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一种新型的NADH荧光探针
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一种新型的NADH荧光探针
论文目录
摘要
第1-6页
Abstract
第6-7页
目录
第7-11页
第1章 绪论
第11-41页
· 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NAD(H)性质及作用
第12-19页
· NAD(H)的理化性质
第12-13页
· 细胞中NAD~+/NADH的含量和状态
第13-14页
· NAD(H)的生物合成途径
第14-15页
· NAD(H)的生理作用
第15-19页
· 常用的NAD(H)分子检测方法
第19-26页
· 紫外分光光度法
第19页
· 电泳法
第19-20页
· 色谱法
第20-21页
· 酶法分析
第21-22页
· 质谱法
第22-23页
· 电化学法
第23-24页
· 荧光成像
第24-25页
· 构建新型NADH探针意义
第25-26页
· 荧光蛋白的性质及应用
第26-39页
· 荧光蛋白的研究进展
第26-28页
· 绿色荧光蛋白的结构
第28-32页
· 荧光蛋白的应用
第32-39页
· 展望
第39-41页
第2章 Perex重组质粒的构建及鉴定
第41-61页
· 材料
第41-43页
· 菌株与质粒
第41页
· 酶和试剂
第41页
· 主要实验仪器及设备
第41-42页
· 试剂配置
第42-43页
· 实验方法
第43-51页
· 实验流程
第43页
· Bacillus subtilis 168基因组提取
第43-44页
· 目的基因亚克隆
第44-46页
· 重组质粒的构建
第46-50页
· 重组质粒的鉴定
第50-51页
· 实验结果
第51-58页
· 目的基因ydiH及荧光蛋白基因YFP的扩增结果
第51页
· PCR产物回收与纯化
第51-52页
· SOE PCR扩增结果
第52页
· SOE PCR产物回收与纯化
第52页
· 目的片段亚克隆结果
第52-54页
· 完整的原核表达质粒构建结果
第54-55页
· 构建探针系列
第55-58页
· 分析与讨论
第58-61页
· 实验原理
第58页
· 重组质粒构建方案选择
第58-59页
· 构建方案的优化
第59页
· 筛选方案的选择
第59-61页
第3章 Perex蛋白的表达、纯化及性质的初步研究
第61-83页
· 材料
第61-64页
· 菌株及质粒
第61页
· 试剂
第61页
· 主要实验仪器及设备
第61-62页
· 试剂配置
第62-64页
· 实验方法
第64-69页
· 实验流程
第64-65页
· 不同表达条件评估
第65-66页
· 目的基因的表达
第66-67页
· 表达产物的获取
第67页
· 表达产物的纯化
第67-69页
· 表达产物的鉴定
第69页
· 表达产物的性质测定
第69页
· 实验结果
第69-76页
· 表达条件评估
第69-71页
· 表达产物获取
第71页
· 纯化方法建立
第71-73页
· 蛋白表达、纯化
第73-74页
· 探针光谱性质测定
第74-75页
· 探针结合性质测定
第75-76页
· 分析与讨论
第76-83页
· 实验原理
第76-78页
· 表达菌株的选择
第78页
· 不同表达条件的确定
第78页
· 蛋白纯化方法的建立
第78-79页
· 利用工具软件预测分析蛋白相关性质
第79-80页
· 探针性质的分析
第80-83页
第4章 Perex蛋白的突变体构建及鉴定
第83-96页
· 材料
第83-85页
· 菌株及质粒
第83页
· 酶和试剂
第83页
· 主要实验仪器及设备
第83页
· 试剂配置
第83-85页
· 实验方法
第85-88页
· 实验流程
第85-86页
· 突变文库建立
第86-88页
· 突变系列质粒双酶切
第88页
· 突变体质粒鉴定
第88页
· 实验结果
第88-92页
· 定点突变PCR扩增结果
第88-90页
· 双酶切结果
第90-91页
· 转化结果
第91-92页
· 突变体质粒鉴定结果
第92页
· 分析与讨论
第92-96页
· 实验原理
第92-93页
· 突变构建
第93-95页
· 筛选鉴定方法选择
第95-96页
第5章 Perex蛋白突变体的高通量筛选及性质的初步研究
第96-118页
· 材料
第96-100页
· 菌株和质粒
第96-97页
· 试剂
第97页
· 主要实验仪器及设备
第97-98页
· 试剂配置
第98-100页
· 实验方法
第100-103页
· 实验流程
第100页
· 目的基因的表达
第100页
· 表达产物的获取
第100-101页
· 表达产物的纯化
第101-102页
· 表达产物的鉴定
第102页
· 表达产物的性质测定
第102页
· 表达产物的高通量筛选
第102-103页
· 实验结果
第103-114页
· 高通量蛋白纯化结果
第103-104页
· 高通量筛选结果
第104-107页
· 不同的核苷酸对探针影响
第107-111页
· 不同pH下结合曲线
第111-112页
· 结合-响应时间曲线
第112-114页
· 分析与讨论
第114-118页
· 实验原理
第114页
· 高通量筛选结果
第114-115页
· 不同的核苷酸对探针影响
第115-116页
· pH对探针结合性质影响
第116-117页
· 探针的结合-响应时间
第117页
· 最优化探针
第117-118页
第6章 结论
第118-119页
参考文献
第119-132页
致谢
第132 页
本篇论文共
132
页,
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