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猪β防御素2基因的克隆表达及其活性分析

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猪β防御素2基因的克隆表达及其活性分析
论文目录
 
致谢第1-7页
摘要第7-8页
1 文献综述第8-19页
  · 防御素的研究进展第8-14页
    · 防御素的分类第8-12页
    · 防御素的抗菌机理及生物学活性第12页
    · 抗病毒作用及其活性第12-13页
    · 其他生物学活性第13页
    · 防御素的应用前景第13-14页
  · 猪源抗菌肽第14-19页
    · 猪源抗菌肽的种类第14-17页
    · 利用生物技术对防御素的研究状况第17-19页
2 引言第19-20页
3 材料与方法第20-31页
  · 材料与试剂第20-21页
    · 实验材料第20页
    · 菌种及质粒第20页
    · 工具酶第20页
    · 主要试剂及配制第20页
    · 培养基第20-21页
  · 实验方法第21-31页
    · 猪肝脏总RNA 提取---Trizol 法第21页
    · 引物的设计与合成第21页
    · RT-PCR第21-22页
    · PCR 产物的回收和纯化第22-23页
    · 回收的PCR 产物与PMD19-T 载体的连接第23页
    · 感受态细胞的制备及转化第23-24页
    · 质粒的提取第24页
    · 重组质粒PMD19-T-fPBD2 的鉴定第24-25页
    · PBD2 基因成熟肽序列cPBD2 的克隆第25-26页
    · 重组质粒PMD19-T-cPBD2 的鉴定第26页
    · 表达载体PET30a-PBD2 的构建第26-27页
    · 重组质粒pET30a-PBD2 的鉴定第27页
    · 重组工程菌株BL21-pET30a-PBD2 的诱导表达第27页
    · PBD2 表达蛋白的纯化与检测第27-31页
    · 目的蛋白抗菌活性的体外活性分析第31页
4 结果与分析第31-38页
  · RNA 提取结果第31-32页
  · RT-PCR 结果第32页
  · PMD19-T-fPBD2 鉴定第32-33页
    · PCR 鉴定第32页
    · 双酶切鉴定第32-33页
    · 重组质粒的序列测定结果第33页
  · cPBD2 成熟肽序列的PCR 扩增结果第33-34页
  · 重组质粒PMD19-T-cPBD2 的鉴定结果第34-35页
    · PCR 鉴定结果第34页
    · 重组质粒PMD19-T-cPBD2 的双酶切鉴定结果第34-35页
    · 重组质PMD19-T-cPBD2 的测序结果第35页
  · 重组表达质粒PET30a-PBD2 的鉴定结果第35-36页
    · PET30a-PBD2 的PCR 鉴定结果第35页
    · 双酶切鉴定结果第35-36页
    · 测序结果鉴定第36页
  · 蛋白活性的检测第36-38页
    · 体外抗菌活性的检测结果第36-37页
    · 目的蛋白热稳定性第37-38页
5 结论与讨论第38-39页
参考文献第39-46页
ABSTRACT第46页

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