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猪传染性胃肠炎病毒全基因组扩增及S蛋白表达

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猪传染性胃肠炎病毒全基因组扩增及S蛋白表达
论文目录
 
摘要第1-4页
Abstract第4-10页
1 引言第10-19页
  · TGE 的流行病学第10页
  · TGE 的症状及病理变化第10-11页
  · TGEV 的病原特征第11-12页
  · TGEV 基因组学第12-16页
    · TGEV 基因组结构第12-13页
    · TGEV 的结构蛋白第13-15页
    · TGEV 的非结构蛋白第15-16页
  · 猪传染性胃肠炎诊断技术的研究进展第16-17页
    · 分子生物学诊断技术第16-17页
    · 血清学检测技术第17页
  · TGEV 的防制第17页
  · TGEV 反向遗传的研究进展第17-18页
  · 本研究的目的及意义第18-19页
2 猪传染性胃肠炎病毒的分离与培养第19-25页
  · 材料第19-20页
    · 猪粪便来源第19页
    · 用于病毒培养的细胞系第19页
    · 细胞培养基第19页
    · RT-PCR 检测试剂第19-20页
    · 实验仪器设备第20页
  · 方法第20-23页
    · 患有TGEV 病猪粪便的处理第20页
    · 猪传染性胃肠炎病毒的细胞培养第20-21页
    · RT-PCR 法检测细胞中的 TGEV第21-23页
  · 结果第23-24页
    · 细胞攻毒第23页
    · RT-PCR 实验结果第23-24页
    · 测序结果第24页
  · 讨论第24-25页
3 猪传染性胃肠炎病毒全基因组序列测定与分析第25-34页
  · 材料第25-26页
    · 毒株及主要试剂第25-26页
    · 主要仪器第26页
  · 方法第26-32页
    · 引物的设计与合成第26-28页
    · 病毒总 RNA 的提取第28页
    · RT-PCR 扩增第28-30页
    · PCR 产物回收与连接第30-31页
    · 连接产物的转化第31页
    · 重组质粒 DNA 制备及重组质粒的 PCR 鉴定第31-32页
    · 猪传染性胃肠炎病毒全基因组的连接第32页
  · 结果第32-34页
    · 病毒基因组cDNA 片段的 RT-PCR 扩增结果第32页
    · RT-PCR 产物的克隆、测序与序列拼接第32-33页
    · TGEV 全基因组序列比较和系统进化树构建第33-34页
  · 讨论第34页
4 猪传染性胃肠炎病毒 S 基因 D 位点缺失原核表达及纯化第34-43页
  · 材料第35-36页
    · 菌株及载体第35页
    · 主要试剂第35-36页
    · 主要仪器第36页
  · 方法第36-40页
    · 引物的设计与合成第36页
    · RT-PCR第36-37页
    · PCR 产物纯化与载体连接第37页
    · 连接产物的转化第37页
    · 重组质粒 DNA 制备及重组质粒的鉴定第37页
    · 原核表达载体 PET-32a 的构建第37-39页
    · 重组表达载体的诱导表达第39页
    · 目的蛋白的纯化第39-40页
  · 结果第40-42页
    · S 基因的PCR 结果第40页
    · 目的片段的克隆鉴定第40页
    · 重组表达载体的酶切鉴定第40页
    · 原核蛋白表达及最优诱导浓度的确定第40-41页
    · 蛋白可溶性确定第41页
    · 蛋白的纯化与复性第41-42页
  · 讨论第42-43页
5 结论第43-44页
致谢第44-45页
参考文献第45-50页
附录第50-67页
作者简介第67 页

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