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病毒性出血性败血症病毒检测方法的建立与应用
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病毒性出血性败血症病毒检测方法的建立与应用
论文目录
 
摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第一章 绪论第12-22页
　　· 病毒性出血性败血病第12页
　　· 病毒性出血性败血病病毒第12-14页
　　　　· 生物学特征第13页
　　　　· 病毒亚型第13-14页
　　　　· 宿主细胞第14页
　　· 流行病学调查第14-16页
　　　　· 疾病发现史第14-15页
　　　　· 发病症状第15页
　　　　· 传播途径第15-16页
　　　　· 疾病的爆发第16页
　　　　· 预防措施第16页
　　· 病毒检测方法的研究第16-20页
　　　　· 细胞培养对病毒进行鉴定第17页
　　　　· 免疫学检测方法第17-18页
　　　　　　· 血清中和试验第17-18页
　　　　· 荧光抗体试验第18-19页
　　　　　　· 酶联免疫吸附试验第18-19页
　　　　· 分子生物学检测方法第19-20页
　　　　　　· 反转录聚合酶链式反应法第19页
　　　　　　· PCR-DHPLC技术第19页
　　　　　　· 实时荧光PCR(Real-time PCR)第19-20页
　　　　　　· 环介导等温扩增技术第20页
　　· 立题背景第20-22页
第二章 材料与方法第22-36页
　　· 实验材料第22-26页
　　　　· 毒株、细胞及引物第22-23页
　　　　· 试验用仪器第23-24页
　　　　· 主要实验药品及试剂第24-25页
　　　　· 主要培养基及试剂的配制第25-26页
　　· 试验方法第26-36页
　　　　· 病毒的扩增第26-27页
　　　　　　· EPC细胞的复苏第26页
　　　　　　· EPC细胞的传代第26页
　　　　　　· 病毒的增值第26-27页
　　　　　　· Karber法测定病毒滴度第27页
　　　　· 病毒理化特性的测定第27-28页
　　　　　　· 热稳定性试验第27页
　　　　　　· 耐酸碱性试验第27页
　　　　　　· 对有机溶剂敏感性试验第27-28页
　　　　· 毒株的鉴定第28-30页
　　　　　　· 病毒RNA的提取第28页
　　　　　　· RT-PCR扩增第28页
　　　　　　· 目的片段的获得与纯化第28-29页
　　　　　　· 目的片段与pMD18-T载体的连接及转化第29页
　　　　　　· 阳性重组质粒的筛选及鉴定第29-30页
　　　　　　· 重组质粒pMD18-T-IPNV-Sp的抽提第30页
　　　　· 序列测定及同源性比对分析第30页
　　　　· 病毒回归实验第30-31页
　　　　· 应用RT-PCR对人工感染的斑马鱼进行检测第31-32页
　　　　　　· 病毒RNA的提取第31页
　　　　　　· 反转录第31页
　　　　　　· PCR扩增反应条件建立第31页
　　　　　　· RT-PCR的特异性试验第31页
　　　　　　· RT-PCR的灵敏度试验第31-32页
　　　　· 应用PCR-DHPLC对人工感染的斑马鱼进行检测第32页
　　　　　　· PCR扩增产物的DHPLC分析鉴定第32页
　　　　　　· PCR-DHPLC的特异性试验第32页
　　　　　　· PCR-DHPLC的灵敏度试验第32页
　　　　· 应用荧光RT-PCR对人工感染的斑马鱼进行检测第32-33页
　　　　　　· 荧光RT-PCR引物及探针的设计第32-33页
　　　　　　· 荧光RT-PCR扩增反应条件的建立第33页
　　　　　　· 荧光RT-PCR的特异性试验第33页
　　　　　　· 荧光RT-PCR的灵敏度试验第33页
　　　　· 应用荧光RT-LAMP对人工感染的斑马鱼进行检测第33-36页
　　　　　　· 荧光RT-LAMP引物的设计第33-34页
　　　　　　· 荧光RT-LAMP反应体系及条件的建立第34页
　　　　　　· 荧光RT-LAMP的特异性试验第34-35页
　　　　　　· 荧光RT-LAMP的灵敏度试验第35-36页
第三章 实验结果第36-53页
　　· 病毒扩增结果第36-38页
　　　　· 毒株鉴定结果第36-37页
　　　　· 毒株滴度及理化特性测定第37-38页
　　· 毒株鉴定结果第38-42页
　　　　· RT-PCR鉴定结果第38-40页
　　　　· 目的片段纯化结果第40页
　　　　· 目的片段测序结果第40-41页
　　　　· 核酸序列及氨基酸序列同源性分析比较第41-42页
　　· 病毒回归实验第42-45页
　　　　· RT-PCR的特异性试验第43-44页
　　　　· RT-PCR的灵敏度试验第44-45页
　　· PCR-DHPLC检测结果第45-47页
　　　　· PCR扩增产物的DHPLC分析结果第45页
　　　　· PCR-DHPLC检测的特异性试验结果第45-46页
　　　　· PCR-DHPLC检测的灵敏度试验结果第46-47页
　　· 荧光RT-PCR检测结果第47-48页
　　　　· 荧光RT-PCR检测的特异性试验结果第47-48页
　　　　· 荧光RT-PCR检测的灵敏度试验结果第48页
　　· 荧光RT-LAMP检测结果第48-53页
　　　　· 荧光RT-LAMP扩增结果第48-49页
　　　　· 荧光RT-LAMP检测的特异性试验结果第49-51页
　　　　· 荧光RT-LAMP检测的灵敏度试验结果第51-53页
第四章 实验结论第53-54页
第五章 讨论第54-57页
　　· 传统诊断方法第54页
　　· RT-PCR诊断方法第54页
　　· RT-PCR结合变性高效液相色谱技术(DHPLC)第54-55页
　　· 荧光定量RT-PCR第55页
　　· 荧光RT-LAMP第55-57页
参考文献第57-60页
致谢第60页

本篇论文共60页，点击这进入下载页面。
 
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