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氧化性低密度脂蛋白介导NF-κB信号通路促进rBMSCs成骨分化的机制研究

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氧化性低密度脂蛋白介导NF-κB信号通路促进rBMSCs成骨分化的机制研究
论文目录
 
摘要第1-6页
abstract第6-9页
缩略词中英文对照表第12-13页
一 间充质干细胞生物学特性的研究进展第13-24页
    1 MSCs的发展历程第13-14页
    2 MSCs的生物学特性第14-22页
        2.1 MSCs的增殖第14-15页
        2.2 MSCs的多向分化潜能第15-20页
            2.2.1 成脂分化第15-16页
            2.2.2 软骨分化第16-17页
            2.2.3 成骨分化第17-20页
        2.3 MSCs的归巢第20-21页
        2.4 MSCs的免疫调节第21-22页
    3 MSCs的临床研究及应用第22-24页
二 ox-LDL对 rBMSCs成骨分化机制的影响第24-73页
    1 绪论第24页
    2 实验材料与溶液配制第24-27页
        2.1 实验动物第24页
        2.2 实验仪器第24-25页
        2.3 主要的试剂及耗材第25-26页
        2.4 细胞培养液配置第26-27页
    3 实验方法第27-39页
        3.1 r BMSCs的分离和培养第27-29页
            3.1.1 细胞的原代分离第27页
            3.1.2 细胞传代第27-28页
            3.1.3 细胞冻存第28页
            3.1.4 细胞复苏第28-29页
        3.2 r BMSCs的鉴定第29-30页
            3.2.1 细胞表面标志物的检测第29页
            3.2.2 r BMSCs的三向分化第29-30页
        3.3 ox-LDL对细胞成骨以及成骨信号通路的影响第30-32页
            3.3.1 MTS检测细胞增殖能力第30-31页
            3.3.2 碱性磷酸酶活力检测第31-32页
        3.4 检测细胞核酸水平的表达量第32-35页
            3.4.1 RNA提取第32页
            3.4.2 反转录RNA反应(在冰上操作)第32-35页
        3.5 检测细胞蛋白水平的表达量第35-38页
            3.5.1 总蛋白提取(冰上进行)第35-36页
            3.5.2 BCA法蛋白定量第36页
            3.5.3 蛋白质免疫印迹(Western Bolt)第36-38页
        3.6 转录组测序(RNA—Seq检测)第38-39页
    4 实验结果与分析第39-69页
        4.1 r BMSCs的分离培养与鉴定第39-42页
            4.1.1 r BMSCs的体外分离与原代培养第39-40页
            4.1.2 流式细胞仪检测r BMSCs的表面标志蛋白的表达第40页
            4.1.3 r BMSCs三向分化潜能的鉴定第40-42页
        4.2 氧化性低密度脂蛋白促进r BMSCs的成骨分化第42-46页
            4.2.1 ox-LDL对 r BMSCs增殖能力的影响第42-44页
            4.2.2 ox-LDL对钙沉积的影响第44-45页
            4.2.3 ox-LDL对碱性磷酸酶活性(ALP)的影响第45-46页
        4.3 基于高通量测序实验方法探索分子机制第46-52页
            4.3.1 GO功能注释分析第46-49页
            4.3.2 KEGG功能注释分析第49-51页
            4.3.3 差异基因表达分析结果第51-52页
        4.4 ox-LDL对 r BMSCs成骨信号通路的影响第52-64页
            4.4.1 各基因的表达水平第53-55页
            4.4.2 NF-κB-p65和C5aR特异性拮抗剂对r BMSCs成骨分化的影响第55-64页
        4.5 ox-LDL介导组蛋白甲基化修饰调控r BMSCs的成骨分化第64-69页
            4.5.1 ox-LDL对 r BMSCs组蛋白H3K27me3 修饰水平的影响第65-67页
            4.5.2 NF-κB-P65和C5aR补体特异性拮抗剂对H3K27me3 修饰水平的影响第67-69页
    5 讨论第69-72页
    6 结论第72-73页
参考文献第73-89页
致谢第89页

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