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PRRSV JL/07/SW分离株GP5基因克隆与真核表达及间接ELISA方法的建立

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PRRSV JL/07/SW分离株GP5基因克隆与真核表达及间接ELISA方法的建立
论文目录
 
摘要第1-6页
Abstract第6-9页
英文缩写词表第9-10页
前言第10-11页
第一部分 文献综述第11-20页
  第一章 猪繁殖与呼吸综合征病毒研究进展第11-16页
    1. PRRSV的基因组结构及相关蛋白第11-14页
      · PRRSV基因组结构第11-12页
      · PRRSV基因组编码的蛋白质第12-14页
    2 PRRSV免疫学特性第14-16页
      · 体液免疫第14-15页
      · 细胞免疫第15-16页
  第二章 真核表达系统及在病毒研究中的应用第16-20页
    1 各种真核表达系统的特点第16-18页
      · 酵母表达系统第16-17页
      · 昆虫杆状病毒表达系统第17页
      · 哺乳动物细胞表达系统第17-18页
    2 真核细胞表达系统的应用与前景第18-20页
      · 酵母表达系统的应用与前景第18-19页
      · 杆状病毒表达系统的应用前景第19页
      · 哺乳动物细胞表达系统的发展趋势第19-20页
第二部分 研究内容第20-53页
  第一章 PRRSV JL/07/SW毒株GP5基因的克隆与分析第20-33页
    1 材料第20-22页
      · 病毒、菌种、细胞和克隆载体第20页
      · 实验试剂与耗材第20页
      · 主要仪器第20-21页
      · 溶液配制第21-22页
    2 方法第22-26页
      · PRRSV的培养增殖第22页
      · 猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组RNA的提取第22-23页
      · PRRSV GP5基因的扩增第23-26页
    3 结果第26-31页
      · 电镜结果第26页
      · RT-PCR扩增结果第26-27页
      · GP5基因的测序结果第27-28页
      · PRRSV JL/07/SW分离株GP5基因与核苷酸及氨基酸序列同源性比较第28-29页
      · PRRSV JL/07/SW分离株GP5基因遗传进化分析第29-30页
      · GP5蛋白抗原表位预测分析第30-31页
    4 讨论第31-32页
    5. 小结第32-33页
  第二章 PRRSV JL/07/SW毒株GP5基因的真核表达第33-44页
    1. 材料第33-35页
      · 质粒与菌体第33页
      · 酶与试剂第33-34页
      · 主要仪器第34页
      · 溶液及培养基第34-35页
    2 方法第35-39页
      · PRRSV ORF5片段基因重组真核表达载体的构建及鉴定第35-36页
      · 序列测定第36-38页
      · 蛋白印迹(Western-blot)第38-39页
    3 结果第39-42页
      · GP5基因重组真核表达载体的鉴定第39-40页
      · 重组质粒pCI-GP5转染Marc-145细胞第40-41页
      · SDS-PAGE结果第41页
      · Western-blot结果第41-42页
    4. 讨论第42-43页
    5 小结第43-44页
  第三章 PRRSV JL/07/SW毒株GP5重组蛋白间接ELISA方法的建立第44-53页
    1 材料第44-45页
      · 血清、蛋白第44页
      · 试剂第44页
      · 实验仪器第44-45页
      · 实验用溶液配制第45页
    2 方法第45-47页
      · PRRSV JL/07/SW株GP5重组蛋白的间接ELISA方法建立第45-47页
    3 结果第47-51页
      · ELISA方阵试验及抗原最佳包被条件的测定第47-49页
      · 间接ELISA特异性检测结果第49页
      · 重复性实验第49-50页
      · 猪繁殖与呼吸综合征病毒间接ELISA方法的应用第50-51页
    4 讨论第51页
    5. 小结第51-53页
结论第53-54页
参考文献第54-60页
致谢第60-61页
作者简介第61-62页
导师评阅表第62 页

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