论文目录 | |
符号说明 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
1 引言 | 第14-30页 |
· 抗菌肽的研究进展 | 第14-21页 |
· 抗菌肽的分类 | 第14-17页 |
· 昆虫抗菌肽 | 第14-15页 |
· 海洋生物抗菌肽 | 第15页 |
· 两栖动物抗菌肽 | 第15页 |
· 植物抗菌肽 | 第15-16页 |
· 哺乳动物抗菌肽 | 第16页 |
· 鸟类抗菌肽 | 第16页 |
· 细菌抗菌肽 | 第16-17页 |
· 病毒抗菌肽 | 第17页 |
· 抗菌肽的理化性质 | 第17页 |
· 抗菌肽的制备方法 | 第17-19页 |
· 天然生物组织中直接分离 | 第17-18页 |
· 基因工程 | 第18页 |
· 化学合成 | 第18页 |
· 天然蛋白水解 | 第18-19页 |
· 抗菌肽的应用前景 | 第19-21页 |
· 抗菌肽在临床医药领域的应用 | 第19-20页 |
· 抗菌肽在食品工业领域的应用 | 第20页 |
· 抗菌肽在畜牧业领域的应用 | 第20页 |
· 抗菌肽在转基因工程领域的应用 | 第20-21页 |
· 抗菌肽研究面临的问题 | 第21页 |
· 鸡源性抗菌肽Cathelicidins的研究进展 | 第21-24页 |
· Cathelicidins抗菌肽的发现 | 第21-22页 |
· Cathelicidins抗菌肽的分子结构与生物学特性 | 第22-23页 |
· Cathelicidins抗菌肽的抗菌作用 | 第23-24页 |
· 巴斯德毕赤酵母表达系统 | 第24-30页 |
· 毕赤酵母表达载体 | 第24-25页 |
· 毕赤酵母表达菌株 | 第25-26页 |
· 巴斯德毕赤酵母高效表达外源基因的机制 | 第26页 |
· 巴斯德毕赤酵母系统表达外源蛋白的优点 | 第26-27页 |
· 重组蛋白高效表达 | 第27-30页 |
· 选择高效表达的启动子 | 第27-28页 |
· 外源基因的拷贝数 | 第28页 |
· 信号肽的选择 | 第28-29页 |
· A+T的含量 | 第29页 |
· 密码子的偏嗜性 | 第29-30页 |
· 本研究的目的及意义 | 第30页 |
2 材料与方法 | 第30-47页 |
· 实验动物 | 第30页 |
· 菌株、载体 | 第30-31页 |
· 主要试剂和仪器 | 第31-34页 |
· 主要购买试剂 | 第31页 |
· 仪器 | 第31页 |
· 主要配制试剂 | 第31-34页 |
· 各种贮存试剂 | 第31-32页 |
· 蛋白诱导表达及蛋白浓缩试剂 | 第32页 |
· 蛋白鉴定试剂 | 第32-33页 |
· 培养基配制 | 第33-34页 |
· 真核重组表达载体pPICZɑ-A-CathL1、L2、L3的构建 | 第34-39页 |
· 目的基因cathelicidin-1、-2、-3 的获得 | 第34-35页 |
· Cathelicidin-1、-2、-3 基因的克隆测序 | 第35-37页 |
· 真核重组载体pPICZɑ-A-CathL1、L2、L3的构建与鉴定 | 第37-39页 |
· 重组酵母菌株的构建及鉴定 | 第39-44页 |
· 真核重组载体pPICZɑ-A-CathL1、L2、L3的线性化 | 第39-41页 |
· 线性化真核重组载体电转毕赤酵母X-33 | 第41-42页 |
· 毕赤酵母阳性转化子鉴定与筛选 | 第42-44页 |
· 毕赤酵母阳性转化子鉴定 | 第42-44页 |
· 毕赤酵母高拷贝阳性转化子的筛选 | 第44页 |
· 毕赤酵母高拷贝阳性转化子的Mut~+表型筛选 | 第44页 |
· 重组毕赤酵母pPICZɑ-A-CathL1、L2、L3的诱导表达 | 第44-46页 |
· 表达产物与抗生素的体外联合作用 | 第46-47页 |
· 表达产物的抑菌效果检测 | 第46-47页 |
· 表达产物与抗生素体外联合使用 | 第47页 |
3 结果与分析 | 第47-59页 |
· 真核重组表达质粒pPICZα-A -Cath L1、L2、L3的构建 | 第47-49页 |
· 重组毕赤酵母菌株的转化鉴定和筛选 | 第49-51页 |
· 重组毕赤酵母菌株的诱导表达以及诱导条件的优化 | 第51-54页 |
· 重组毕赤酵母菌株的诱导表达 | 第51-52页 |
· 诱导时间的优化 | 第52-53页 |
· 诱导剂浓度的优化 | 第53-54页 |
· Cathelicidins抗菌肽与抗生素的体外联合作用 | 第54-59页 |
· Cathelicidins抗菌肽的抑菌效果检测 | 第54-55页 |
· Cathelicidins抗菌肽与抗生素的联合作用 | 第55-59页 |
4 讨论 | 第59-64页 |
· 乌骨鸡Cathelicidins抗菌肽的真核表达 | 第59-60页 |
· 乌骨鸡抗菌肽Cathelicidins与抗生素的联合作用效果 | 第60-64页 |
5 结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
个人简介 | 第75-76页 |
攻读硕士学位期间发表论文 | 第76页 |