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油菜miRNA167调控BnNRAMP1响应镉胁迫的功能研究

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油菜miRNA167调控BnNRAMP1响应镉胁迫的功能研究
论文目录
 
摘要第1-8页
ABSTRACT第8页
缩略词表(Abbreviation)第9-10页
第一章 文献综述第10-28页
    1 植物的镉耐性机理及植物修复第10-15页
        1.1 镉对植物的毒害作用第10页
        1.2 镉对人体的危害第10-11页
        1.3 植物对镉的耐受机制第11-14页
            1.3.1 阻止镉的吸收第11-12页
            1.3.2 螯合作用和液泡区室化第12-13页
            1.3.3 激活体内抗氧化防御系统和诱导胁迫蛋白的产生第13-14页
        1.4 植物修复第14-15页
    2 植物miRNA的研究进展第15-24页
        2.1 植物miRNA的特征第15-16页
        2.2 植物miRNA的生物合成第16-17页
        2.3 植物miRNA的作用机制第17页
        2.4 植物miRNA的功能第17-24页
            2.4.1 植物miRNA在生长发育和信号转导中的作用第17-20页
            2.4.2 植物miRNA在生物胁迫和非生物胁迫中的作用第20-24页
    3 植物NRAMP家族蛋白研究进展第24-27页
        3.1 NRAMP家族蛋白的结构第24-25页
        3.2 植物NRAMP家族蛋白的生物学功能第25-27页
            3.2.1 拟南芥中的NRAMP蛋白第25页
            3.2.2 水稻中的NRAMP蛋白第25-27页
            3.2.3 其它植物中的NRAMP蛋白第27页
    4 本研究的目的与意义第27-28页
第二章 油菜miR167靶基因BnNRAMP1生物信息学与表达分析第28-48页
    1 前言第28页
    2 材料与方法第28-33页
        2.1 实验材料第28页
        2.2 实验试剂第28-29页
            2.2.1 营养液第28页
            2.2.2 总RNA提取与cDNA反转录相关试剂第28-29页
        2.3 实验方法第29-33页
            2.3.1 BnmiR167与靶基因BnNRAMP1的生物信息学分析第29页
            2.3.2 BnmiR167与靶基因BnNRAMP1的表达分析第29-33页
    3 结果与讨论第33-48页
        3.1 BnNRAMP1基因结构与蛋白质结构第33-34页
        3.2 BnNRAMP1同源序列比对与进化树分析第34-36页
        3.3 油菜NRAMP家族生物信息学分析第36-38页
        3.4 BnmiR167生物信息学分析与靶基因预测第38-42页
        3.5 miR167及其靶基因BnNRAMP1的组织表达模式第42-44页
        3.6 miR167及其靶基因BnNRAMP1响应镉胁迫的表达分析第44-48页
第三章 BnNRAMP1的酵母金属转运功能分析第48-58页
    1 前言第48页
    2 材料与方法第48-52页
        2.1 实验材料第48页
        2.2 实验试剂第48-50页
            2.2.1 培养基配方第48-49页
            2.2.2 酵母转化与功能分析相关试剂第49页
            2.2.3 酵母表达载体第49-50页
        2.3 试验方法第50-52页
            2.3.1 BnNRAMP1基因的克隆与转化第50页
            2.3.2 鲑鱼精DNA法酵母转化第50-51页
            2.3.3 酵母金属吸收功能分析第51-52页
    3 结果与讨论第52-58页
        3.1 BnNRAMP1介导了酵母对锰的吸收第52-53页
        3.2 BnNRAMP1介导了酵母对镉的吸收第53-55页
        3.3 BnNRAMP1介导了酵母对锌的吸收第55-58页
第四章 BnNRAMP1和m8BnNRAMP1的克隆与拟南芥AtNRAMP1镉胁迫下的功能分析第58-74页
    1 前言第58页
    2 材料与方法第58-66页
        2.1 实验材料第58-59页
        2.2 实验试剂第59-61页
            2.2.1 载体构建相关试剂第59-60页
            2.2.2 DNA提取试剂第60页
            2.2.3 拟南芥侵染与油菜组织培养相关试剂第60-61页
        2.3 载体构建与拟南芥的转化第61-64页
            2.3.1 BnNRAMP1与m8BnNRAMP1的克隆与转化第61-64页
            2.3.2 拟南芥的转化与筛选第64页
        2.4 拟南芥nramp1-1的突变体鉴定与镉胁迫下生理指标的测定第64-66页
            2.4.1 nramp1-1的突变体鉴定第64-65页
            2.4.2 AtNRAMP1表达水平鉴定第65页
            2.4.3 镉胁迫下生理指标的测定第65-66页
    3 结果与分析第66-71页
        3.1 BnNRAMP1和m8BnNRAMP1的克隆与分析第66页
        3.2 拟南芥nramp1-1突变体的鉴定第66-68页
        3.3 AtNRAMP1在镉胁迫下的表达模式第68页
        3.4 AtNRAMP1基因的缺失影响拟南芥对镉的耐受性第68-71页
            3.4.1 AtNRAMP1基因的缺失对拟南芥根长的影响第68-69页
            3.4.2 AtNRAMP1基因的缺失对拟南芥鲜重的影响第69-70页
            3.4.3 AtNRAMP1基因的缺失对拟南芥金属含量的影响第70-71页
    4 讨论第71-74页
全文小结第74-76页
创新点第76-78页
存在的问题第78-80页
参考文献第80-90页
攻读学位期间发表的论文第90-92页
致谢第92页

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