球形马拉色菌脂肪酶SMG1的重组表达及性质研究

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球形马拉色菌脂肪酶SMG1的重组表达及性质研究

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球形马拉色菌脂肪酶SMG1的重组表达及性质研究

论文目录
摘要	第1-6页
Abstract	第6-11页
第一章绪论	第11-25页
· 脂肪酶的研究进展	第11-17页
· 脂肪酶的简介	第11-12页
· 脂肪酶的结构与催化机制	第12-13页
· 脂肪酶的性质	第13-15页
· 脂肪酶的应用	第15-17页
· 微生物脂肪酶的研究现状	第17-21页
· 产脂肪酶微生物的来源	第17-18页
· 脂肪酶的酶活力检测方法	第18-19页
· 微生物脂肪酶的纯化	第19页
· 微生物脂肪酶的毕赤酵母表达系统	第19-21页
· 球形马拉色菌的研究进展	第21-23页
· 球形马拉色菌的简介	第21页
· 脂肪酶在球形马拉色菌的致病过程中的作用	第21-22页
· 球形马拉色菌的基因组学特点	第22页
· 球形马拉色菌脂肪酶的研究进展	第22-23页
· 本课题的研究目的及意义	第23-25页
第二章球形马拉色菌脂肪酶基因的克隆	第25-42页
· 引言	第25页
· 材料	第25-27页
· 菌株与载体	第25页
· 试剂	第25-26页
· 培养基及溶液配制	第26-27页
· 常用仪器	第27页
· 实验方法	第27-35页
· 基因序列的分析及引物设计	第27-28页
· PCR 扩增目的基因	第28-29页
· 双酶消化及连接目的基因与 BSK 载体	第29-30页
· 重组质粒转化大肠杆菌 DH5α	第30页
· 重组子的筛选与鉴定	第30-32页
· 合成 smg1 基因中错误碱基的修复	第32页
· 毕赤酵母表达载体构建	第32-33页
· 毕赤酵母重组表达菌株的构建与筛选	第33-34页
· 脂肪酶活力测定	第34-35页
· 蛋白质浓度测定	第35页
· 结果与讨论	第35-41页
· 球形马拉色菌脂肪酶 smg1 基因的克隆	第35-37页
· 球形马拉色菌脂肪酶 smg1 基因的测序及修复	第37-38页
· 毕赤酵母表达载体的构建	第38-39页
· 毕赤酵母重组表达菌株的筛选	第39-41页
· 毕赤酵母重组表达 SMG1 的酶活	第41页
· 本章小结	第41-42页
第三章毕赤酵母重组表达球形马拉色菌 SMG1 的发酵条件优化	第42-53页
· 引言	第42页
· 材料与设备	第42页
· 实验菌株	第42页
· 实验仪器	第42页
· 实验方法	第42-44页
· 菌株的活化与发酵培养	第42-43页
· 脂肪酶活力检测	第43页
· 生长曲线的测定	第43页
· 中心组合设计	第43-44页
· 结果与讨论	第44-51页
· 重组毕赤酵母 SMG1 的最适发酵时间确定	第44-45页
· 回归方程分析	第45页
· 响应面回归方程分析及各因素对酶活的影响	第45-51页
· 最佳培养条件的验证	第51页
· 本章小结	第51-53页
第四章脂肪酶 SMG1 的纯化与性质研究	第53-68页
· 引言	第53页
· 试剂和仪器	第53-54页
· 试剂	第53-54页
· 仪器	第54页
· 实验方法	第54-57页
· 酶活检测方法及蛋白浓度测定方法	第54页
· 蛋白纯化方法	第54-55页
· 温度对重组 SMG1 的酶活及稳定性的影响	第55页
· pH 对重组 SMG1 的酶活及稳定性的影响	第55-56页
· 各种金属离子、表面活性剂和有机溶剂对重组 SMG1 的影响	第56页
· SMG1 冻干粉的制备	第56页
· 重组 SMG1 对甘油酯的水解特异性	第56-57页
· 重组 SMG1 的酯化特性	第57页
· HPLC 检测方法	第57页
· 酸价滴定方法	第57页
· 实验结果与讨论	第57-67页
· 重组 SMG1 的纯化	第57-58页
· 温度对重组 SMG1 的活性及稳定性的影响	第58-59页
· pH 对重组 SMG1 的活性和稳定性的影响	第59-61页
· 各种金属离子、表面活性剂及有机溶剂对重组 SMG1 酶活的影响	第61-63页
· 重组 SMG1 对甘油酯的水解特异性	第63-64页
· 重组 SMG1 的酯化性质	第64-67页
· 本章小结	第67-68页
结论与展望	第68-70页
参考文献	第70-76页
攻读硕士学位期间取得的研究成果	第76-77页
致谢	第77-78页
附件	第78页

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