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茶树叶片中硒代半胱氨酸甲基转移酶转录与表达水平的研究

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茶树叶片中硒代半胱氨酸甲基转移酶转录与表达水平的研究
论文目录
 
摘要第1-5 页
Abstract第5-11 页
1 文献综述第11-17 页
  · 硒第11-12 页
  · 茶叶中的硒第12-13 页
  · 硒对茶树的作用第13 页
  · 植物的硒代谢途径第13-15 页
  · 硒代半胱氨酸甲基转移酶(SMT)第15 页
  · 关于富硒食品的研究第15-16 页
  · 植物对硒污染土壤的修复作用第16-17 页
2 引言第17-19 页
  · 研究意义及目的第17 页
  · 研究内容第17-18 页
    · SMT 在富硒茶与非富硒茶中转录水平的研究第17-18 页
    · SMT 在富硒茶与非富硒茶中表达水平的研究第18 页
  · 技术路线第18-19 页
3 材料与方法第19-37 页
  · 实验材料第19 页
  · 仪器与试剂第19-24 页
    · 主要实验仪器第19 页
    · 主要试剂第19-20 页
    · 实验中常用试剂配方第20-24 页
  · 实验方法第24-37 页
    · 总RNA 的提取和检测第24-25 页
    · α-tubulin 原核表达载体的构建第25-30 页
      · cDNA 第一链的合成第25 页
      · α-tubulin 全长cDNA 的扩增第25 页
      · 凝胶电泳回收PCR 产物第25-26 页
      · E. coli DH5α感受态的制备第26-27 页
      · PCR 产物与载体的连接第27 页
      · 重组质粒的转化第27 页
      · 重组子的鉴定第27-28 页
      · α-tubulin 原核表达载体的构建第28 页
      · α-tubulin 的原核表达第28-30 页
      · α-tubulin 原核表达条件优化第30 页
    · α-tubulin 的纯化第30-31 页
      · His 标签融合蛋白的纯化(按照Novagen 公司使用说明进行)第30-31 页
      · 包涵体蛋白的纯化第31 页
    · α-tubulin 兔多克隆抗体的制备第31-33 页
      · 抗原的制备第31-32 页
      · α-tubulin 兔抗血清的制备第32 页
      · 多克隆抗体的纯化第32-33 页
    · 茶树叶片总蛋白粗提液的制备第33 页
    · Western blot 检测抗体特异性第33-34 页
    · SMT 兔多克隆抗体的制备及检测第34 页
    · SMT 在富硒茶与非富硒茶中表达水平的研究第34-35 页
    · SMT 在富硒茶与非富硒茶中转录水平的研究第35-37 页
      · 富硒茶与非富硒茶叶片总RNA 的提取与定量第35 页
      · cDNA 一链的合成及定量第35 页
      · 半定量PCR 引物设计第35 页
      · PCR 反应条件的优化第35-36 页
        · 退火温度的优化第35 页
        · 模板量的优化第35-36 页
        · 循环数的优化第36 页
      · SMT 在富硒茶与非富硒茶中转录水平的研究第36-37 页
4 结果与分析第37-48 页
  · RNA 的提取与质量检测第37-38 页
    · RNA 的琼脂糖凝胶电泳第37 页
    · 紫外分光光度法检测RNA 纯度第37-38 页
  · cDNA 第一链的电泳检测及浓度测定第38 页
  · α-tubulin 原核表达载体的构建第38-39 页
    · α-tubulin 全长基因克隆第38-39 页
    · 菌落PCR第39 页
    · 双酶切鉴定第39 页
  · α-tubulin 的原核表达第39-40 页
  · α-tubulin 原核表达的优化第40-42 页
    · 最佳诱导温度第40-41 页
    · 最佳诱导IPTG 浓度第41 页
    · 最佳诱导菌液浓度第41-42 页
    · 最佳诱导时间第42 页
  · α-tubulin 的纯化第42-43 页
  · 茶树叶片总蛋白粗提液的制备第43 页
  · α-tubulin 和 SMT 兔多克隆抗体特异性鉴定第43-44 页
  · SMT 在富硒茶与非富硒茶中表达水平的研究第44-45 页
  · SMT 在富硒茶与非富硒茶中转录水平的研究第45-48 页
    · PCR 反应条件的优化第45-47 页
      · 退火温度的优化第45 页
      · 模板量的优化第45-46 页
      · 循环数的优化第46-47 页
    · SMT 在富硒茶与非富硒茶中转录水平的研究第47-48 页
5 讨论第48-51 页
  · CTAB-LiCl 法提取总 RNA第48 页
  · 半定量PCR第48 页
  · His-Tua 的纯化方式第48-49 页
  · 多克隆抗体的制备方法第49 页
  · SMT 转录与表达水平差异形成的可能原因第49 页
  · 由SMT 转录与表达水平所得的一些关于生产富硒茶的建议第49-51 页
6 结论第51-52 页
  · α-tubulin 的原核表达第51 页
  · α-tubulin 和 SMT 多克隆抗体的制备第51 页
  · 富硒茶与非富硒茶叶片中SMT 表达水平研究第51 页
  · 富硒茶与非富硒茶叶片中SMT 转录水平研究第51-52 页
参考文献第52-56 页
附录A 中英文缩写与注释第56-58 页
附录B α-tubulin 测序及比对结果第58-63 页
附录C 蛋白序列比对结果第63-64 页
致谢第64-65 页
作者简介第65 页
成果清单第65页

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