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马立克氏病毒SC9-2株生物学活性的比较研究及表达NDV-F基因重组病毒的构建

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马立克氏病毒SC9-2株生物学活性的比较研究及表达NDV-F基因重组病毒的构建
论文目录
 
符号说明第1-11页
中文摘要第11-13页
Abstract第13-16页
1 前言第16-31页
  · 马立克氏病(MD)的研究进展第16-20页
    · 病原学第16-17页
    · 流行病学第17页
    · 感染机制及病理变化第17-18页
      · 病毒溶细胞性感染期第17-18页
      · 潜伏感染期第18页
      · 二次溶细胞感染第18页
      · 转化和肿瘤的形成第18页
    · 诊断技术第18-19页
      · 常规诊断第18-19页
      · 病毒分离第19页
      · 病毒抗原的检测第19页
      · 聚合酶链式反应技术(PCR)第19页
      · DNA探针技术第19页
    · MD致病型第19-20页
  · MDV分子生物学研究进展第20-24页
    · MDV基因组结构第20-22页
    · MDV结构蛋白及相关基因第22-24页
      · 致瘤基因第22-23页
      · 糖蛋白基因第23-24页
      · 其他基因第24页
  · 禽反转录病毒与MDV间的基因重组第24-25页
    · 病毒的变异第24页
    · MDV与REV间的基因重组第24-25页
    · REV与MDV基因重组的机制第25页
    · 不同病毒间遗传重组流行病学意义第25页
  · DNA片段克隆的载体系统第25-28页
    · 质粒第25-26页
    · 粘粒第26页
    · BAC的发展及其优势第26-28页
      · 细菌人工染色体载体系统(BAC)第26-27页
      · 利用BAC构建MDV感染性克隆第27-28页
      · 基于MDV BAC感染性克隆的同源重组技术第28页
  · MD的防制第28-29页
    · 免疫机理第28-29页
    · 疫苗研究进展第29页
    · 目前MDV疫苗的种类第29页
      · 常规致弱疫苗第29页
      · 新型疫苗第29页
  · 本研究的目的及意义第29-31页
2 材料和方法第31-44页
  · 主要试验耗材和仪器第31-32页
    · 分子克隆相关试剂第31页
    · 常规细胞培养相关试剂第31页
    · 其他主要试剂第31页
    · 主要仪器第31页
    · 相关菌种、病毒株及载体第31-32页
  · SC9-1重组病毒的拯救及鉴定第32-35页
    · SC9-1重组病毒的拯救第32页
    · SC9-1重组病毒的IFA鉴定第32页
    · SC9-1重组病毒在细胞上的传代以及BAC序列的PCR检测第32-33页
      · SC9-1重组病毒在细胞上的传代第32页
      · SC9-1重组病毒BAC序列的PCR检测第32-33页
    · 不同代次病毒DNA中的BAC序列的荧光定量PCR检测第33-34页
    · SC9-1基因组BAC序列敲除的PCR鉴定第34-35页
      · 引物设计第34页
      · 残留碱基的PCR扩增第34页
      · PCR产物电泳及分子克隆第34-35页
  · 马立克氏病毒疫苗株SC9-2在CEF细胞上的传代致弱及其免疫抑制作用和保护效果的评估第35-37页
    · SC9-2疫苗株在CEF细胞上的传代致弱第35-36页
    · 不同代次SC9-2对SPF鸡免疫抑制和免疫保护效果的评估第36页
      · 不同代次SC9-2外源病毒检测第36页
      · SC9-2/10~(th)和SC9-2/40~(th)对SPF鸡免疫抑制和免疫保护的评估第36页
    · SC9-2在鸡体内复制动力学第36-37页
  · 表达NDV-F基因重组MDV的构建及其在鸡体内外的复制第37-44页
    · 原理第37-38页
    · NDV-F表达盒的构建及IFA验证第38-39页
      · NDV-F表达盒的构建第38-39页
      · NDV-F表达盒的IFA验证第39页
    · Red E/T和FLP/FRT重组系统构建重组病毒第39-42页
      · 重组表达盒的构建第39页
      · 重组串联表达盒与SC9-1在EL250中的电转重组第39-40页
      · 利用Flp/FRT重组系统敲除Kan+抗性筛选基因第40-41页
      · 大量提取重组阳性质粒第41-42页
      · 重组病毒的拯救第42页
      · rMDV-F的生物学活性检测第42页
    · 重组病毒在体外的生长复制第42页
    · 重组病毒在鸡体内的复制第42-44页
3 结果与分析第44-53页
  · SC9-1重组病毒的拯救与鉴定第44-46页
    · SC9-1重组病毒的拯救及鉴定结果第44页
    · 不同代次SC9-1重组病毒BAC序列的PCR检测结果第44-45页
    · 病毒DNA中的BAC序列的荧光定量PCR检测结果第45页
    · SC9-1 BAC序列敲除的PCR鉴定结果第45-46页
  · 马立克氏病毒疫苗株SC9-2在CEF细胞上的传代致弱及免疫抑制和免疫保护效果的评估第46-49页
    · SC9-2(40~(th)和10~(th))外源病毒检测第46-47页
    · SC9-2(40~(th)和10~(th))弱毒株对SPF鸡的致病性第47页
    · SC9-2(40~(th)和10~(th))弱毒株对SPF鸡体重及免疫器官的影响第47页
    · 免疫SC9-2弱毒苗SPF鸡体对NDV和AIV-H9的抗体反应第47-48页
    · SC9-2在鸡体内的复制动力学第48页
    · SC9-2(40~(th)和10~(th))对SPF鸡的免疫保护效果第48-49页
  · 表达NDV-F基因重组马立克病病毒的构建及其在鸡体内外的复制第49-53页
    · IFA验证R-CMV-F质粒在体外的表达第49页
    · 重组马立克病病毒的分子结构及鉴定第49-50页
    · 感染重组病毒rMDV-F细胞中NDV-F蛋白的检测第50-51页
    · 重组病毒在体外的生长复制第51页
    · 重组病毒在鸡体内的复制第51-53页
4 讨论第53-57页
5 结论第57-58页
参考文献第58-65页
致谢第65-66页
攻读硕士学位期间发表论文情况第66页

本篇论文共66页,点击这进入下载页面
 
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