论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 第一章 研究背景及文献综述 | 第10-25页 |
| 1.1 GASZ蛋白结构及其生物学功能 | 第10-18页 |
| 1.1.1 GASZ蛋白及其编码基因 | 第10-11页 |
| 1.1.2 GASZ蛋白功能域结构 | 第11-16页 |
| 1.1.3 GASZ蛋白与piRNA及nuage结构形成 | 第16-17页 |
| 1.1.4 GASZ蛋白在雄性生殖中的作用 | 第17-18页 |
| 1.2 泛素-蛋白酶体系统(UPS) | 第18-25页 |
| 1.2.1 UPS的结构与功能 | 第18-21页 |
| 1.2.2 UPS介导的蛋白质降解 | 第21-22页 |
| 1.2.3 UPS在雄性生殖中的作用 | 第22-25页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第25-48页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-33页 |
| 2.1.1 质粒 | 第25页 |
| 2.1.2 细胞 | 第25-26页 |
| 2.1.3 抗体 | 第26页 |
| 2.1.4 主要试剂和材料 | 第26-28页 |
| 2.1.5 主要溶液配制 | 第28-30页 |
| 2.1.6 引物序列 | 第30-31页 |
| 2.1.7 主要仪器 | 第31-33页 |
| 2.2 实验方法 | 第33-48页 |
| 2.2.1 普通分子克隆 | 第33-37页 |
| 2.2.2 定点突变克隆 | 第37-39页 |
| 2.2.3 磷酸钙转染 | 第39-40页 |
| 2.2.4 蛋白提取及浓度测定 | 第40-42页 |
| 2.2.5 Western Blotting | 第42-44页 |
| 2.2.6 IPTG蛋白诱导纯化 | 第44-46页 |
| 2.2.7 GST pull-down | 第46-47页 |
| 2.2.8 蛋白质免疫共沉淀 | 第47-48页 |
| 第三章 实验结果及分析 | 第48-61页 |
| 3.1 GASZ蛋白稳定性及自身相互作用调控功能区域 | 第48-55页 |
| 3.1.1 SAM和bZIP结构域对GASZ蛋白稳定性维持有重要作用 | 第48-50页 |
| 3.1.2 GASZ通过SAM和bZIP结构域进行自身相互作用 | 第50-51页 |
| 3.1.3 SAM与bZIP之间的结构域缺失影响GASZ蛋白自身相互作用 | 第51-53页 |
| 3.1.4 SAM与bZIP之间的结构域对GASZ蛋白稳定性维持有关键作用 | 第53-55页 |
| 3.2 GASZ蛋白线粒体定位信号与其稳定性有关 | 第55-58页 |
| 3.2.1 线粒体定位改变影响GASZ蛋白稳定性 | 第55-56页 |
| 3.2.2 GASZ蛋白线粒体定位改变影响其自身相互作用 | 第56-58页 |
| 3.3 bZIP结构域上两个赖氨酸位点与GASZ蛋白降解有关 | 第58-61页 |
| 3.3.1 bZIP结构域上两个K到R的突变使GASZ蛋白更稳定 | 第58-59页 |
| 3.3.2 bZIP结构域上两个K均与GASZ蛋白降解有关 | 第59-61页 |
| 第四章 总结与讨论 | 第61-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
