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SRSF1在GT1-7细胞模型中参与性发育相关基因转录后调控机制的研究
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SRSF1在GT1-7细胞模型中参与性发育相关基因转录后调控机制的研究
论文目录
 
摘要第1-7页
abstract第7-13页
第1章 绪论第13-25页
　　1.1 性发育的概述第13-15页
　　　　1.1.1 性发育第13页
　　　　1.1.2 性发育分子机制的研究进展第13-15页
　　1.2 SRSF1的概述第15-19页
　　　　1.2.1 SRSF1蛋白的结构特征第15-16页
　　　　1.2.2 SRSF1主要的分子功能第16-18页
　　　　1.2.3 SRSF1参与的生理病理过程第18-19页
　　1.3 高通量筛选技术——iTRAQ第19-20页
　　1.4 转录组测序——RNA-seq第20-21页
　　1.5 GT1-7细胞的概述第21页
　　1.6 立题背景第21-22页
　　　　1.6.1 SRSF1与性发育第21-22页
　　　　1.6.2 PGT1-7细胞模型的构建第22页
　　1.7 研究的内容第22-24页
　　　　1.7.1 构建敲低SRSF1的稳转株第23页
　　　　1.7.2 稳转株的RNA-seq第23-24页
　　　　1.7.3 稳转株的iTRAQ第24页
　　　　1.7.4 Real-timePCR验证实验结果第24页
　　1.8 研究的意义第24-25页
第2章 材料和方法第25-44页
　　2.1 材料第25-28页
　　　　2.1.1 细胞株第25页
　　　　2.1.2 实验仪器第25-26页
　　　　2.1.3 实验试剂第26-27页
　　　　2.1.4 常用试剂的配制方法及储存第27-28页
　　　　2.1.5 实验所用的计算机软件第28页
　　2.2 实验方法第28-44页
　　　　2.2.1 细胞培养第28-30页
　　　　2.2.2 稳转株的构建第30-31页
　　　　2.2.3 Real-timePCR检测稳转株中SRSF1的表达量第31-35页
　　　　2.2.4 Westernblot检测SRSF1的表达第35-37页
　　　　2.2.5 检测稳转株中性发育相关基因的表达情况第37页
　　　　2.2.6 MTT检测第37页
　　　　2.2.7 转录组分析——RNA-seq第37-39页
　　　　2.2.8 蛋白组学分析——iTRAQ第39-41页
　　　　2.2.9 数据分析第41-44页
第3章 结果与分析第44-74页
　　3.1 慢病毒介导shRNA稳转GT1-7细胞系的构建第44-45页
　　　　3.1.1 慢病毒最适MOI第44-45页
　　　　3.1.2 慢病毒介导shRNA稳转GT1-7细胞的获得第45页
　　3.2 慢病毒介导shRNA稳转GT1-7细胞的验证第45-48页
　　　　3.2.1 SRSF1mRNA水平的验证第45-46页
　　　　3.2.2 SRSF1蛋白质水平的验证第46页
　　　　3.2.3 性发育相关基因的检测第46-47页
　　　　3.2.4 稳转株活力测定第47-48页
　　3.3 转录组分析的结果第48-55页
　　　　3.3.1 差异表达基因的筛选第48-49页
　　　　3.3.2 差异基因的GO分析第49-54页
　　　　3.3.3 差异基因的KEGGpathway分析第54-55页
　　3.4 蛋白组学iTRAQ的结果分析第55-71页
　　　　3.4.1 差异表达的蛋白质第55-66页
　　　　3.4.2 差异蛋白的IPA分析第66-71页
　　3.5 Real-timePCR验证实验结果第71-74页
第4章 讨论第74-77页
　　4.1 慢病毒介导shRNA构建稳转株第74-75页
　　　　4.1.1 稳转株的构建及检测第74页
　　　　4.1.2 慢病毒介导shRNA的干扰效率第74-75页
　　4.2 RNA-seq的结果分析第75页
　　4.3 iTRAQ结果分析第75-77页
第5章 结论和展望第77-79页
　　5.1 结论第77页
　　5.2 展望第77-79页
参考文献第79-89页
课题来源第89-90页
学术论文第90-91页
致谢第91页

本篇论文共91页，点击这进入下载页面。
 
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