论文目录 | |
摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-13页 |
第一章 绪论 | 第13-39页 |
1.1 引言 | 第13页 |
1.2 左乙拉西坦 | 第13-18页 |
1.2.1 左乙拉西坦的性质 | 第14页 |
1.2.2 左乙拉西坦的合成 | 第14-18页 |
1.2.2.1 传统的对映体拆分法 | 第15页 |
1.2.2.2 不对称氢化法 | 第15-16页 |
1.2.2.3 色谱分离法 | 第16页 |
1.2.2.4 以手性化合物为原料的环合法 | 第16-18页 |
1.3 腈水合酶 | 第18-22页 |
1.3.1 腈水合酶的来源及性质 | 第19-22页 |
1.3.2 腈水合酶的催化机理 | 第22页 |
1.4 酰胺酶 | 第22-31页 |
1.4.1 酰胺酶的来源与性质 | 第23-26页 |
1.4.2 酰胺酶催化反应的作用机理 | 第26页 |
1.4.3 酰胺酶的立体选择性 | 第26-31页 |
1.5 本文要研究的内容 | 第31-32页 |
参考文献 | 第32-39页 |
第二章 Rhodococcus boritolerans FW815静息细胞催化2-(2-氧代-1-吡咯烷)丁腈反应条件的研究 | 第39-54页 |
2.1 引言 | 第39页 |
2.2 材料与方法 | 第39-43页 |
2.2.1 菌株 | 第39页 |
2.2.2 化学试剂与主要仪器 | 第39-40页 |
2.2.3 培养基 | 第40页 |
2.2.4 细胞培养条件 | 第40页 |
2.2.5 静息细胞转化 | 第40页 |
2.2.6 反应体系pH的影响 | 第40-41页 |
2.2.7 反应温度的影响 | 第41页 |
2.2.8 底物浓度的影响 | 第41页 |
2.2.9 产物浓度的影响 | 第41页 |
2.2.10 添加金属离子的影响 | 第41页 |
2.2.11 有机溶剂的影响 | 第41页 |
2.2.12 使用批次实验 | 第41页 |
2.2.13 分析方法的建立与酶活定义 | 第41-43页 |
2.3 结果与讨论 | 第43-52页 |
2.3.1 反应体系pH的影响 | 第43-44页 |
2.3.2 温度对酶活的影响 | 第44-45页 |
2.3.3 腈水合酶热稳定性试验 | 第45-46页 |
2.3.4 有机溶剂对酶活的影响 | 第46-47页 |
2.3.5 金属离子对酶活的影响 | 第47-48页 |
2.3.6 底物浓度的影响 | 第48-49页 |
2.3.7 产物浓度的影响 | 第49-50页 |
2.3.8 使用批次稳定性试验 | 第50-51页 |
2.3.9 反应动力学研究 | 第51-52页 |
2.4 本章小节 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-54页 |
第三章 R-酰胺酶产生菌的筛选鉴定及其特性研究 | 第54-71页 |
3.1 引言 | 第54-55页 |
3.2 材料与方法 | 第55-60页 |
3.2.1 土样 | 第55页 |
3.2.2 化学试剂与主要仪器 | 第55-56页 |
3.2.3 培养基 | 第56页 |
3.2.4 菌种筛选 | 第56-58页 |
3.2.4.1 富集培养 | 第56页 |
3.2.4.2 显色法初筛 | 第56-57页 |
3.2.4.3 菌种复筛 | 第57-58页 |
3.2.5 菌种鉴定 | 第58-59页 |
3.2.5.1 菌落形态及生理生化试验 | 第58页 |
3.2.5.2 基因组提取 | 第58页 |
3.2.5.3 16S rDNA序列扩增 | 第58-59页 |
3.2.5.4 系统发育学分析 | 第59页 |
3.2.6 热稳定性试验 | 第59页 |
3.2.7 尿素抑制试验 | 第59-60页 |
3.3 结果与讨论 | 第60-68页 |
3.3.1 菌株的筛选 | 第60-61页 |
3.3.2 菌株鉴定 | 第61-66页 |
3.3.2.1 形态特征及生理生化特征 | 第61-63页 |
