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苹果细胞质苹果酸脱氢酶基因的抗逆功能鉴定及机制研究

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苹果细胞质苹果酸脱氢酶基因的抗逆功能鉴定及机制研究
论文目录
 
中文摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
1 前言第12-25页
  · 苹果酸脱氢酶(MDH)第12-17页
    · 苹果酸脱氢酶(MDH)类型、结构与功能第12-14页
    · 细胞质苹果酸脱氢酶(cyMDH)的功能研究第14-15页
    · 质体苹果酸脱氢酶(pdMDH)的功能第15-16页
    · 线粒体苹果酸脱氢酶(mMDH)的功能研究第16-17页
    · 过氧化酶体苹果酸脱氢酶(PMDH)的功能研究第17页
  · 激素与非生物胁迫抗性第17-20页
    · 水杨酸与非生物胁迫第17-19页
    · 脱落酸与非生物胁迫第19-20页
  · 氧化还原平衡、活性氧与抗逆性第20-23页
  · 本研究的目的和意义第23-25页
2 材料和方法第25-41页
  · 实验材料第25-28页
    · 植物材料第25页
    · 植物材料的培养及处理第25页
    · 菌株及载体第25页
    · 酶、试剂盒、生化试剂、培养基第25-26页
    · 仪器与设备第26-27页
    · PCR引物第27-28页
  · 实验方法第28-41页
    · 植物总RNA的提取与检测第28-29页
    · 植物基因组DNA的提取与纯化第29-30页
    · 基因克隆第30页
    · 目的片段回收第30-31页
    · 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第31-32页
    · 质粒DNA的提取第32-33页
    · 质粒DNA的酶切第33页
    · MdcyMDH基因正义表达载体的构建第33-34页
    · 根癌农杆菌(LBA4404)感受态细胞的制备和转化第34-35页
    · 植物材料的栽培、转化及转基因植株分析第35页
    · 细胞质苹果酸脱氢酶活性分析第35-36页
    · 叶绿体和线粒体的分离和纯化第36-37页
    · 苹果酸依赖的呼吸速率检测第37页
    · 苹果酸的含量提取和测定第37页
    · 光合作用和叶绿素的测定第37-38页
    · 叶绿素荧光的测定第38页
    · H_2O_2提取和计算第38-39页
    · 氧化还原对的提取并计算第39页
    · 叶片激素的提取和测定第39-40页
    · 数字基因表达谱分析(Digital Gene Expression Profiling,DGE)第40-41页
3 结果与分析第41-63页
  · 苹果MdcyMDH基因序列和表达分析第41-47页
    · 苹果MdcyMDH基因家族序列分析第41-43页
    · cyMDHs进化树分析第43-44页
    · 苹果cyMDHs二级结构和三级结构第44页
    · 苹果cyMDHs基因时空表达特性第44-45页
    · 苹果cyMDHs基因对冷和盐胁迫诱导的表达响应第45-46页
    · MdcyMDH过量表达苹果株系的获得与鉴定第46-47页
  · MdcyMDH基因的转基因功能的鉴定第47-51页
    · MdcyMDH基因过量表达促进苹果组培苗生长第47-48页
    · MdcyMDH基因过量表达提高了转基因组培苗的光合能力第48-49页
    · MdcyMDH基因过量表达促进转基因叶片叶绿素含量第49-50页
    · MdcyMDH基因过量表达提高了转基因苹果组培苗的冷和盐抗性第50-51页
  · MdcyMDH基因调节盐和冷抗性的机制研究第51-63页
    · MdcyMDH过量表达诱导的表达谱变化第51-53页
    · MdcyMDH基因过量表达改变了线粒体和叶绿体的代谢第53-59页
    · MdcyMDH基因过量表达提高了细胞还原力并改变了ROS水平第59-61页
    · MdcyMDH过量表达提高了SA含量第61-63页
4 讨论第63-67页
  · 在非生物胁迫条件下cyMDH主要催化苹果酸的合成第63页
  · MdcyMDH通过提高细胞还原力来增强对冷和盐抗性第63-64页
  · MdcyMDH基因通过调节氧化还原来增加冷和盐胁迫的抗性第64-65页
  · MdcyMDH通过提高SA和氧化还原物质互作来提高冷和盐胁迫抗性第65-67页
5 结论第67-68页
参考文献第68-82页
致谢第82-83页
攻读学位期间发表论文情况第83页

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