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利用CRISPR/Cas9技术构建斑马鱼asb5a基因敲除品系

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利用CRISPR/Cas9技术构建斑马鱼asb5a基因敲除品系
论文目录
 
摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
  1. 引言和文献综述第9-22页
  1.1 基因编辑技术在斑马鱼中的应用第9-14页
    1.1.1 斑马鱼中常见的基因编辑技术第9页
    1.1.2 诱变技术第9-10页
    1.1.3 Tol2转座子、Morpholino干扰技术第10-11页
    1.1.4 ZFNs、TALENs简介第11-14页
  1.2 CRISPR/Cas9基因编辑技术第14-17页
    1.2.1 CRISPR/Cas9简介第14-16页
    1.2.2 CRISPR/Cas9的优势第16页
    1.2.3 CRISPR/Cas9存在的问题第16-17页
  1.3 斑马鱼作为模式动物的优势第17页
  1.4 asb5a基因的介绍第17-20页
  1.5 本文研究的意义第20-22页
  2. 材料和方法第22-35页
  2.1 材料第22-26页
    2.1.1 主要试剂第22-23页
    2.1.2 主要实验仪器第23-24页
    2.1.3 主要所需溶液配方第24页
    2.1.4 斑马鱼品系第24-25页
    2.1.5 主要质粒和菌株第25页
    2.1.6 生物信息学分析主要数据库第25-26页
  2.2 实验方法第26-35页
    2.2.1 asb5a基因打靶位点的选择和确认第26-27页
    2.2.2 PCR引物的设计第27-28页
    2.2.3 gRNA表达载体的构建与合成第28-32页
    2.2.4 F0代突变鱼的制备第32-33页
    2.2.5 F0代突变体的筛选第33-35页
  3. 结果第35-44页
  3.1 gRNA靶位点的确定及打靶载体的构建第35-38页
    3.1.1 针对斑马鱼asb5a基因的打靶位点分析第35-37页
    3.1.2 sgRNA的制备第37-38页
  3.2 asb5a-F0代的鉴定分析第38-44页
    3.2.1 注射后胚胎有效性分析第38-39页
    3.2.2 F0代成鱼鉴定分析第39-44页
  4. 结论第44-45页
  5. 分析与讨论第45-47页
参考文献第47-52页
附录一第52-53页
附录二第53-54页
致谢第54-55页

本篇论文共55页,点击这进入下载页面
 
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