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猪传染性胃肠炎病毒全基因组扩增及S蛋白表达
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猪传染性胃肠炎病毒全基因组扩增及S蛋白表达
论文目录
摘要
第1-4页
Abstract
第4-10页
1 引言
第10-19页
· TGE 的流行病学
第10页
· TGE 的症状及病理变化
第10-11页
· TGEV 的病原特征
第11-12页
· TGEV 基因组学
第12-16页
· TGEV 基因组结构
第12-13页
· TGEV 的结构蛋白
第13-15页
· TGEV 的非结构蛋白
第15-16页
· 猪传染性胃肠炎诊断技术的研究进展
第16-17页
· 分子生物学诊断技术
第16-17页
· 血清学检测技术
第17页
· TGEV 的防制
第17页
· TGEV 反向遗传的研究进展
第17-18页
· 本研究的目的及意义
第18-19页
2 猪传染性胃肠炎病毒的分离与培养
第19-25页
· 材料
第19-20页
· 猪粪便来源
第19页
· 用于病毒培养的细胞系
第19页
· 细胞培养基
第19页
· RT-PCR 检测试剂
第19-20页
· 实验仪器设备
第20页
· 方法
第20-23页
· 患有TGEV 病猪粪便的处理
第20页
· 猪传染性胃肠炎病毒的细胞培养
第20-21页
· RT-PCR 法检测细胞中的 TGEV
第21-23页
· 结果
第23-24页
· 细胞攻毒
第23页
· RT-PCR 实验结果
第23-24页
· 测序结果
第24页
· 讨论
第24-25页
3 猪传染性胃肠炎病毒全基因组序列测定与分析
第25-34页
· 材料
第25-26页
· 毒株及主要试剂
第25-26页
· 主要仪器
第26页
· 方法
第26-32页
· 引物的设计与合成
第26-28页
· 病毒总 RNA 的提取
第28页
· RT-PCR 扩增
第28-30页
· PCR 产物回收与连接
第30-31页
· 连接产物的转化
第31页
· 重组质粒 DNA 制备及重组质粒的 PCR 鉴定
第31-32页
· 猪传染性胃肠炎病毒全基因组的连接
第32页
· 结果
第32-34页
· 病毒基因组cDNA 片段的 RT-PCR 扩增结果
第32页
· RT-PCR 产物的克隆、测序与序列拼接
第32-33页
· TGEV 全基因组序列比较和系统进化树构建
第33-34页
· 讨论
第34页
4 猪传染性胃肠炎病毒 S 基因 D 位点缺失原核表达及纯化
第34-43页
· 材料
第35-36页
· 菌株及载体
第35页
· 主要试剂
第35-36页
· 主要仪器
第36页
· 方法
第36-40页
· 引物的设计与合成
第36页
· RT-PCR
第36-37页
· PCR 产物纯化与载体连接
第37页
· 连接产物的转化
第37页
· 重组质粒 DNA 制备及重组质粒的鉴定
第37页
· 原核表达载体 PET-32a 的构建
第37-39页
· 重组表达载体的诱导表达
第39页
· 目的蛋白的纯化
第39-40页
· 结果
第40-42页
· S 基因的PCR 结果
第40页
· 目的片段的克隆鉴定
第40页
· 重组表达载体的酶切鉴定
第40页
· 原核蛋白表达及最优诱导浓度的确定
第40-41页
· 蛋白可溶性确定
第41页
· 蛋白的纯化与复性
第41-42页
· 讨论
第42-43页
5 结论
第43-44页
致谢
第44-45页
参考文献
第45-50页
附录
第50-67页
作者简介
第67 页
本篇论文共
67
页,
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