生物催化合成6,7-双甲氧四氢异喹啉类生物碱的研究 |
论文目录 | | 摘要 | 第1-7页 | ABSTRACT | 第7-8页 | 第一章 前言 | 第9-34页 | 1.1 手性胺简介 | 第9-11页 | 1.2 手性胺合成 | 第11-16页 | 1.2.1 化学不对称合成 | 第11-12页 | 1.2.2 酶不对称合成 | 第12-13页 | 1.2.3 金属催化不对称合成 | 第13-15页 | 1.2.4 酶动力学拆分 | 第15-16页 | 1.3 四氢异喹啉类生物碱 | 第16-24页 | 1.3.1 四氢异喹啉类生物碱的简介 | 第16-18页 | 1.3.2 四氢异喹啉衍生物的合成 | 第18-20页 | 1.3.3 光学纯的四氢异喹啉类化合物的制备 | 第20-24页 | 1.3.4 目标化合物的设计 | 第24页 | 1.4 亚胺还原酶的研究进展 | 第24-32页 | 1.4.1 亚胺还原酶的发现 | 第24-27页 | 1.4.2 亚胺还原酶的结构和催化机理 | 第27-30页 | 1.4.3 亚胺还原酶的拓展应用 | 第30-32页 | 1.5 亚胺还原酶的酶工程改造 | 第32页 | 1.6 本课题的研究目的及意义 | 第32-34页 | 第二章 实验材料和方法 | 第34-48页 | 2.1 实验材料 | 第34-40页 | 2.1.1 菌株 | 第34页 | 2.1.2 质粒 | 第34-35页 | 2.1.3 引物及其序列 | 第35-36页 | 2.1.4 培养基及缓冲液 | 第36-38页 | 2.1.5 生化试剂及测序 | 第38-39页 | 2.1.6 实验仪器及设备 | 第39-40页 | 2.2 实验方法 | 第40-48页 | 2.2.1 质粒DNA制备 | 第40页 | 2.2.2 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第40页 | 2.2.3 滚环PCR扩增条件及程序 | 第40-41页 | 2.2.4 蛋白的表达和纯化 | 第41-42页 | 2.2.5 定点饱和突变 | 第42页 | 2.2.6 生物催化反应 | 第42页 | 2.2.7 外消旋体的制备和分析方法 | 第42-44页 | 2.2.8 化合物的合成 | 第44-46页 | 2.2.9 酶活力测定 | 第46页 | 2.2.10 动力学常数测定 | 第46-47页 | 2.2.11 全细胞催化 | 第47-48页 | 第三章 亚胺还原酶不对称催化合成四氢异喹啉 | 第48-53页 | 3.1 已知亚胺还原酶现状 | 第48页 | 3.2 大位阻耐受的亚胺还原酶库建立 | 第48-51页 | 3.2.1 大位阻耐受的亚胺还原酶的挖掘 | 第48-50页 | 3.2.2 大位阻耐受的亚胺还原酶基因合成 | 第50页 | 3.2.3 大位阻耐受的亚胺还原酶筛选 | 第50-51页 | 3.3 二氢异喹啉底物及还原标品的合成 | 第51-52页 | 3.4 本章小结 | 第52-53页 | 第四章 大位阻耐受的亚胺还原酶的酶工程改造 | 第53-62页 | 4.1 设计思路及策略 | 第53页 | 4.2 亚胺还原酶结构分析及改造 | 第53-58页 | 4.2.1 同源建模与分子对接分析 | 第53-55页 | 4.2.2 活性位点氨基酸定点饱和突变 | 第55-58页 | 4.3 改造结果分析 | 第58-61页 | 4.3.1 突变体和野生株的反应结果比较 | 第58-60页 | 4.3.2 突变体和野生株的酶活比较 | 第60页 | 4.3.3 突变体和野生株的动力学数据比较 | 第60-61页 | 4.4 本章小结 | 第61-62页 | 第五章 总结与展望 | 第62-64页 | 附录Ⅰ 手性分析HPLC谱图 | 第64-72页 | 附录Ⅱ 动力学拟合曲线图 | 第72-78页 | 附录Ⅲ 核磁谱图 | 第78-83页 | 参考文献 | 第83-88页 | 致谢 | 第88页 |
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