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柽柳ThTrx5基因的耐盐性分析

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柽柳ThTrx5基因的耐盐性分析
论文目录
 
摘要第1-4页
Abstract第4-5页
1 绪论第9-18页
    1.1 柽柳简介第9页
    1.2 硫氧还蛋白及Trx基因的研究现状第9-17页
        1.2.1 Trx蛋白的种类及分布第10-13页
        1.2.2 Tx蛋白的结构及其性质第13-14页
        1.2.3 Trx蛋白的功能第14-17页
    1.3 本课题的主要研究背景,目的及意义第17页
    1.4 技术路线第17-18页
2 柽柳ThTrx基因的生物信息学分析及表达分析第18-28页
    2.1 材料第18页
        2.1.1 植物材料第18页
        2.1.2 试剂与仪器第18页
    2.2 方法第18-19页
        2.2.1 ThTrx基因序列的获得与分析第18页
        2.2.2 ThTrx基因在逆境胁迫下的表达分析第18-19页
    2.3 结果与分析第19-27页
        2.3.1 ThTrx基因序列分析第19-21页
        2.3.2 柽柳硫氧还蛋白基因在逆境胁迫下的表达分析第21-27页
    2.4 本章小结第27-28页
3 柽柳ThTrx5基因耐盐性分析第28-37页
    3.1 材料第28页
        3.1.1 植物材料第28页
        3.1.2 菌种与载体第28页
        3.1.3 酶及试剂第28页
    3.2 方法第28-33页
        3.2.1 柽柳ThTrx5基因的克隆第28-30页
        3.2.2 柽柳ThTrx5基因的植物表达载体构建第30-31页
        3.2.3 拟南芥遗传转化第31-33页
        3.2.4 转ThTrx5基因拟南芥在盐胁迫下的抗逆分析第33页
    3.3 结果与分析第33-36页
        3.3.1 柽柳ThTrx5基因克隆及植物表达载体构建第33-34页
        3.3.2 转基因拟南芥的筛选与检测第34-35页
        3.3.3 转基因拟南芥在盐胁迫下的抗逆分析第35-36页
    3.4 本章小结第36-37页
4 柽柳ThTrx5互作蛋白的筛选第37-45页
    4.1 材料第37-38页
        4.1.1 菌株及载体第37页
        4.1.2 主要试剂第37页
        4.1.3 植物材料第37页
        4.1.4 主要培养基与试剂配制第37-38页
        4.1.5 主要试验仪器第38页
    4.2 方法第38-41页
        4.2.1 原核表达载体的构建与鉴定第38页
        4.2.2 重组质粒pET41a::Trx5转入Rossetta-gamiB(DE3)第38-39页
        4.2.3 融合蛋白的原核表达第39页
        4.2.4 SDS-PAGE电泳检测第39页
        4.2.5 大量诱导第39页
        4.2.6 融合蛋白的纯化—镍琼脂糖亲和层析第39-40页
        4.2.7 纯化后融合蛋白分析第40页
        4.2.8 拟南芥总蛋白的提取第40页
        4.2.9 His pull-down筛选ThTrx5互作蛋白第40页
        4.2.10 SDS-PAGE凝胶电泳鉴定互作蛋白第40-41页
        4.2.11 质谱分析第41页
    4.3 结果与分析第41-42页
        4.3.1 重组质粒pET41a-Trx5双酶切鉴定结果第41页
        4.3.2 融合蛋白的原核表达及定位第41-42页
        4.3.7 质谱分析第42页
    4.4 本章小结第42-45页
5 盐胁迫下转基因与非转基因拟南芥转录组分析第45-58页
    5.1 材料第45页
    5.2 方法第45-49页
        5.2.1 RNA提取第45页
        5.2.2 提取的RNA质量检测第45页
        5.2.3 cDNA文库构建和测序第45-46页
        5.2.4 Solexa数字基因表达谱的生物信息学分析第46-49页
    5.3 结果与分析第49-57页
        5.3.1 RNA提取质量检测第49页
        5.3.2 测序质量评估第49-50页
        5.3.5 差异表达基因的GO功能分析第50-52页
        5.3.6 差异表达基因中高丰度表达分析第52-55页
        5.3.7 盐胁迫应答相关基因分析第55-57页
    5.4 本章小结第57-58页
结论第58-59页
参考文献第59-71页
攻读学位期间发表的学术论文第71-72页
致谢第72-73页

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