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腺病毒递送CRISPR/Cas9系统治疗成体大鼠Ⅰ型酪氨酸血症的研究
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腺病毒递送CRISPR/Cas9系统治疗成体大鼠Ⅰ型酪氨酸血症的研究
论文目录
 
摘要第1-7页
Abstract第7-8页
第一部分 研究背景第12-34页
　　　　第一章 CRISPR/Cas系统的研究进展第12-25页
　　　　　　　　1.1 CRISPR/Cas系统的发现过程第12-13页
　　　　　　　　1.2 CRISPR/Cas系统的作用原理第13-17页
　　　　　　　　1.3 CRISPR/Cas系统的应用第17-25页
　　　　第二章 基因治疗的现状及前景第25-34页
　　　　　　　　2.1 基因治疗概述第25-26页
　　　　　　　　2.2 基因治疗的应用第26-30页
　　　　　　　　2.3 基因治疗临床转化的技术改进第30-34页
第二部分 实验试剂、材料与方法第34-53页
　　　　1. 实验试剂与材料第34-42页
　　　　　　　　1.1 实验试剂与试剂盒第34-35页
　　　　　　　　1.2 实验材料第35-36页
　　　　　　　　1.3 实验仪器第36-37页
　　　　　　　　1.4 实验主要试剂配方第37-42页
　　　　2. 实验方法第42-53页
　　　　　　　　2.1 sgRNA表达载体的构建及体外转录第42-43页
　　　　　　　　2.2 Cas9表达载体体外转录步骤第43-44页
　　　　　　　　2.3 大鼠脚趾基因组抽提第44页
　　　　　　　　2.4 Western blot(WB)第44-46页
　　　　　　　　2.5 苏木精-伊红染色(H-E染色)第46页
　　　　　　　　2.6 免疫组化第46-47页
　　　　　　　　2.7 冰冻切片第47-48页
　　　　　　　　2.8 大鼠血生化指标检测第48页
　　　　　　　　2.9 腺病毒的扩增及纯化第48-50页
　　　　　　　　2.10 腺病毒滴度的检测第50页
　　　　　　　　2.11 腺病毒肝脏毒性测定(RT-PCR法)第50-53页
第三部分 结果与讨论第53-71页
　　　　第一章 利用CRISPR/Cas9技术构建Fah~(-/-)Ⅰ型酪氨酸血症大鼠模型第53-59页
　　　　　　　　1. 引言第53-54页
　　　　　　　　2. 实验结果第54-58页
　　　　　　　　3. 小结第58-59页
　　　　第二章 腺病毒递送CRISPR/Cas9系统感染成体大鼠肝脏第59-62页
　　　　　　　　1. 引言第59页
　　　　　　　　2. 实验结果第59-61页
　　　　　　　　3. 小结第61-62页
　　　　第三章 腺病毒CRISPR/Cas9介导治疗成体大鼠I型酪氨酸血症第62-68页
　　　　　　　　1. 引言第62页
　　　　　　　　2. 实验结果第62-66页
　　　　　　　　3. 小结第66-68页
　　　　第四章 全文总结与讨论第68-71页
参考文献第71-84页
致谢第84页

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