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棉花GhMAPKK6基因的分离及其功能分析
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棉花GhMAPKK6基因的分离及其功能分析
论文目录
中文摘要
第1-11页
Abstract
第11-13页
1 前言
第13-24页
· MAPK级联途径
第13-15页
· MAPK级联组分的结构特点和分类
第15-17页
· 植物中的MAPK级联途径的作用
第17-23页
· MAPK级联系统与非生物胁迫
第17-19页
· MAPK级联系统与植物病害
第19-21页
· MAPK级联系统与激素信号
第21-22页
· MAPK级联系统与植物的生长发育
第22-23页
· 本研究的目的及意义
第23-24页
2 材料与方法
第24-45页
· 实验材料
第24-26页
· 植物材料
第24页
· 菌株与质粒
第24页
· 酶与各种生化试剂
第24页
· PCR引物
第24-26页
· 实验方法
第26-45页
· 棉花的培养与处理
第26页
· 植物总RNA的提取
第26-27页
· RNA中基因组DNA的去除
第27页
· cDNA第一链的合成
第27-28页
· cDNA纯化
第28页
· cDNA的末端加尾反应
第28页
· 植物基因组DNA的提取
第28-30页
· CTAB法提取棉花基因组DNA
第28-29页
· 棉花基因组DNA的纯化
第29页
· 小量法提取烟草基因组DNA
第29-30页
· 琼脂糖凝胶电泳基因片段的回收
第30页
· 目的片段与克隆载体的连接
第30-31页
· 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化
第31页
· 大肠杆菌感受态细胞的制备
第31页
· 大肠杆菌感受态细胞的转化
第31页
· 大肠杆菌质粒DNA的提取
第31-32页
· 对重组质粒的酶切鉴定
第32页
· DNA序列测定
第32页
· cDNA全长序列的获得
第32-35页
· 利用简并引物进行PCR扩增以获得中间片段
第32-33页
· 5'RACE获得5'端序列
第33-34页
· 3'RACE获得3'端序列
第34-35页
· cDNA全长序列的获得
第35页
· 全长基因组序列的获得
第35-36页
· 基因枪基因瞬时表达
第36-38页
· 洋葱表皮瞬时表达的载体制备
第36-37页
· 基因枪微弹的准备
第37页
· 基因枪转化
第37-38页
· 植物表达载体的构建与转化
第38-40页
· 植物表达载体的构建
第38页
· 农杆菌感受态细胞的制备
第38-39页
· 农杆菌感受态细胞的转化
第39页
· 农杆菌的培养
第39页
· 农杆菌介导转化烟草
第39-40页
· 转基因植株的抗病性分析
第40-41页
· 病原菌培养基的配制
第40页
· 病原菌的培养
第40页
· 病原物接种实验
第40-41页
· 生理指标的测定
第41-44页
· SOD酶活测定
第41-42页
· 过氧化物酶POD酶活测定
第42页
· 过氧化氢酶CAT酶活测定
第42页
· 游离脯氨酸的测定
第42-43页
· 可溶性糖含量的测定
第43页
· 植物组织叶绿素含量的的测定
第43-44页
· 网络资源及数据库
第44页
· 生物学软件
第44-45页
3 结果与分析
第45-64页
· 棉花GhMKK6基因的分离和启动子的克隆
第45-47页
· GhMKK6中间片段的分离
第45页
· GhMKK63'片段和5'片段的分离
第45页
· GhMKK6全长cDNA的分离
第45-46页
· GhMKK6基因组序列的分离
第46页
· GhMKK6启动子序列的分离
第46-47页
· GhMKK6的序列分析
第47-52页
· GhMKK6的全长cDNA序列分析
第47-48页
· GhMKK6编码的蛋白序列分析
第48-50页
· GhMKK6基因组序列分析
第50-51页
· GhMKK6的启动子序列分析
第51-52页
· GhMKK6的亚细胞定位分析
第52页
· GhMKK6的表达特性分析
第52-56页
· GhMKK6在不同组织部位中的表达特性
第52-53页
· GhMKK6响应信号分子的表达模式
第53-54页
· GhMKK6响应非生物胁迫的表达模式
第54-55页
· GhMKK6响应生物胁迫的表达模式
第55-56页
· 超表达GhMKK6烟草的获得与鉴定
第56-64页
· 植物表达载体的构建
第56页
· 超表达GhMKK6转基因烟草的获得与鉴定
第56页
· 超表达GhMKK6的转基因烟草的功能分析
第56-64页
· 超表达GhMKK6烟草对非生物胁迫的抗性分析
第56-61页
· 超表达GhMKK6的烟草对生物胁迫的抗性分析
第61-64页
4 讨论
第64-68页
5 小结
第68-69页
参考文献
第69-81页
致谢
第81-82页
攻读学位期间发表的主要学术论文
第82 页
本篇论文共
82
页,
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