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新型断裂蛋白质内含子介导的蛋白质内部位点特异性标记

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新型断裂蛋白质内含子介导的蛋白质内部位点特异性标记
论文目录
 
摘要第1-6页
abstract第6-10页
符号说明第10-11页
第一章 绪论第11-28页
  1.1 引言第11-12页
  1.2 蛋白质内含子第12-26页
    1.2.1 蛋白质内含子的发现第12-13页
    1.2.2 蛋白质内含子的分类第13-15页
    1.2.3 蛋白质内含子结构第15-16页
    1.2.4 蛋白质的剪接机理第16-20页
    1.2.5 蛋白质内含子的应用第20-26页
    1.2.6 总结第26页
  1.3 本课题的内容、目的和意义第26-28页
    1.3.1 本课题内容第26页
    1.3.2 本课题的目的和意义第26-28页
第二章 实验材料、仪器和方法第28-40页
  2.1 实验材料第28-34页
    2.1.1 菌株和质粒第28-29页
    2.1.2 中间小肽第29页
    2.1.3 试剂第29-30页
    2.1.4 主要仪器第30-31页
    2.1.5 试剂的配制第31-34页
  2.2 实验技术第34-39页
    2.2.1 化学转化第34页
    2.2.2 PCR第34-35页
    2.2.3 PCR产物纯化第35页
    2.2.4 去模板和磷酸化第35页
    2.2.5 产物连接第35-36页
    2.2.6 质粒抽提第36页
    2.2.7 蛋白纯化第36-37页
    2.2.8 蛋白质凝胶电泳第37-38页
    2.2.9 WesternBlot第38-39页
  2.3 实验设计方案第39-40页
第三章 实验过程第40-47页
  3.1 前体蛋白的表达第40-42页
    3.1.1 准备表达菌种第40页
    3.1.2 前体蛋白的诱导和表达第40-41页
    3.1.3 N端前体蛋白的纯化第41页
    3.1.4 中间前体蛋白和C端前体蛋白的纯化第41-42页
    3.1.5 SDS-PAGE检测前体蛋白的表达第42页
  3.2 筛选高效剪接组合第42-43页
  3.3 改造中间前体蛋白第43-45页
  3.4 对改造后的中间前体蛋白表达第45页
  3.5 筛选改造后的中间前体蛋白第45页
  3.6 标记目标蛋白第45-46页
  3.7 鉴定标记结果第46-47页
第四章 结果与分析第47-68页
  4.1 筛选高效组合第47-58页
    4.1.1 SGS11与RBS1组合第48-49页
    4.1.2 SGS11与SXS1组合第49-50页
    4.1.3 SGS11与TXS1组合第50-51页
    4.1.4 SXS11与RBS1组合第51-52页
    4.1.5 SXS11与SGS1组合第52-53页
    4.1.6 SXS11与TXS1组合第53-54页
    4.1.7 TE3S11与SGS1组合第54-55页
    4.1.8 TE3S11与SXS1组合第55-56页
    4.1.9 TE3S11与TXS1组合第56-57页
    4.1.10 TE3S11与RBS1组合第57-58页
  4.2 构建中间前体蛋白改造质粒(TE3S11、RBS1组合)第58-59页
  4.3 筛选最佳中间前体蛋白第59-65页
    4.3.1 HS-TE3S11C-CFKSG-RBS1N蛋白的鉴定第59-60页
    4.3.2 HS-TE3S11C-CFKG-RBS1N蛋白的鉴定第60-61页
    4.3.3 HS-TE3S11C-CKSG-RBS1N蛋白的鉴定第61页
    4.3.4 HS-TE3S11C-CKG-RBS1N蛋白的鉴定第61-62页
    4.3.5 HS-TE3S11C-CK-RBS1N蛋白的鉴定第62-63页
    4.3.6 HS-TE3S11C-SFK-RBS1N蛋白的鉴定第63-64页
    4.3.7 HS-TE3S11C-SK-RBS1N蛋白的鉴定第64-65页
  4.4 对MBP和Trx标记FITC第65-68页
    4.4.1 WesternBlot和荧光扫描鉴定结果第65-66页
    4.4.2 LC-MS液质联用质谱鉴定第66-68页
第五章 分析与展望第68-70页
  5.1 分析讨论第68-69页
  5.2 展望第69-70页
参考文献第70-74页
硕士期间参加科研情况说明第74-75页
参与的科研项目第74-75页
致谢第75页

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