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NYD-SP27基因干扰对绵羊体外受精效率的影响

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NYD-SP27基因干扰对绵羊体外受精效率的影响
论文目录
 
中文摘要第1-7页
Abstract第7-12页
论文中常用缩写词英汉对照表第12-13页
第一章 文献综述第13-28页
1 哺乳动物体外受精研究历史第13页
2 卵母细胞的体外成熟第13-14页
  2.1 卵母细胞成熟的特征第13-14页
    2.1.1 生发泡破裂和染色体凝集第13页
    2.1.2 极体的排出,透明带软化第13-14页
    2.1.3 卵丘细胞扩展第14页
  2.2 细胞质成熟与卵母细胞成熟第14页
3 影响卵母细胞体外成熟的因素第14-21页
  3.1 卵母细胞类型及存储条件第14-16页
    3.1.1 生化因子第14-15页
    3.1.2 卵母细胞成熟抑制因子第15-16页
  3.2 培养条件第16-19页
    3.2.1 培养时间和温度第16页
    3.2.2 气相第16页
    3.2.3 静置或摇动培养系统第16-17页
    3.2.4 培养基和血清第17页
    3.2.5 激素第17-19页
  3.3 其他添加物第19-21页
    3.3.1 卵泡液第19页
    3.3.2 颗粒细胞第19-20页
    3.3.3 细胞生长因子第20-21页
4 精子的体外获能与体外受精第21-24页
  4.1 精子体外获能机制第21页
  4.2 影响精子体外获能的因素第21-22页
  4.3 精子体外获能方法第22-24页
    4.3.1 精子洗涤方法第22-23页
    4.3.2 体外受精第23-24页
      4.3.2.1 授精前卵母细胞的处理第23页
      4.3.2.2 提高精子活力的措施第23-24页
5 早期胚胎培养系统第24-25页
  5.1 早期胚胎体外培养系统第24页
  5.2 影响早期胚胎体外发育的因素与胚胎体外培养系统的改进第24-25页
    5.2.1 胚胎体外培养系统的改进第25页
6 NYD-SP27基因的研究进展第25-28页
  6.1 NYD-SP27基因的发现第25-26页
  6.2 NYD-SP27基因的研究进展第26-28页
第二章 实验研究第28-47页
实验一 新疆哈萨克羊NYD-SP27基因的克隆及序列分析第28-36页
1 材料与方法第28-31页
  1.1 实验材料第28-29页
    1.1.1 菌株、载体及动物组织第28-29页
    1.1.2 主要试剂第29页
    1.1.3 主要仪器和设备第29页
  1.2 主要方法第29-31页
    1.2.1 引物设计与合成第29-30页
    1.2.2 总RNA的提取第30页
    1.2.3 cDNA制备第30页
    1.2.4 哈萨克羊NYD-SP27的PCR扩增和纯化第30-31页
      1.2.4.1 目标基因的扩增第30页
      1.2.4.2 目标基因的纯化及末端加A第30-31页
      1.2.4.3 琼脂糖凝胶电泳检测第31页
    1.2.5 PCR产物的克隆与鉴定第31页
    1.2.6 序列测定及分析第31页
  1.3 序列测定及分析第31页
2 实验结果第31-35页
  2.1 总RNA的分离第31-32页
  2.2 哈萨克羊NYD-SP27基因编码区的克隆结果第32页
  2.3 哈萨克羊NYD-SP27基因序列分析结果第32-35页
3 讨论第35-36页
实验二 绵羊NYD-SP27干扰载体对绵羊体外受精效率的影响第36-47页
1 材料与方法第36-40页
  1.1 实验材料第36-37页
    1.1.1 实验材料来源第36页
    1.1.2 主要试剂第36-37页
    1.1.3 主要仪器第37页
    1.1.4 试剂配置第37页
  1.2 主要实验方法与步骤第37-40页
    1.2.1 卵巢卵母细胞的采集第37页
    1.2.2 卵母细胞的成熟培养第37-38页
    1.2.3 大提质粒第38-39页
    1.2.4 双侧睾丸质粒注射第39页
    1.2.5 精液采集第39-40页
    1.2.6 睾丸组织中目标基因表达量变化的半定量PCR检测第40页
    1.2.7 体外受精第40页
    1.2.8 受精卵发育培养第40页
  1.3 数据处理分析第40页
2 试验结果第40-44页
  2.1 不同卵母细胞采集方法对卵母细胞质量和数量的影响第40-41页
  2.2 不同来源血清和激素对卵母细胞成熟率的影响第41页
  2.3 睾丸组织NYD-SP27基因表达量的PCR验证第41-42页
  2.4 精子荧光显微镜下的检测第42页
  2.5 NYD-SP27基因对绵羊精液品质的的影响第42-43页
  2.6 NYD-SP27基因对绵羊体外受精率的影响第43页
  2.7 NYD-SP27基因对绵羊早期发育率的影响第43-44页
3 讨论第44-47页
  3.1 不同卵母细胞采集方法对卵母细胞利用效率的影响第44页
  3.2 成熟液中添加不同种类激素和血清对卵母细胞成熟率的影响第44-45页
  3.3 NYD-SP27基因绵羊精液品质、体外受精和桑椹胚发育的影响第45-47页
全文总结第47-48页
创新点第48-49页
参考文献第49-57页
致谢第57-58页
作者简介第58-59页
导师评阅表第59页

本篇论文共59页,点击这进入下载页面
 
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