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乌骨鸡Cathelicidins抗菌肽在Pichia pastoris X-33中的表达及与抗生素联合应用的效果

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乌骨鸡Cathelicidins抗菌肽在Pichia pastoris X-33中的表达及与抗生素联合应用的效果
论文目录
 
符号说明第1-9页
中文摘要第9-11页
Abstract第11-14页
1 引言第14-30页
  · 抗菌肽的研究进展第14-21页
    · 抗菌肽的分类第14-17页
      · 昆虫抗菌肽第14-15页
      · 海洋生物抗菌肽第15页
      · 两栖动物抗菌肽第15页
      · 植物抗菌肽第15-16页
      · 哺乳动物抗菌肽第16页
      · 鸟类抗菌肽第16页
      · 细菌抗菌肽第16-17页
      · 病毒抗菌肽第17页
    · 抗菌肽的理化性质第17页
    · 抗菌肽的制备方法第17-19页
      · 天然生物组织中直接分离第17-18页
      · 基因工程第18页
      · 化学合成第18页
      · 天然蛋白水解第18-19页
    · 抗菌肽的应用前景第19-21页
      · 抗菌肽在临床医药领域的应用第19-20页
      · 抗菌肽在食品工业领域的应用第20页
      · 抗菌肽在畜牧业领域的应用第20页
      · 抗菌肽在转基因工程领域的应用第20-21页
    · 抗菌肽研究面临的问题第21页
  · 鸡源性抗菌肽Cathelicidins的研究进展第21-24页
    · Cathelicidins抗菌肽的发现第21-22页
    · Cathelicidins抗菌肽的分子结构与生物学特性第22-23页
    · Cathelicidins抗菌肽的抗菌作用第23-24页
  · 巴斯德毕赤酵母表达系统第24-30页
    · 毕赤酵母表达载体第24-25页
    · 毕赤酵母表达菌株第25-26页
    · 巴斯德毕赤酵母高效表达外源基因的机制第26页
    · 巴斯德毕赤酵母系统表达外源蛋白的优点第26-27页
    · 重组蛋白高效表达第27-30页
      · 选择高效表达的启动子第27-28页
      · 外源基因的拷贝数第28页
      · 信号肽的选择第28-29页
      · A+T的含量第29页
      · 密码子的偏嗜性第29-30页
  · 本研究的目的及意义第30页
2 材料与方法第30-47页
  · 实验动物第30页
  · 菌株、载体第30-31页
  · 主要试剂和仪器第31-34页
    · 主要购买试剂第31页
    · 仪器第31页
    · 主要配制试剂第31-34页
      · 各种贮存试剂第31-32页
      · 蛋白诱导表达及蛋白浓缩试剂第32页
      · 蛋白鉴定试剂第32-33页
      · 培养基配制第33-34页
  · 真核重组表达载体pPICZɑ-A-CathL1、L2、L3的构建第34-39页
    · 目的基因cathelicidin-1、-2、-3 的获得第34-35页
    · Cathelicidin-1、-2、-3 基因的克隆测序第35-37页
    · 真核重组载体pPICZɑ-A-CathL1、L2、L3的构建与鉴定第37-39页
  · 重组酵母菌株的构建及鉴定第39-44页
    · 真核重组载体pPICZɑ-A-CathL1、L2、L3的线性化第39-41页
    · 线性化真核重组载体电转毕赤酵母X-33第41-42页
    · 毕赤酵母阳性转化子鉴定与筛选第42-44页
      · 毕赤酵母阳性转化子鉴定第42-44页
      · 毕赤酵母高拷贝阳性转化子的筛选第44页
      · 毕赤酵母高拷贝阳性转化子的Mut~+表型筛选第44页
  · 重组毕赤酵母pPICZɑ-A-CathL1、L2、L3的诱导表达第44-46页
  · 表达产物与抗生素的体外联合作用第46-47页
    · 表达产物的抑菌效果检测第46-47页
    · 表达产物与抗生素体外联合使用第47页
3 结果与分析第47-59页
  · 真核重组表达质粒pPICZα-A -Cath L1、L2、L3的构建第47-49页
  · 重组毕赤酵母菌株的转化鉴定和筛选第49-51页
  · 重组毕赤酵母菌株的诱导表达以及诱导条件的优化第51-54页
    · 重组毕赤酵母菌株的诱导表达第51-52页
    · 诱导时间的优化第52-53页
    · 诱导剂浓度的优化第53-54页
  · Cathelicidins抗菌肽与抗生素的体外联合作用第54-59页
    · Cathelicidins抗菌肽的抑菌效果检测第54-55页
    · Cathelicidins抗菌肽与抗生素的联合作用第55-59页
4 讨论第59-64页
  · 乌骨鸡Cathelicidins抗菌肽的真核表达第59-60页
  · 乌骨鸡抗菌肽Cathelicidins与抗生素的联合作用效果第60-64页
5 结论第64-65页
参考文献第65-74页
致谢第74-75页
个人简介第75-76页
攻读硕士学位期间发表论文第76页

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