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基于无滋养层细胞无动物源性蛋白诱导体系的类人精原干细胞的分离纯化与鉴定
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生殖细胞论文
基于无滋养层细胞无动物源性蛋白诱导体系的类人精原干细胞的分离纯化与鉴定
论文目录
摘要
第1-7页
ABSTRACT
第7页
1 文献综述
第11-28页
1.1 干细胞简介
第11-15页
1.1.1 干细胞的定义与分类
第11页
1.1.2 干细胞的发展历程
第11-13页
1.1.3 干细胞的应用及前景
第13-15页
1.2 干细胞与生殖细胞
第15-20页
1.2.1 生殖细胞的发育
第15-17页
1.2.2 体外诱导生殖细胞
第17-19页
1.2.3 CRISPR/Cas9技术简介
第19-20页
1.3 精原干细胞研究进展
第20-28页
1.3.1 精原干细胞简介
第20-22页
1.3.2 精原干细胞的调控
第22-25页
1.3.3 精原干细胞的鉴定
第25-28页
2 材料与方法
第28-50页
2.1 实验材料
第28-35页
2.1.1 生物材料
第28-29页
2.1.2 仪器耗材
第29-30页
2.1.3 实验试剂:
第30-33页
2.1.4 引物序列
第33-35页
2.2 实验方法
第35-50页
2.2.1 细胞培养与分化
第35-37页
2.2.2 NANOS3敲除细胞系的建立
第37-38页
2.2.3 流式细胞术
第38-40页
2.2.4 RNA的抽提,反转与cDNA检测
第40-42页
2.2.5 DNA的抽提
第42-43页
2.2.6 分子克隆技术
第43-44页
2.2.7 原位荧光杂交
第44-45页
2.2.8 类人精原干细胞的体内移植
第45-46页
2.2.9 石蜡切片相关
第46-47页
2.2.10 免疫荧光
第47-50页
3. 实验结果与分析
第50-69页
3.1 拟胚体形式诱导生殖细胞
第50-57页
3.1.1 分化前后形态比较
第51-52页
3.1.2 PLZF阳性群体的产生
第52-53页
3.1.3 基因转录水平
第53-54页
3.1.4 生殖相关蛋白表达
第54页
3.1.5 单倍体形成
第54-55页
3.1.6 体内移植后的功能鉴定
第55-57页
3.2 NANOS3对类人精原干细胞的形成至关重要
第57-60页
3.2.1 NANOS3敲除细胞系的建立
第57-59页
3.2.2 NANOS3敲除后的诱导分化
第59-60页
3.3 类人精原干细胞分离纯化与鉴定
第60-69页
3.3.1 类人精原干细胞表面标志的筛选
第61-64页
3.3.2 类人精原干细胞标志基因的转录
第64-66页
3.3.3 类人精原干细胞体内移植后检测
第66-69页
4 总结与讨论
第69-75页
4.1 对体外分化体系的重复与完善
第69-70页
4.1.1 分化体系确实可以诱导产生功能性生殖细胞
第69页
4.1.2 NANOS3对于类人精原干细胞的形成具有重要作用
第69-70页
4.2 多能干细胞来源的类精原干细胞的分离策略总结
第70-72页
4.2.1 表面抗原的筛选
第70-71页
4.2.2 分离纯化后的鉴定
第71-72页
4.3 讨论
第72-75页
参考文献
第75-85页
本篇论文共
85
页,
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。
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