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一种新型的NADH荧光探针

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一种新型的NADH荧光探针
论文目录
 
摘要第1-6页
Abstract第6-7页
目录第7-11页
第1章 绪论第11-41页
  · 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NAD(H)性质及作用第12-19页
    · NAD(H)的理化性质第12-13页
    · 细胞中NAD~+/NADH的含量和状态第13-14页
    · NAD(H)的生物合成途径第14-15页
    · NAD(H)的生理作用第15-19页
  · 常用的NAD(H)分子检测方法第19-26页
    · 紫外分光光度法第19页
    · 电泳法第19-20页
    · 色谱法第20-21页
    · 酶法分析第21-22页
    · 质谱法第22-23页
    · 电化学法第23-24页
    · 荧光成像第24-25页
    · 构建新型NADH探针意义第25-26页
  · 荧光蛋白的性质及应用第26-39页
    · 荧光蛋白的研究进展第26-28页
    · 绿色荧光蛋白的结构第28-32页
    · 荧光蛋白的应用第32-39页
  · 展望第39-41页
第2章 Perex重组质粒的构建及鉴定第41-61页
  · 材料第41-43页
    · 菌株与质粒第41页
    · 酶和试剂第41页
    · 主要实验仪器及设备第41-42页
    · 试剂配置第42-43页
  · 实验方法第43-51页
    · 实验流程第43页
    · Bacillus subtilis 168基因组提取第43-44页
    · 目的基因亚克隆第44-46页
    · 重组质粒的构建第46-50页
    · 重组质粒的鉴定第50-51页
  · 实验结果第51-58页
    · 目的基因ydiH及荧光蛋白基因YFP的扩增结果第51页
    · PCR产物回收与纯化第51-52页
    · SOE PCR扩增结果第52页
    · SOE PCR产物回收与纯化第52页
    · 目的片段亚克隆结果第52-54页
    · 完整的原核表达质粒构建结果第54-55页
    · 构建探针系列第55-58页
  · 分析与讨论第58-61页
    · 实验原理第58页
    · 重组质粒构建方案选择第58-59页
    · 构建方案的优化第59页
    · 筛选方案的选择第59-61页
第3章 Perex蛋白的表达、纯化及性质的初步研究第61-83页
  · 材料第61-64页
    · 菌株及质粒第61页
    · 试剂第61页
    · 主要实验仪器及设备第61-62页
    · 试剂配置第62-64页
  · 实验方法第64-69页
    · 实验流程第64-65页
    · 不同表达条件评估第65-66页
    · 目的基因的表达第66-67页
    · 表达产物的获取第67页
    · 表达产物的纯化第67-69页
    · 表达产物的鉴定第69页
    · 表达产物的性质测定第69页
  · 实验结果第69-76页
    · 表达条件评估第69-71页
    · 表达产物获取第71页
    · 纯化方法建立第71-73页
    · 蛋白表达、纯化第73-74页
    · 探针光谱性质测定第74-75页
    · 探针结合性质测定第75-76页
  · 分析与讨论第76-83页
    · 实验原理第76-78页
    · 表达菌株的选择第78页
    · 不同表达条件的确定第78页
    · 蛋白纯化方法的建立第78-79页
    · 利用工具软件预测分析蛋白相关性质第79-80页
    · 探针性质的分析第80-83页
第4章 Perex蛋白的突变体构建及鉴定第83-96页
  · 材料第83-85页
    · 菌株及质粒第83页
    · 酶和试剂第83页
    · 主要实验仪器及设备第83页
    · 试剂配置第83-85页
  · 实验方法第85-88页
    · 实验流程第85-86页
    · 突变文库建立第86-88页
    · 突变系列质粒双酶切第88页
    · 突变体质粒鉴定第88页
  · 实验结果第88-92页
    · 定点突变PCR扩增结果第88-90页
    · 双酶切结果第90-91页
    · 转化结果第91-92页
    · 突变体质粒鉴定结果第92页
  · 分析与讨论第92-96页
    · 实验原理第92-93页
    · 突变构建第93-95页
    · 筛选鉴定方法选择第95-96页
第5章 Perex蛋白突变体的高通量筛选及性质的初步研究第96-118页
  · 材料第96-100页
    · 菌株和质粒第96-97页
    · 试剂第97页
    · 主要实验仪器及设备第97-98页
    · 试剂配置第98-100页
  · 实验方法第100-103页
    · 实验流程第100页
    · 目的基因的表达第100页
    · 表达产物的获取第100-101页
    · 表达产物的纯化第101-102页
    · 表达产物的鉴定第102页
    · 表达产物的性质测定第102页
    · 表达产物的高通量筛选第102-103页
  · 实验结果第103-114页
    · 高通量蛋白纯化结果第103-104页
    · 高通量筛选结果第104-107页
    · 不同的核苷酸对探针影响第107-111页
    · 不同pH下结合曲线第111-112页
    · 结合-响应时间曲线第112-114页
  · 分析与讨论第114-118页
    · 实验原理第114页
    · 高通量筛选结果第114-115页
    · 不同的核苷酸对探针影响第115-116页
    · pH对探针结合性质影响第116-117页
    · 探针的结合-响应时间第117页
    · 最优化探针第117-118页
第6章 结论第118-119页
参考文献第119-132页
致谢第132 页

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