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福寿螺多功能纤维素酶基因egx的克隆与功能研究
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福寿螺多功能纤维素酶基因egx的克隆与功能研究
论文目录
摘要
第1-6页
Abstract
第6-9页
第一章 引言
第9-22页
· 纤维素的利用
第9-12页
· 纤维素的结构
第9-10页
· 纤维素酶的应用
第10-12页
· 微生物和动物纤维素酶研究近况
第12-17页
· 纤维素酶分类
第12页
· 微生物纤维素酶结构
第12-16页
· 微生物纤维素酶降解模型
第16-17页
· 动物纤维素酶的研究
第17-18页
· 纤维素酶应用展望
第18页
· 毕赤酵母表达系统
第18-20页
· 毕赤酵母表达系统优点
第18页
· 毕赤酵母表达宿主菌
第18-19页
· 毕赤酵母表达载体
第19页
· 外源蛋白在毕赤酵母中的表达
第19-20页
本研究的目的和意义
第20-21页
技术路线
第21-22页
第二章 材料与方法
第22-34页
· 材料
第22-24页
· 动物材料
第22页
· 质粒和菌株
第22页
· 培养基
第22页
· 试剂和仪器
第22页
· PCR引物
第22-24页
· 方法
第24-34页
· 质粒DNA的小量提取
第24页
· DNA限制性酶切反应
第24-25页
· DNA片段的电泳回收
第25页
· DNA片段连接
第25页
· 大肠杆菌感受态细胞的制备
第25-26页
· 质粒DNA转化大肠杆菌
第26页
· 蛋白质的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳
第26-27页
· 毕赤酵母电击感受态细胞的制备
第27-28页
· 酵母电击转化
第28页
· 酵母基因组的提取
第28-29页
· 酵母重组子的PCR检测
第29页
· 外源蛋白在毕赤酵母中甲醇诱导分泌表达
第29-30页
· egx基因末端缺失PCR
第30页
· 福寿螺组织RNA提取和反转录
第30-31页
· 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量标准曲线绘制
第31页
· 纤维素酶活力测定
第31-33页
· 菌密度测定
第33-34页
第三章 结果与讨论
第34-59页
· 结果
第34-49页
· 福寿螺多功能纤维素酶egx基因的克隆
第34-36页
· 表达载体的构建
第36-38页
· 酵母转化及重组子表型筛选
第38页
· 酵母重组子的PCR检测
第38-39页
· PCR阳性重组子的表达
第39-40页
· 酶活力的计算
第40页
· 全长序列末端缺失片段的扩增
第40-49页
· 讨论
第49-54页
· EST片段克隆结果和分析
第54-59页
第四章 全文结论
第59-60页
参考文献
第60-65页
致谢
第65-66页
作者简历
第66页
本篇论文共
66
页,
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