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棉花GhWRKY44基因的分离及其功能分析

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棉花GhWRKY44基因的分离及其功能分析
论文目录
 
符号说明第1-9页
中文摘要第9-11页
Abstract第11-13页
1 前言第13-23页
  · 转录因子第13页
  · WRKY转录因子的发现第13-14页
  · WRKY转录因子结构与分类第14-16页
  · WRKY转录因子起源与分子进化第16-17页
  · WRKY转录因子生物学功能第17-20页
    · WRKY转录因子调控植物生物胁迫应答反应第17-19页
    · WRKY转录因子调控植物非生物胁迫应答反应第19页
    · WRKY转录因子在植物生长发育和物质代谢过程中的作用第19-20页
  · WRKY转录因子调控植物逆境反应的机理第20-22页
  · 本实验的目的意义第22-23页
2 材料与方法第23-46页
  · 实验材料第23-24页
    · 植物材料第23页
    · 菌株与质粒第23页
    · 酶与各种生化试剂第23页
    · 引物第23-24页
  · 实验方法第24-46页
    · 植物材料的培养与处理第24-25页
    · 植物总RNA的提取第25-26页
      · 利用Trizol Kit提取总RNA第25页
      · 利用CTAB法提取总RNA第25-26页
    · 植物基因组的提取第26-27页
      · CTAB法提取基因组DNA第26-27页
      · 小量法提取基因组DNA第27页
    · cDNA第一链的合成第27页
    · cDNA的纯化第27-28页
    · cDNA的5'末端加尾第28页
    · PCR扩增目的片段的回收第28-29页
    · 目的片段与克隆载体的连接第29页
    · 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第29-30页
      · 大肠杆菌感受态细胞的制备第29页
      · 大肠杆菌感受态细胞的转化第29-30页
    · 大肠杆菌质粒DNA的提取第30-31页
      · 微量法提取质粒DNA第30页
      · 大量法提取质粒DNA第30-31页
    · 重组质粒的酶切鉴定第31页
    · DNA序列测序第31-32页
    · cDNA全长序列的测定第32-35页
      · 中间片段的获得第32页
      · 5'端序列的获得第32-33页
      · 3'端序列的获得第33-34页
      · cDNA全长的获得第34-35页
    · 基因组序列的获得第35-36页
    · 启动子序列克隆第36-37页
    · 半定量PCR检测目的基因表达第37-38页
    · 实时定量PCR第38页
    · 基因枪法瞬时表达第38-40页
      · 洋葱表皮瞬时表达载体的制备第38-39页
      · 微弹制备第39页
      · 基因枪转化第39-40页
    · 植物真核表达载体的构建及转化第40-43页
      · 真核表达载体的构建第40-41页
      · 农杆菌感受态细胞的制备第41页
      · 农杆菌感受态细胞的转化第41页
      · 农杆菌介导转化烟草第41-42页
      · 超表达转基因植株的鉴定第42-43页
    · 转基因植株的抗病性分析第43-45页
      · 病原菌培养基的配制第43页
      · 病原菌的培养第43页
      · 接种真菌第43-44页
      · 接种细菌第44页
      · 转基因植株抗病性数据统计第44页
      · 植物叶片台盼蓝染色方法第44页
      · 植物叶片DAB染色方法第44页
      · 植物叶片NBT染色方法第44-45页
    · 网络资源及数据库第45-46页
3 结果与分析第46-64页
  · 棉花GhWRKY44基因的克隆及序列分析第46-48页
    · GhWRKY44中间片段的分离第46页
    · GhWRKY44 5'端片段的分离第46页
    · GhWRKY44 3'端片段的分离第46-47页
    · GhWRKY44全长cDNA序列的分离第47页
    · GhWRKY44启动子序列的分离第47-48页
  · GhWRKY44的序列分析第48-52页
    · GhWRKY44的全长cDNA序列分析第48页
    · GhWRKY44编码的蛋白序列分析第48-51页
    · GhWRKY44启动子序列分析第51-52页
  · GhWRKY44亚细胞定位分析第52-53页
  · GhWRKY44的表达特性分析第53-56页
    · 不同组织部位中GhWRKY44的表达特性分析第53-54页
    · 非生物胁迫下GhWRKY44的表达特性分析第54-55页
    · 生物胁迫下GhWRKY44的表达特性分析第55页
    · 信号分子对GhWRKY44 mRNA水平变化的影响第55-56页
  · GhWRKY44超表达本生烟植株的获得和鉴定第56-58页
    · GhWRKY44超表达植株的获得第56-57页
    · GhWRKY44超表达植株的鉴定第57-58页
  · 超表达GhWRKY44转基因本生烟的功能分析第58-64页
    · 细菌抗性分析第58-59页
    · 真菌抗性分析第59-61页
    · 病原菌侵染叶片后台盼蓝染色死细胞观察第61-62页
    · 病原菌侵染叶片后ROS的检测第62页
    · 超表达GhWRKY44对转基因植株中抗性相关基因的影响第62-64页
4 讨论第64-68页
  · GhWRKY44转录因子结构特性第64-65页
  · GhWRKY44受多种环境胁迫及信号分子的诱导第65-66页
  · 超表达GhWRKY44提高了转基因植株对病原菌的抗性第66-67页
  · GhWRKY44参与调节体内的ROS水平第67-68页
5 结论第68-69页
参考文献第69-77页
致谢第77-78页
攻读学位期间发表论文情况第78 页

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