力分析第112-113页
    6、密码子偏好性分析第113-117页
  三、讨论第117-119页
第五部分 结论第119-120页
附录第120-142页
  附录 1 E2 基因的测序结果结果第120页
  附录 2 PMD18T-3’CSFV-rz-T7 测序结果第120-121页
  附录 3 PMC18 –CSFV(含 NS5B)测序结果第121-123页
  附录 4 PMC18 –CSFV(不含 NS5B)测序结果第123-126页
  附录 5 贝叶斯因子分析表第126-130页
  附录 6 Q 模型聚类分析中使用的 CSFV 的 RSCU第130-133页
  附录 7 进化研究用到的 CSFV 序列第133-142页
参考文献第142-157页
致谢第157-158页
攻读硕士学位期间发表文章第158 页

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