论文目录 | |
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 主要符号对照表 | 第12-14页 |
| 第1章 引言 | 第14-22页 |
| 1.1 马蓝 | 第14-15页 |
| 1.1.1 马蓝的本草考证 | 第14页 |
| 1.1.2 马蓝生物学及生态特征 | 第14-15页 |
| 1.2 马蓝药效物质研究进展 | 第15-17页 |
| 1.2.1 吲哚类生物碱 | 第16-17页 |
| 1.3 吲哚类生物碱生物合成途径及其关键酶 | 第17-19页 |
| 1.3.1 邻氨基苯甲酸合酶（AS） | 第18-19页 |
| 1.4 立题依据与意义及主要研究内容 | 第19-22页 |
| 1.4.1 立题依据与意义 | 第19页 |
| 1.4.2 主要研究内容 | 第19-22页 |
| 第2章 Bc ASA1，Bc ASA2，Bc ASB基因序列的克隆 | 第22-40页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第22-23页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第22-23页 |
| 2.1.2 仪器设备 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-29页 |
| 2.2.1 器材准备 | 第23-24页 |
| 2.2.2 马蓝中RNA提取（天根Trzol-A+） | 第24页 |
| 2.2.3 电泳检测RNA的质量与纯度 | 第24页 |
| 2.2.4 RNA浓度检测 | 第24页 |
| 2.2.5 马蓝c DNA第一链的合成 | 第24-25页 |
| 2.2.6 PCR扩增Bc ASA1，Bc ASA2，Bc ASB基因片段 | 第25-28页 |
| 2.2.7 Bc ASA1，Bc ASA2，Bc ASB生物信息学分析 | 第28-29页 |
| 2.3Bc ASA g DNA序列的克隆 | 第29-38页 |
| 2.3.1 总RNA提取及c DNA第一链合成 | 第30页 |
| 2.3.2 Bc ASA1，Bc ASA2，Bc ASB基因克隆 | 第30-31页 |
| 2.3.3 Bc ASA1，Bc ASA2，Bc ASB生物信息学分析 | 第31-38页 |
| 2.4 本章小结 | 第38-40页 |
| 第3章 Bc ASA1，Bc ASA2和Bc ASB的表达特征分析 | 第40-55页 |
| 3.1 实验材料与仪器 | 第40-41页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第40页 |
| 3.1.2 植物材料 | 第40-41页 |
| 3.1.3 仪设备器 | 第41页 |
| 3.2 实验方法 | 第41-49页 |
| 3.2.1 RNA的提取、反转录与实时定量PCR | 第41-43页 |
| 3.2.2 亚细胞定位实验 | 第43-49页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第49-52页 |
| 3.3.1 Bc ASA1，Bc ASA2，Bc ASB组织特异性表达分析 | 第49页 |
| 3.3.2 Bc ASA1，Bc ASA2，Bc ASB外源激素诱导表达分析 | 第49-51页 |
| 3.3.3 激光共聚焦观察结果 | 第51-52页 |
| 3.4 本章小结 | 第52-55页 |
| 3.4.1 Bc ASA1，Bc ASA2，Bc ASB组织特异性表达分析 | 第52-53页 |
| 3.4.2 Bc ASA1，Bc ASA2，Bc ASB外源激素诱导表达分析 | 第53页 |
| 3.4.3 Bc ASA1，Bc ASA2，Bc ASB亚细胞定位分析 | 第53-55页 |
| 第4章原核表达 | 第55-67页 |
| 4.1 实验材料 | 第55-56页 |
| 4.1.1 实验所用到的菌株与质粒 | 第55页 |
| 4.1.2 试剂与药品 | 第55-56页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第56页 |
| 4.2 实验方法 | 第56-61页 |
| 4.2.1 原核表达载体构建 | 第56-58页 |
| 4.2.2 三个基因目的蛋白的诱导表达 | 第58页 |
| 4.2.3 SDS-PAGE检测表达的目的蛋白 | 第58-60页 |
| 4.2.4 目的蛋白的纯化 | 第60页 |
| 4.2.5 目的蛋白的除盐和浓缩 | 第60页 |
| 4.2.6 目的蛋白浓度的测定 | 第60-61页 |
| 4.2.7 BCASA1.BCASA2的酶活测定 | 第61页 |
| 4.3 实验结果 | 第61-65页 |
| 4.3.1 目的蛋白的诱导表达 | 第61-63页 |
| 4.3.2 蛋白浓度测定 | 第63-64页 |
| 4.3.3 BCASA1.BCASA2的酶活测 | 第64-65页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第65-67页 |
| 第5章 Bc ASA1,Bc ASA2,Bc ASB体内功能研究 | 第67-81页 |
| 5.1 实验材料与仪器 | 第67-69页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第67页 |
| 5.1.2 实验所用到的质粒和菌株 | 第67-68页 |
| 5.1.3 试剂和药品 | 第68页 |
| 5.1.4 仪器和设备 | 第68-69页 |
| 5.2 实验方法 | 第69-76页 |
| 5.2.1 培养基配制（参考分子实验操作手册） | 第69页 |
| 5.2.2 Bc ASA1,Bc ASA2,Bc ASB过表达载体的构建 | 第69-76页 |
| 5.3 实验结果 | 第76-79页 |
| 5.3.1 Bc ASA1,Bc ASA2,Bc ASB过表达载体的构建 | 第76-78页 |
| 5.3.2 菘蓝的遗传转化及其分子鉴定 | 第78-79页 |
| 5.4 本章小结 | 第79-81页 |
| 第6章 总结与展望 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
