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棉花GhIAA14基因的分子克隆、组织表达与功能分析
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棉花GhIAA14基因的分子克隆、组织表达与功能分析
论文目录
 
目录第1-7页
摘要第7-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略词表第11-12页
第一部分 文献综述第12-44页
　　第一章 棉花纤维发育研究进展第12-24页
　　　　1 棉花纤维结构植物学研究第12-15页
　　　　　　· 起始期第12-13页
　　　　　　· 伸长期第13页
　　　　　　· 次生壁加厚期第13-14页
　　　　　　· 成熟期第14-15页
　　　　2 棉花纤维发育伸长期研究进展第15-20页
　　　　　　· 影响棉花纤维伸长发育的因素第15-18页
　　　　　　　　· 影响棉纤维延伸的内部因素第15-16页
　　　　　　　　· 激素、温度、光照对棉花纤维伸长期的影响第16-18页
　　　　　　· 棉花纤维伸长发育相关基因的研究进展第18-20页
　　　　3 棉纤维与拟南芥毛状体发育的比较和联系第20-24页
　　第二章 植物激素生长素相关研究进展第24-44页
　　　　1 生长素与植物生长和发育第24-30页
　　　　　　· 生长素的合成和代谢第24-26页
　　　　　　· 生长素在植物体内的运输机制第26-27页
　　　　　　· 生长素的主要生理功能第27-30页
　　　　2 植物中生长素信号组分之间的互作与综合第30-40页
　　　　　　· 生长素响应的基本机制第30-32页
　　　　　　· 生长素信号途径中的关键因子Aux/IAA第32-36页
　　　　　　· AUX/IAA与TIR/AFB互作的分子机制第36-37页
　　　　　　· AUX/IAA与ARF调控体系决定了植物发育的特异性第37-39页
　　　　　　· ABP1反馈调节AUX/IAA?第39-40页
　　　　3 生长素与棉花纤维发育研究进展第40-42页
　　　　本研究的目的意义第42-44页
第二部分 研究报告第44-100页
　　第三章 棉花GhIAA14的克隆与鉴定第44-68页
　　　　1 材料与方法第44-56页
　　　　　　· 实验材料第44-47页
　　　　　　　　· 植物材料第44-45页
　　　　　　　　· 菌株、质粒、试剂及引物第45页
　　　　　　　　· 常用溶液及培养基第45-46页
　　　　　　　　· RNA提取所用试剂配制第46-47页
　　　　　　· 实验方法第47-56页
　　　　　　　　· 总RNA的提取及纯化第47-48页
　　　　　　　　· mRNA反转录为cDNA第48-49页
　　　　　　　　· cDNA内标扩增检测第49页
　　　　　　　　· 目的基因的克隆及全长的获得第49-53页
　　　　　　　　· 序列分析第53-56页
　　　　2 结果与分析第56-65页
　　　　　　· 棉花胚珠总RNA的提取和反转录第56-57页
　　　　　　· GhIAA14基因全长的克隆第57-59页
　　　　　　· GhIAA14的生物信息学分析第59-64页
　　　　　　· GhIAA14定位于细胞核第64-65页
　　　　3 讨论第65-68页
　　第四章 棉花GhIAA14在组织中的时空表达特征分析第68-86页
　　　　1 材料与方法第68-78页
　　　　　　· 实验材料第68-70页
　　　　　　　　· 植物材料、菌株和质粒第68-69页
　　　　　　　　· 试剂及溶液第69-70页
　　　　　　· 实验方法第70-78页
　　　　　　　　· 实时荧光定量PCR分析第70-71页
　　　　　　　　· 构建体外转录载体第71-72页
　　　　　　　　· 植物材料的固定和包埋第72-73页
　　　　　　　　· RNA探针的地高辛标记第73-75页
　　　　　　　　· 载玻片处理与组织切片第75-76页
　　　　　　　　· 原位杂交与显色第76-78页
　　　　2 结果与分析第78-84页
　　　　　　· GhIAA14在TM-1的胚珠中高表达第78-80页
　　　　　　· GhIAA14体外转录载体的构建第80页
　　　　　　· 棉花胚珠石蜡切片的制作第80-81页
　　　　　　· RNA探针标记效率的控制第81页
　　　　　　· GhIAA14在胚珠表皮及纤维细胞中特异表达第81-84页
　　　　3 讨论第84-86页
　　第五章 棉花GhIAA14转拟南芥植株的获得及表型鉴定第86-100页
　　　　1 材料与方法第86-93页
　　　　　　· 实验材料第86-87页
　　　　　　　　· 菌株、质粒及试剂第86页
　　　　　　　　· 培养基和溶液第86-87页
　　　　　　　　· 烟草及拟南芥种子第87页
　　　　　　· 实验方法第87-93页
　　　　　　　　· 构建植物表达载体第87-89页
　　　　　　　　· 植物表达载体导入农杆菌及其鉴定第89-90页
　　　　　　　　· 农杆菌介导的烟草叶盘转化及GUS染色第90-91页
　　　　　　　　· 拟南芥的处理及培养第91页
　　　　　　　　· 拟南芥的遗传转化第91-92页
　　　　　　　　· 拟南芥转基因植株的筛选及表型观察第92-93页
　　　　2 结果与分析第93-98页
　　　　　　· GhIAA14植物表达载体的构建第93页
　　　　　　· GhIAA14植物表达载体活性的烟草转化验证第93-94页
　　　　　　· GhIAA14转基因拟南芥植株的获得第94-96页
　　　　　　· GhIAA14转基因拟南芥的表型观察第96-98页
　　　　3 讨论第98-100页
全文结论第100-102页
参考文献第102-116页
附录第116-118页
致谢第118 页

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