一种嗜热菌Pif1解旋酶的表达纯化及活性分析 |
论文目录 | | 摘要 | 第1-6页 | Abstract | 第6-10页 | 第一章 文献综述 | 第10-24页 | · 解旋酶概述 | 第10-15页 | · 解旋酶介绍 | 第10-11页 | · 解旋酶的分类 | 第11-12页 | · 解旋酶研究现状 | 第12-15页 | · G4-DNA 介绍 | 第15-16页 | · Pif1 家族研究进展 | 第16-18页 | · Pif1 家族解旋酶介绍 | 第16页 | · 酵母中 Pif1 家族解旋酶的研究进展 | 第16-17页 | · 锥虫中 Pif1 家族解旋酶的研究进展 | 第17页 | · 哺乳动物中 Pif1 家族解旋酶的研究进展 | 第17-18页 | · 解旋酶的研究方法 | 第18-21页 | · 电泳迁移率实验(Electrophoretic Mobility Shift Assay, EMSA) | 第19-20页 | · 荧光各向异性方法 | 第20-21页 | · 基于荧光能量共振转移的 stopped-flow 技术 | 第21页 | · 解旋酶结晶研究进展 | 第21-22页 | · 本研究的目的和意义 | 第22-24页 | 第二章 DePif1 的表达载体构建及原核表达条件优化 | 第24-35页 | · 材料 | 第24-27页 | · 引物、载体、宿主菌及分子生物学试剂 | 第24-25页 | · 主要配制试剂 | 第25-26页 | · 培养基和抗生素 | 第26-27页 | · 主要仪器设备 | 第27页 | · 实验方法 | 第27-31页 | · DePif1 编码基因的 PCR 扩增 | 第27-30页 | · DePif1 重组表达载体的构建 | 第30-31页 | · DePif1 原核表达条件的优化 | 第31页 | · 结果与分析 | 第31-33页 | · DePif1 编码序列的 PCR 扩增 | 第31-32页 | · DePif1 表达载体的构建 | 第32页 | · DePif1 原核表达条件的优化 | 第32-33页 | · 讨论 | 第33-35页 | 第三章 DePif1 解旋酶的表达与纯化 | 第35-43页 | · 材料 | 第35-39页 | · 载体、菌株、分子生物学试剂 | 第35页 | · 主要配制试剂 | 第35-38页 | · 培养基和抗生素 | 第38页 | · 主要仪器设备 | 第38-39页 | · 方法 | 第39-40页 | · 融合蛋白的表达和亲和层析纯化 | 第39页 | · 融合蛋白标签的去除 | 第39-40页 | · 无标签 DePif1 的亲和纯化 | 第40页 | · 结果与分析 | 第40-42页 | · DePif1 解旋酶高效纯化流程的建立 | 第40-41页 | · DePif1 解旋酶纯化过程分析 | 第41-42页 | · 讨论 | 第42-43页 | 第四章 DePif1 解旋酶的活性分析 | 第43-49页 | · 材料 | 第43-45页 | · 蛋白材料及 DNA 底物 | 第43页 | · 主要配制试剂 | 第43-44页 | · 主要仪器 | 第44-45页 | · 方法 | 第45-46页 | · DePif1 DNA 结合能力检测 | 第45页 | · DePif1 解旋活性检测 | 第45-46页 | · 结果与分析 | 第46-48页 | · DePif1 与 DNA 底物结合活性分析 | 第46-47页 | · DePif1 的 DNA 解旋活性分析 | 第47-48页 | · 讨论 | 第48-49页 | 第五章 结论 | 第49-50页 | 参考文献 | 第50-57页 | 致谢 | 第57-58页 | 作者简介 | 第58
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