论文目录 | |
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-23页 |
| 1.1 乳酸菌的研究进展 | 第11-14页 |
| 1.1.1 乳酸菌的特性 | 第11页 |
| 1.1.2 乳酸菌益生功能 | 第11-13页 |
| 1.1.3 乳酸菌的应用 | 第13-14页 |
| 1.2 乳酸菌S-层蛋白研究进展 | 第14-18页 |
| 1.2.1 S-层蛋白基本特征 | 第14-15页 |
| 1.2.2 S-层蛋白的提取纯化 | 第15-16页 |
| 1.2.3 S-层蛋白的功能 | 第16-17页 |
| 1.2.4 乳酸菌S-层蛋白应用 | 第17-18页 |
| 1.3 巨噬细胞免疫功能的研究进展 | 第18-21页 |
| 1.3.1 巨噬细胞与其极化 | 第18页 |
| 1.3.2 巨噬细胞免疫应答信号通路 | 第18-20页 |
| 1.3.3 乳酸菌与巨噬细胞研究进展 | 第20-21页 |
| 1.4 本课题研究意义、目的与研究内容 | 第21-23页 |
| 1.4.1 研究意义与目的 | 第21-22页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第22-23页 |
| 第2章 嗜酸乳杆菌S-层蛋白对巨噬细胞TNF-α、IL-10 mRNA表达的影响 | 第23-33页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第23-25页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-27页 |
| 2.2.1 S-层蛋白提取 | 第25页 |
| 2.2.2 S-层蛋白分离纯化及纯化效果分析 | 第25页 |
| 2.2.3 巨噬细胞的培养与分组 | 第25页 |
| 2.2.4 嗜酸乳杆菌S-层蛋白对巨噬细胞TNF-α及IL-I0的mRNA表达的影响 | 第25-27页 |
| 2.2.5 结果分析 | 第27页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第27-32页 |
| 2.3.1 S-层蛋白纯化效果 | 第27-28页 |
| 2.3.2 RAW264.7巨噬细胞生长状态 | 第28-29页 |
| 2.3.3 细胞RNA提取及qPCR扩增特异性效果 | 第29-30页 |
| 2.3.4 S-层蛋白对刺激巨噬细胞的TNF-α、 IL-10 mRNA表达量的影响 | 第30-32页 |
| 2.4 本章小结 | 第32-33页 |
| 第3章 嗜酸乳杆菌S-层蛋白对小鼠巨噬细胞信号分子NF-κB和ERK以及AP-1影响 | 第33-50页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第33-34页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第33-34页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第34页 |
| 3.2 实验方法 | 第34-38页 |
| 3.2.1 巨噬细胞的培养与分组 | 第34-35页 |
| 3.2.2 荧光显微镜观察巨噬细胞NF-κB核移位 | 第35页 |
| 3.2.3 Western Blot测定巨噬细胞磷酸化ERK1/2和IκBα蛋白的表达水平 | 第35-36页 |
| 3.2.4 凝胶电泳迁移分析(EMSA) NF-κB及AP-1的DNA结合活性 | 第36-37页 |
| 3.2.5 数据统计分析 | 第37-38页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第38-48页 |
| 3.3.1 巨噬细胞NF-κB核移位观察结果 | 第38-39页 |
| 3.3.2 巨噬细胞内IκBα蛋白表达的检测结果 | 第39-41页 |
| 3.3.3 巨噬细胞内磷酸化ERK1/2蛋白表达的检测结果 | 第41-45页 |
| 3.3.4 巨噬细胞中NF-κB的DNA结合活性的检测结果 | 第45-46页 |
| 3.3.5 巨噬细胞中AP-1的DNA结合活性的检测结果 | 第46-48页 |
| 3.4 本章小结 | 第48-50页 |
| 第4章 S-层蛋白激活巨噬细胞的iTRAQ蛋白组学分析 | 第50-61页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第50-51页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第50-51页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第51页 |
| 4.2 实验方法 | 第51-54页 |
| 4.2.1 实验分组 | 第51页 |
| 4.2.2 样品制备 | 第51-52页 |
| 4.2.3 蛋白定量 | 第52页 |
| 4.2.4 SDS-PAGE电泳样品检测实验 | 第52页 |
| 4.2.5 蛋白还原烷基化、酶解及标记 | 第52-53页 |
| 4.2.7 2D-LC-MSMS分析 | 第53-54页 |
| 4.2.8 生物信息学分析 | 第54页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第54-60页 |
| 4.3.1 iTRAQ鉴定蛋白统计 | 第54-55页 |
| 4.3.2 S-层蛋白刺激巨噬细胞中差异蛋白生物信息功能分析 | 第55-57页 |
| 4.3.3 S-层蛋白刺激巨噬细胞中KEGG信号途径分析 | 第57-60页 |
| 4.4 本章小结 | 第60-61页 |
| 全文结论 | 第61-62页 |
| 论文创新性 | 第61页 |
| 项目基金来源 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
