论文目录 | |
摘要 | 第1-5
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ABSTRACT | 第5-10
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主要符号对照表 | 第10-11
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第一章 文献综述 | 第11-22
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· 骨骼的生长发育调控 | 第11
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· 一些代谢性骨病及其治疗现状 | 第11-13
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· OPG 及OPG/RANK/RANKL 系统 | 第13-19
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· 结构生物学在研究TNFRSF11B 蛋白分子作用机制的意义 | 第19-20
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· 目前研究现状 | 第20-21
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· 研究内容与论文结构 | 第21-22
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第二章 人源TNFRSF11B 的生物信息学分析 | 第22-28
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· Blast 分析 | 第22-23
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· TMHMM 跨膜分析 | 第23
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· 信号肽预测 | 第23-24
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· 蛋白质基本理化特性分析 | 第24-26
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· 结构域分析 | 第26
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· 二级结构预测 | 第26-28
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第三章 人源TNFRSF11B 蛋白的克隆、表达、纯化以及包涵体变复性分析 | 第28-44
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· 前言 | 第28-35
页 |
· 包涵体的定义、组成与特性 | 第28-29
页 |
· 包涵体的形成 | 第29
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· 包涵体破菌、分离、洗涤及溶解 | 第29-30
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· 蛋白质的折叠机理 | 第30-31
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· 复性 | 第31-35
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· 实验流程 | 第35-36
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· 材料 | 第36
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· 工具酶和各种试剂 | 第36
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· 载体和感受态细胞 | 第36
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· 层析介质和设备 | 第36
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· 方法 | 第36-38
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· PCR 扩增及基因克隆 | 第36-37
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· 引物设计与合成 | 第36
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· PCR 反应 | 第36
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· pGEX-6P-1-tnfrsf11b 重组克隆的构建与鉴定 | 第36-37
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· Tnfrsf11b 蛋白的诱导表达以及纯化条件摸索 | 第37
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· 目标蛋白质的大量表达纯化 | 第37-38
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· 结果 | 第38-40
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· PCR 扩增 | 第38
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· 重组质粒的鉴定 | 第38-39
页 |
· 重组质粒pGEX-6P-1-tnfrsf11b 的诱导表达 | 第39
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· Tnfrsf11b 的表达条件探索 | 第39-40
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· Tnfrsf11b 的纯化 | 第40
页 |
· Tnfrsf11b 在pET-28a 载体中的表达以及包涵体变复性分析 | 第40-42
页 |
· 重组质粒pET28a-Tnfrsf11b 的鉴定 | 第40-41
页 |
· Tnfrsf11b 的试表达 | 第41
页 |
· Tnfrsf11b 包涵体的变复性分析 | 第41-42
页 |
· Tnfrsf11b 包涵体复性后可溶性蛋白的纯化 | 第42
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· 分析与小结 | 第42-44
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第四章 人源TNFRSF11B 蛋白的分析及相关工作 | 第44-54
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· 前言 | 第44
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· TNFRSF11B 蛋白圆二色谱测定 | 第44-45
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· 分析与小结 | 第45-46
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· 相关工作 | 第46-54
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· Tnfrsf11b2 结构和功能分析 | 第46-47
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· Fas 结构和功能分析 | 第47-51
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· pGEX6p-1-Fas 的构建与鉴定 | 第49
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· Fas 的试表达 | 第49-50
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· Fas 的表达与纯化 | 第50-51
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· Fas 的圆二色谱分析 | 第51
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· Fas 实验结果分析 | 第51
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· PTP1B 和SHP-1 表达和功能分析 | 第51-54
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第五章 结论 | 第54-56
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参考文献 | 第56-61
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附录 | 第61
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附一:常用载体图谱 | 第61-63
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附二:相关基因信息 | 第63-66
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导师简介 | 第66-67
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个人简介 | 第67
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攻读硕士学位期间情况 | 第67-68
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在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第68-69
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致谢 | 第69页 |