论文目录 | |
| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-16页 |
| 符号说明及缩略词 | 第16-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-35页 |
| 1.1 纤维素与纤维素酶 | 第18-26页 |
| 1.1.1 纤维素与半纤维素 | 第18-20页 |
| 1.1.2 纤维素酶 | 第20-26页 |
| 1.2 纤维素酶降解纤维素的作用机制 | 第26-30页 |
| 1.3 纤维堆囊菌 | 第30-34页 |
| 1.3.1 纤维堆囊菌简介 | 第30-32页 |
| 1.3.2 纤维堆囊菌纤维素酶类及其降解行为 | 第32-34页 |
| 1.4 本论文工作开展思路和研究内容 | 第34-35页 |
| 第二章 So0157-2外切葡聚糖酶ScCe16A的异源表达与酶学表征 | 第35-68页 |
| 2.1 实验材料 | 第36-40页 |
| 2.1.1 菌株和载体 | 第36页 |
| 2.1.2 培养基 | 第36页 |
| 2.1.3 主要实验试剂 | 第36-39页 |
| 2.1.4 主要仪器设备与耗材 | 第39-40页 |
| 2.2 实验方法 | 第40-49页 |
| 2.2.1 外切葡聚糖酶ScCe16A序列分析 | 第40-41页 |
| 2.2.2 表达载体的构建 | 第41-44页 |
| 2.2.3 目的蛋白的表达纯化 | 第44-45页 |
| 2.2.4 重组蛋白酶学性质分析 | 第45-48页 |
| 2.2.5 r-ScCe16A的多克隆抗体制备 | 第48-49页 |
| 2.2.6 ScCe16A在So0157-2中的细胞定位 | 第49页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第49-66页 |
| 2.3.1 So0157-2外切葡聚糖酶ScCe16A序列分析 | 第49-52页 |
| 2.3.2 表达载体的构建 | 第52-53页 |
| 2.3.3 目的蛋白的诱导表达 | 第53-54页 |
| 2.3.4 目的蛋白纯化 | 第54-56页 |
| 2.3.5 酶学性质分析 | 第56-64页 |
| 2.3.6 r-ScCel6A多克隆抗体的制备及抗体的Western blot验证 | 第64-65页 |
| 2.3.7 ScCel6A在SoO丨57-2中的细胞定位 | 第65-66页 |
| 2.4 本章小结 | 第66-68页 |
| 第三章 So0157-2木葡聚糖酶ScXEG5的异源表达与酶学表征 | 第68-85页 |
| 3.1 实验材料 | 第68-69页 |
| 3.1.1 菌株及质粒 | 第68页 |
| 3.1.2 培养基 | 第68页 |
| 3.1.3 主要实验试剂 | 第68-69页 |
| 3.1.4 主要仪器设备与耗材 | 第69页 |
| 3.2 实验方法 | 第69-74页 |
| 3.2.1 序列生物信息学分析 | 第69页 |
| 3.2.2 表达载体的构建 | 第69-71页 |
| 3.2.3 目的蛋白的表达纯化 | 第71-72页 |
| 3.2.4 酶学性质分析 | 第72-74页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第74-83页 |
| 3.3.1 ScXEG5生物信息学分析 | 第74-76页 |
| 3.3.2 ScXEG5表达载体的构建 | 第76-77页 |
| 3.3.3 目的蛋白的诱导表达与纯化 | 第77-78页 |
| 3.3.4 重组蛋白酶学性质分析 | 第78-83页 |
| 3.4 本章小结 | 第83-85页 |
| 第四章 So0157-2内切葡聚糖酶ScCelS的异源表达与酶学表征 | 第85-99页 |
| 4.1 实验材料 | 第85-86页 |
| 4.1.1 菌株及质粒 | 第85页 |
| 4.1.2 培养基 | 第85-86页 |
| 4.1.3 主要实验试剂 | 第86页 |
| 4.1.4 主要仪器设备与耗材 | 第86页 |
| 4.2 实验方法 | 第86-91页 |
| 4.2.1 序列生物信息学分析 | 第86页 |
| 4.2.2 表达载体的构建 | 第86-89页 |
| 4.2.3 目的蛋白的表达纯化 | 第89-90页 |
| 4.2.4 酶学性质分析 | 第90-91页 |
| 4.3 实验结果与讨论 | 第91-98页 |
| 4.3.1 ScCelS生物信息学分析 | 第91-92页 |
| 4.3.2 ScCelS表达载体的构建 | 第92-93页 |
| 4.3.3 目的蛋白的诱导表达与纯化 | 第93-94页 |
| 4.3.4 重组蛋白酶学性质分析 | 第94-98页 |
| 4.4 本章小结 | 第98-99页 |
| 第五章 So0157-2内切葡聚糖酶ScCe19E的异源表达与酶学表征 | 第99-121页 |
| 5.1 实验材料 | 第99-100页 |
| 5.1.1 菌株及质粒 | 第99页 |
| 5.1.2 培养基 | 第99页 |
| 5.1.3 主要实验试剂 | 第99-100页 |
| 5.1.4 主要仪器设备与耗材 | 第100页 |
| 5.2 实验方法 | 第100-105页 |
| 5.2.1 序列生物信息学分析 | 第100页 |
| 5.2.2 表达载体的构建 | 第100-102页 |
| 5.2.3 目的蛋白的表达纯化 | 第102-103页 |
| 5.2.4 酶学性质分析 | 第103-104页 |
| 5.2.5 ScCe19E各结构域功能分析 | 第104-105页 |
| 5.3 实验结果与讨论 | 第105-119页 |
| 5.3.1 ScCe19E生物信息学分析 | 第105-106页 |
| 5.3.2 表达载体构建 | 第106-107页 |
| 5.3.3 目的蛋白异源表达与纯化 | 第107-110页 |
| 5.3.4 r-ScCe19E酶学性质分析 | 第110-115页 |
| 5.3.5 r-ScCe19E-1酶学性质及CBM功能分析 | 第115-118页 |
| 5.3.6 r-ScCe19E-2酶活性测定 | 第118-119页 |
| 5.4 本章小结 | 第119-121页 |
| 总结与展望 | 第121-123页 |
| 附录 | 第123-134页 |
| 参考文献 | 第134-141页 |
| 致谢 | 第141-142页 |
| 攻读硕士期间主要研究成果 | 第142-143页 |
| 附件 | 第143页 |
