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一种嗜热菌Pif1解旋酶的表达纯化及活性分析

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一种嗜热菌Pif1解旋酶的表达纯化及活性分析
论文目录
 
摘要第1-6页
Abstract第6-10页
第一章 文献综述第10-24页
  · 解旋酶概述第10-15页
    · 解旋酶介绍第10-11页
    · 解旋酶的分类第11-12页
    · 解旋酶研究现状第12-15页
  · G4-DNA 介绍第15-16页
  · Pif1 家族研究进展第16-18页
    · Pif1 家族解旋酶介绍第16页
    · 酵母中 Pif1 家族解旋酶的研究进展第16-17页
    · 锥虫中 Pif1 家族解旋酶的研究进展第17页
    · 哺乳动物中 Pif1 家族解旋酶的研究进展第17-18页
  · 解旋酶的研究方法第18-21页
    · 电泳迁移率实验(Electrophoretic Mobility Shift Assay, EMSA)第19-20页
    · 荧光各向异性方法第20-21页
    · 基于荧光能量共振转移的 stopped-flow 技术第21页
  · 解旋酶结晶研究进展第21-22页
  · 本研究的目的和意义第22-24页
第二章 DePif1 的表达载体构建及原核表达条件优化第24-35页
  · 材料第24-27页
    · 引物、载体、宿主菌及分子生物学试剂第24-25页
    · 主要配制试剂第25-26页
    · 培养基和抗生素第26-27页
    · 主要仪器设备第27页
  · 实验方法第27-31页
    · DePif1 编码基因的 PCR 扩增第27-30页
    · DePif1 重组表达载体的构建第30-31页
    · DePif1 原核表达条件的优化第31页
  · 结果与分析第31-33页
    · DePif1 编码序列的 PCR 扩增第31-32页
    · DePif1 表达载体的构建第32页
    · DePif1 原核表达条件的优化第32-33页
  · 讨论第33-35页
第三章 DePif1 解旋酶的表达与纯化第35-43页
  · 材料第35-39页
    · 载体、菌株、分子生物学试剂第35页
    · 主要配制试剂第35-38页
    · 培养基和抗生素第38页
    · 主要仪器设备第38-39页
  · 方法第39-40页
    · 融合蛋白的表达和亲和层析纯化第39页
    · 融合蛋白标签的去除第39-40页
    · 无标签 DePif1 的亲和纯化第40页
  · 结果与分析第40-42页
    · DePif1 解旋酶高效纯化流程的建立第40-41页
    · DePif1 解旋酶纯化过程分析第41-42页
  · 讨论第42-43页
第四章 DePif1 解旋酶的活性分析第43-49页
  · 材料第43-45页
    · 蛋白材料及 DNA 底物第43页
    · 主要配制试剂第43-44页
    · 主要仪器第44-45页
  · 方法第45-46页
    · DePif1 DNA 结合能力检测第45页
    · DePif1 解旋活性检测第45-46页
  · 结果与分析第46-48页
    · DePif1 与 DNA 底物结合活性分析第46-47页
    · DePif1 的 DNA 解旋活性分析第47-48页
  · 讨论第48-49页
第五章 结论第49-50页
参考文献第50-57页
致谢第57-58页
作者简介第58 页

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