论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-24页 |
| 第二章 Ⅰ型胶原蛋白A1、A2 基因CDNA 全序列克隆及生物信息学分析 | 第24-63页 |
| 1 实验材料 | 第24-25页 |
| · 实验鱼 | 第24页 |
| · 主要试剂及试剂盒 | 第24-25页 |
| · 主要仪器设备 | 第25页 |
| 2 实验方法 | 第25-32页 |
| · 草鱼总RNA 提取及检测(无菌条件，冰上操作) | 第25-26页 |
| · 通过Long-PCR 法对编码两种胶原蛋白的COL1A1 和COL1A2 基因全长cDNA 扩增 | 第26-28页 |
| · 引物设计及COL1A1 和COL1A2 编码区片段的获得 | 第28-29页 |
| · 通过3ˊ、5ˊ-RACE 法对COL1A1 和COL1A2 基因末端非编码区域的扩增和克隆 | 第29-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-60页 |
| · 草鱼总RNA 的提取 | 第32页 |
| · 草鱼COL1A1 和COL1A2 基因编码区片段扩增 | 第32-33页 |
| · COL1A1 和COL1A2 基因cDNA 全长序列克隆 | 第33-34页 |
| · 草鱼COL1A1 和COL1A2 基因序列分析 | 第34-44页 |
| · 序列比对以及系统进化分析 | 第44-54页 |
| · COLlA1 和 COLlA2 蛋白序列的生物信息学分析 | 第54-60页 |
| 4 讨论 | 第60-63页 |
| 第三章 蚕豆对草鱼Ⅰ型胶原蛋白基因组织表达调控研究 | 第63-73页 |
| 1 材料 | 第63页 |
| · 实验材料 | 第63页 |
| · 主要仪器 | 第63页 |
| 2 方法 | 第63-64页 |
| · RNA 提取 | 第63页 |
| · cDNA 第一链的合成 | 第63页 |
| · 引物设计 | 第63-64页 |
| · RT-PCR 检测目的基因的表达 | 第64页 |
| · 统计分析 | 第64页 |
| 3 结果与分析 | 第64-71页 |
| · 草鱼COL1A1 和COL1A2 基因的组织分布及差异性表达 | 第64-70页 |
| · 蚕豆对草鱼COL1A1 和COL1A2 基因表达差异性影响分析 | 第70-71页 |
| 4 讨论 | 第71-73页 |
| 第四章 蚕豆对草鱼肌肉胶原蛋白含量及Ⅰ型胶原蛋白基因表达调控研究 | 第73-85页 |
| 1 材料与方法 | 第73-79页 |
| · 实验材料 | 第73页 |
| · 主要试剂和仪器 | 第73-76页 |
| · 实验方法 | 第76页 |
| · 实时荧光定量RT-PCR | 第76-77页 |
| · 蛋白免疫印迹反应 | 第77-78页 |
| · 统计学方法 | 第78-79页 |
| 2 结果 | 第79-82页 |
| · 胶原蛋白含量 | 第79页 |
| · 超微结构观察 | 第79-80页 |
| · 实时荧光定量RT-PCR | 第80-81页 |
| · 蛋白免疫印迹结果分析 | 第81-82页 |
| 3 讨论 | 第82-85页 |
| 第五章 脆肉鲩鱼皮和肌肉胶原蛋白的理化特性及其影响因素比较分析 | 第85-94页 |
| 1 材料与方法 | 第85-87页 |
| · 实验材料 | 第85-86页 |
| · 实验方法 | 第86-87页 |
| 2 结果与讨论 | 第87-93页 |
| · 胶原蛋白的粘度 | 第87-88页 |
| · 胶原蛋白的热变性温度 | 第88-89页 |
| · 胶原蛋白的凝胶强度 | 第89-90页 |
| · 影响胶原蛋白凝胶强度的几个因素 | 第90-93页 |
| 3 结论 | 第93-94页 |
| 总结 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-104页 |
| 附录A 常用试剂与缓冲液的配制 | 第104-106页 |
| 附录B 缩略词表 | 第106-107页 |
| 附录C 在读期间拟发表的文章 | 第107-108页 |
| 附录D 部分基因结构功能域三级结构图 | 第108-111页 |
| 致谢 | 第111
页 |
