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利用红色荧光蛋白构建直观判断重组子的大肠杆菌表达载体

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利用红色荧光蛋白构建直观判断重组子的大肠杆菌表达载体
论文目录
 
摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
第一章 绪论第13-22页
  · 判断重组基因克隆的方法概述第13-18页
  · 大肠杆菌表达系统中重组子筛选方法及实际工作中遇到的问题第18-19页
  · 红色荧光蛋白的介绍第19页
  · 该论文的研究目的第19页
  · 关于本文所采用的试剂、方法、仪器等的说明第19-22页
第二章 不同类型启动子对于构建红色荧光蛋白大肠杆菌表达载体的影响第22-36页
  第一节 利用T7启动子构建红色荧光蛋白大肠杆菌表达载体的初步尝试第22-30页
    · 引言第22页
    · 实验方法第22-24页
      · 用T7启动子系统(pET-28a质粒)构建红色荧光蛋白表达载体第22-24页
      · 对pET-28aRFP质粒的测序验证第24页
    · 结果与讨论第24-28页
      · 用T7正向测序结果第24-25页
      · 用T7ter反向测序结果第25-26页
      · 正反向测序结果拼接得到pET-28aRFP重组基因正确编码序列第26-28页
      · pET-28aRFP重组质粒转化大肠杆菌的现象与分析第28页
    · 小结第28-30页
  第二节 利用组成型lac启动子构建红色荧光蛋白大肠杆菌表达载体的改进尝试第30-33页
    · 引言第30页
    · 实验方法第30页
      · 利用lac启动子(pEZZ18质粒)构建红色荧光蛋白表达载体第30页
    · 结果与讨论第30-32页
      · pEZZ18-RFP重组质粒转化大肠杆菌后菌落颜色特点分析第30-32页
    · 小结第32-33页
  第三节 利用杂合强诱导型tac启动子构建红色荧光蛋白大肠杆菌表达载体的改进尝试第33-36页
    · 引言第33页
    · 实验方法第33页
    · 结果与讨论第33-36页
第三章 RFP(DsRed2)的全基因合成第36-46页
  · 对FRP原始基因(DsRed2)序列的分析第36-37页
  · 实验方法第37-41页
    · RFP(DsRed2)基因序列的优化和全基因合成设计第37-41页
    · 用全基因合成的RFP(DsRed2)基因构建红色荧光蛋白表达载体第41页
  · 结果与讨论第41-43页
    · 全基因合成的RFP重组质粒转化大肠杆菌后菌落颜色的特点分析第41-42页
    · 全基因合成的RFP(DsRed2)重组克隆的序列测定第42-43页
  · 小结第43-46页
第四章 诱导剂对红色荧光蛋白菌落显色的影响第46-49页
  · 引言第46页
  · 实验方法及结论第46-47页
    · 培养基中添加IPTG对红色荧光蛋白菌落显色的影响第46页
    · 在培养基中添加D-半乳糖对红色荧光蛋白菌落显色的影响第46-47页
  · 小结第47-49页
第五章 红色荧光蛋白的理性设计第49-67页
  第一节 红色荧光蛋白的7点突变第49-59页
    · 引言第49页
    · 实验方法第49-54页
      · 对最先使用的28aRFP克隆的7点突变第49-52页
      · 对全基因合成的28aZKRFP克隆的7点突变第52-54页
    · 结果与讨论第54-57页
      · 原始RFP基因7点突变PCR电泳图第54-55页
      · 全基因合成RFP突变PCR电泳图第55-56页
      · 对两个版本的RFP基因7点突变后的菌落显色结果及分析第56-57页
    · 小结第57-59页
  第二节 红色荧光蛋白的3点突变第59-67页
    · 引言第59页
    · 实验方法第59-60页
      · 对原始的RFP和全基因合成的RFP基因的3点突变第59页
      · 两个版本的RFP基因3点突变后的克隆方案第59-60页
    · 结果与讨论第60-65页
      · 原始RFP基因3点突变PCR结果第60-61页
      · 全基因合成的RFP基因3点突变PCR结果第61页
      · 两个版本的RFP基因3点突变后的实验结果第61-63页
      · 30a17cZMCRFP载体转转化后18小时和36小时,在两种固体培养基上的对比实验结果第63-64页
      · 30a17cZMCRFP载体序列描述第64-65页
    · 小结第65-67页
第六章 结论第67-70页
参考文献第70-73页
附录一 实验方法第73-75页
附录二 试剂第75-78页
附录三 仪器设备第78-80页
致谢第80-82页
作者及导师简介第82-83页
附件第83-84页

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