3.3.2.2 16S rDNA序列测序结果分析及系统发育分析 | 第63-66页 |
3.3.3 立体选择性催化外消旋2-(2氧代吡咯烷)-丁酰胺 | 第66页 |
3.3.4 酰胺酶的热稳定性 | 第66-67页 |
3.3.5 尿素对该酰胺酶的抑制 | 第67-68页 |
3.4 本章小结 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-71页 |
第四章 R-酰胺酶产生菌Mycobacterium diernhoferi ZJB-09227培养条件的优化 | 第71-87页 |
4.1 引言 | 第71-72页 |
4.2 材料与方法 | 第72-73页 |
4.2.1 菌种 | 第72页 |
4.2.2 培养基 | 第72页 |
4.2.3 菌体培养 | 第72页 |
4.2.4 菌体制备 | 第72页 |
4.2.5 生物量测定 | 第72页 |
4.2.6 静息细胞转化 | 第72-73页 |
4.2.7 主要仪器与试剂 | 第73页 |
4.2.8 酶活定义 | 第73页 |
4.2.9 分析方法 | 第73页 |
4.3 结果与讨论 | 第73-85页 |
4.3.1 发酵培养基组分的优化 | 第73-80页 |
4.3.1.1 碳源的筛选 | 第73-74页 |
4.3.1.2 碳源浓度的影响 | 第74-75页 |
4.3.1.3 氮源的筛选 | 第75-76页 |
4.3.1.4 氮源浓度的确定 | 第76-77页 |
4.3.1.5 诱导剂的影响 | 第77-78页 |
4.3.1.6 诱导剂浓度的确定 | 第78页 |
4.3.1.7 添加金属离子对M. diernhoferi ZJB-09227生长和产酶的影响 | 第78-79页 |
4.3.1.8 培养基正交实验 | 第79-80页 |
4.3.2 其他培养条件对菌体生长和产酶的影响 | 第80-84页 |
4.3.2.1 初始pH对菌体生长和产酶的影响 | 第80-81页 |
4.3.2.2 培养温度的影响 | 第81-82页 |
4.3.2.3 接种量的影响 | 第82-83页 |
4.3.2.4 装液量的影响 | 第83-84页 |
4.3.3 菌体生长及产酶曲线 | 第84-85页 |
4.4 本章小结 | 第85-86页 |
参考文献 | 第86-87页 |
第五章 M. diernhoferi ZJB-09227拆分2-(2氧代吡咯烷)丁酰胺反应条件的研究 | 第87-101页 |
5.1 引言 | 第87页 |
5.2 材料与方法 | 第87-90页 |
5.2.1 菌种与培养基 | 第87-88页 |
5.2.2 细胞培养 | 第88页 |
5.2.3 主要仪器与试剂 | 第88页 |
5.2.4 静息细胞转化 | 第88页 |
5.2.5 反应体系pH的影响 | 第88页 |
5.2.6 转化温度的影响 | 第88-89页 |
5.2.7 菌体浓度的影响 | 第89页 |
5.2.8 添加金属离子的影响 | 第89页 |
5.2.9 共溶剂的影响 | 第89页 |
5.2.10 分析方法 | 第89-90页 |
5.3 结果与讨论 | 第90-99页 |
5.3.1 反应体系pH的影响 | 第90-91页 |
5.3.2 反应温度的影响 | 第91-93页 |
5.3.3 菌体浓度对催化过程的影响 | 第93-94页 |
5.3.4 金属离子对酶催化活性的影响 | 第94-95页 |
5.3.5 共溶剂的影响 | 第95-96页 |
5.3.6 底物浓度对酶活的影响 | 第96-97页 |
5.3.7 产物的影响 | 第97-98页 |
5.3.8 酶促反应动力学研究 | 第98-99页 |
5.4 本章小结 | 第99-100页 |
参考文献 | 第100-101页 |
第六章 结论与展望 | 第101-103页 |
6.1 结论 | 第101-102页 |
6.2 展望 | 第102-103页 |
附录 | 第103-104页 |
攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第104-105页 |
致谢 | 第105页 |